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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
287
- 英文名:
Tricine-SDS-PAGE Cathod Buffer
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
BTN81214型Tricine-SDS PAGE阳极电泳液(干粉)大量库存促销的品牌:百奥莱博,是优质的蛋白质研究产品,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多Tricine-SDS PAGE阳极电泳液(干粉)等蛋白质研究产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:BTN81214型Tricine-SDS PAGE阳极电泳液(干粉)大量库存促销
编号:BTN81214
规格:10L
英文名:Tricine-SDS-PAGE Cathod Buffer
品牌:百奥莱博
产地:北京
本产品为干粉型Tricine-SDS-PAGE阳极电泳液,加水配制后即可直接使用,非常方便。
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
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·全长Bst DNA聚合酶
编号:BTN130612
英文名称:Bst DNA Polymerase, Full Length
规格:500U
全长的Bst DNA聚合酶来源于Bacillus stearothermophilus,它具有5´→3´聚合酶活性和双链特异的5´→3´核酸外切酶活性,但缺失3´→5´核酸外切酶活性。
产品特点:
1. DNA等温扩增。
2.引物延伸。
3. 80℃ 20分钟即可失活。
4. 建议反应温度不要超过70℃,不能用于热循环测序或PCR。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| Bst DNA聚合酶,全长(5U/μL) | 100μl |
| 10×反应Buffer | 1.5ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存、有效期一年。长期贮存需补加100μg/mL BSA或0.1% Triton X-100。
1×反应Buffer的组成:20mM Tris-HCl(pH8.8 @ 25 ℃),10mM KCl,10mM(NH4)2SO4,2mM MgSO4,0.1% Triton X-100。
活性定义及检测条件:1U指 65℃条件下,30分钟内使 10nmoL的dNTP 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。活性检测条件为:50mM KCl,20mM Tris-HCl(pH8.8),10mM MgCl2,30 nM M13mp18 ssDNA,70 nM M13 测序引物(-47)24 mer,200μm dATP,200μm dCTP,200μm dGTP,100μm[3H] dTTP,100μg/mL BSA和酶,65℃温育。
贮存条件:50mM KCl,10mM Tris-HCl(pH7.5),1mM DTT,0.1mM EDTA,0.1% Triton X-100和50%甘油,贮存于-20℃。
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·微量DNA助沉剂
编号:BTN3621
英文名称:DNApp DNA precipitation aid
规格:0.5mL
本品是一种经去DNase处理的,能有效地促进微量DNA沉淀回收的大分子聚合物。适用于提取样品中的微量DNA。该产品也适用于微量DNA的沉淀回收。
产品特点:
1.促进微量DNA的沉淀,其沉淀条件跟DNA相同的,5μl DNApp能有效促进微量DNA的乙醇或异丙醇沉淀和回收。
2.使用多样,可以在核酸提取的任何步骤中加入。既可以加到提取液中,也可以加到稀释的DNA样品中。
3.化学惰性,不含DNase,不影响核酸的A260/280光吸收,不影响后续的反应过程(如PCR和酶切等)。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一:用于提取微量组织样品中的DNA
加入裂解液中使用: 按10-20μl DNApp/mL 裂解液的比例将DNApp 加入常用DNA提取液中,然后按相应的操作规程直接提取DNA。如果裂解液中含有CTAB,则需要在最后醇沉淀时加入,后续处理不变。
二:用于沉淀回收反应体系中的微量DNA
直接将5-10μl DNApp 加入待沉淀的DNA溶液中,然后按盐/乙醇或盐/异丙醇沉淀DNA的经典操作规程沉淀DNA。
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文献和实验性凝胶中蛋白质的分离取决于它所带的电荷以及分子大小,不像SDS-PAGE电泳中蛋白质分离只与其分子量有关。 4. 非变性凝胶电泳中,酸性蛋白和碱性蛋白的分离是完全不同的,不像SDS-PAGE中所有蛋白都朝正极泳动。非变性凝胶电泳中碱性蛋白通常是在微酸性环境下进行,蛋白带正电荷,需要将阴极和阳极倒置才可以电泳。 5. 因为是非变性凝胶电泳,所有的电泳时候电流不能太大,以免电泳时产生的热量太多导致蛋白变性,而且步骤都要在0-4度的条件下进行,这样才可以保持蛋白质的活性,也可以降低蛋白质的水解作用。这点
,但是如果蛋白大,指示剂已经跑出去了,就要留意分清胶上下方向,切个小角是常用的方法。膜和滤纸一起裁最好(不过滤纸上下叠多了膜不好剪,硝纤膜容易裂,用利刀+尺子+垫厚报纸划比较容易)尽量和胶一样大小,胶用纯水冲洗一下后用电泳缓冲液平衡过再量。我自己通常剪的时候会故意长宽各比胶少1mm,保证膜和胶不会碰到对方背后的滤纸就好。 3. 对于特别小的蛋白,tricine SDS-PAGE电泳有助于提高蛋白大小在1KD—20KD间的分辨率,不用甘氨酸,丙烯酰胺的浓度也不用太高(可参考2004年中国生物工程杂志上有一篇
【资源】个人整理 Western Blot(步骤简略,但注意事项、经验总结、基本原理很全面)
长宽各比胶少1mm,保证膜和胶不会碰到对方背后的滤纸就好。3. 对于特别小的蛋白,tricine SDS-PAGE电泳有助于提高蛋白大小在1KD—20KD间的分辨率,不用甘氨酸,丙烯酰胺的浓度也不用太高(可参考2004年中国生物工程杂志上有一篇文章(有效分离1kD小肽的Tricine-SDS-PAGE方法)4. 转膜前胶要在转移缓冲液里平衡一下防止胶变形,也有助于进一步去掉可能有碍转膜的杂质。还有人在这一步浸泡帮助蛋白复性,可以直接在胶上检测蛋白活性。5. 膜漂在水面(或者甲醇液面)让液体
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