大提柱式细菌RNA提取试剂盒 RNA纯化

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大提柱式细菌RNA提取试剂盒 RNA纯化的品牌：百奥莱博，是优质的RNA纯化产品，用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多大提柱式细菌RNA提取试剂盒等RNA纯化产品请联*(代"系")我司咨询订购。

北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应大提柱式细菌RNA提取试剂盒 RNA纯化，产品信息：

类别：RNA纯化

英文名：Bacterial RNA Column large-scale extraction kit

产品名	产品编号	包装规格
大提柱式细菌RNA提取试剂盒	BTN80905	5次

编号：BTN80905

规格：5次

英文名：Bacterial RNA Column large-scale extraction kit

品牌：百奥莱博

产地：北京

本试剂盒是在本公司柱式细菌RNA提取试剂盒(BTN80103)基础上开发的大提升级产品，用于快速从各种常见的革氏阴性和革氏阳性细菌中大量提取总RNA。跟柱式细菌RNA提取试剂盒相比，它具有下列特点:

1. 单次样品处理量大，最多可以处理 30mL细菌培养物。

2. 操作简单快速，一次提取只需要 20分钟左右。

3. 所得 RNA 纯度高，OD260/OD280一般在2.0左右。一般不含基因DNA污染。

4.适用于各种革氏阴性和革氏阳性细菌。

 

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	50ml
大提离心吸附柱	5套
通用洗柱液	100ml
通用预洗脱液	5ml
RNA洗脱液	10ml
说明书	1份

 

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

 

使用方法：

下面的操作步骤是针对在 50mL塑料离心管中进行的大量提取的。

 

1.在 50mL塑料离心管中离心收集10-30mL新鲜细菌。注意:由于细菌RNA 半衰期十分短，所以，必须使用最新鲜的、处于对数生长期的细菌。

2. 吸尽液体培养基，加入10mL溶液A，用枪充分吹打细菌沉淀，确保细菌全部裂解，没有块状物。

3. 加入0.2倍体积的自备*仿(10mL溶液A需2mL*仿)，振荡器上充分振荡混均 30秒。

4. 5000-7000 rmp室温离心 3～5分钟。

5. 将上清液(约5-6mL的无色透明水相，有时水相比重大时，水相在下层，有机相即蓝相在上层，吸取时应吸取透明水相)转移到一个干净的50mL塑料离心管中。注意：离心后下层有机相和中间层含有 DNA和蛋白质，避免触及，否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见，可以留下少许上清液不取。同时吸取上清时最好缓慢进行，否则容易吸出交界面的不可见的丝状 DNA。

6. 加入等体积的溶液B，充分颠倒混匀。加入溶液B后，溶液为乳白色。

7. 将溶液转移到离心吸附柱中，5000-7000rpm室温离心 1分钟，弃穿透液。

8. 加 10mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，室温离心 1分钟，弃收集管中的穿透液。一次洗涤一般足够去除杂质。

9. 加 10mL 通用洗柱液，室温离心 1分钟，弃穿透液。此步可以省略。

10.室温 5000-7000rpm离心 2分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会影响 RNA的使用。

11. 加入1mL 通用预洗脱液，5000-7000rpm离心 1分钟。

12. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 收集管中，加入1mL RNA 洗脱液。

13.室温 5000-7000rpm离心 2分钟，离心管中溶液即为RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。

14. 重复 14-15 步一次，我司的大提离心吸附柱吸附能力较强，一般第二次洗脱还能洗脱较多的RNA。

15. RNA 完整性的电泳检测：如果需要做 Northern杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行 RNA电泳，因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques，28：414，2000)。

16. RNA产量产率测定：将5-10μL RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在 OD260的光吸收。通过光吸收可以得出 RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出 RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/组织用量)。

17. RNA 纯度测定：无污染的总 RNA的OD260/OD280一般在 1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响 RT-PCR等反应。

 

疑难解答：

Q：上样孔里的红色荧光物一定是DNA污染吗？

A：不是。用 TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳 RNA时容易产生此现象，初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA 通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用 TBE作电泳液的话)形成的复合物，加RNase处理后，这些红色荧光物(RNA)一般会消失。为避免此现象，建议最好使用甲醛变性胶电泳和RNA 专用上样液(如百奥莱博的RNAload)。

大提柱式细菌RNA提取试剂盒 RNA纯化专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司

关键词：大提柱式细菌RNA提取试剂盒,Bacterial RNA Column large-scale extraction kit,BTN80905

我公司是一家专业经营生化试剂、仪器、大提柱式细菌RNA提取试剂盒、实验室耗材的公司，代理许多国际先进水平的高科技产品，包括分子生物学、细胞生物学、免疫学等多个研究及应用领域。我们努力将欧美专业生产厂家的具有国际先进水平的产品推荐给各类研究人员；另一方面也非常重视自主产品研究和开发，推出了一系列具有竞争力的产品和服务。同时国家对于生物行业的发展给予了极大的重视，更多地侧重于科研的投入。

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编号	类别	名称
BTN131183	工具酶	链激酶
BTN3120	核酸电泳和回收	微量RNA助沉剂
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BTN100883	其他生化试剂	5M异硫*酸胍溶液(RNase-free)
BTN130831	DNA纯化	丝状真菌线粒体DNA提取试剂盒
BTN3071	RNA纯化	血液RNA提取试剂盒
BTN160227	其他细胞生物学试剂	甲醛-乙酸-乙醇固定液(FAA)
BTN100405	其他生化试剂	20×SSC溶液
BTN130812	DNA纯化	凋亡DNA提取试剂盒
BTN130994	DNA纯化	96孔板质粒DNA提取试剂盒(真空法)
BTN120619	核酸扩增(PCR)	dGTP溶液(100mM)
BTN60304	DNA纯化	真菌DNA提取试剂盒
BTN130821	细胞及免疫学	阿尔玛蓝细胞增殖与细胞毒检测试剂
BTN100825	其他培养基	自诱导培养基(lac启动子)
BTN91203	蛋白质研究	一步式胞浆蛋白微量制备试剂盒
BTN71207	RNA纯化	RNA洗脱液
BTN130918	核酸扩增(PCR)	dITP溶液(2.5mM)
BTN120511	工具酶	CpG甲基转移酶(M.SssI)
BTN130658	工具酶	无机焦磷酸酶(PPase)(酵母)
BTN91104B	探针标记及检测	Denhardt溶液(非同位素探针)
BTN70605	核酸电泳和回收	miRNA marker(miRNA电泳分子量标准)
BTN70701	DNA纯化	柱式病毒DNA提取试剂盒
BTN81213	蛋白质研究	Tricine-SDS PAGE上样液

 

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