北京β-半乳糖苷酶活性检测试剂盒促销

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百奥莱博专业生产销*(代"售")北京β-半乳糖苷酶活性检测试剂盒促销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京β-半乳糖苷酶活性检测试剂盒促销
编号：BTN130599
规格：24样
英文名：β-galactosidase Assay Kit
品牌：百奥莱博
产地：北京
本产品是分光光度法测定β-GAL活力的，测定原理为β-GAL分解对-硝基*(代"*")-β-D-吡喃半乳糖苷生成对-硝基*(代"*")酚，后者在400nm有最大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算β-GAL活性。

β-半乳糖苷酶广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，能够催化β半乳糖苷化合物中的β半乳糖苷键水解，此外还具有转半乳糖苷的作用。β-GAL不仅可为植物的快速生长释放储存的能量，还能在正常的多糖代谢、细胞壁组分代谢以及衰老时细胞壁降解过程中催化多糖、糖蛋白以及半乳糖脂末端半乳糖残基的水解，释放自由的半乳糖。

试剂盒组成：

 

成分	规格
酶提取液	50ml
溶液A	粉剂1瓶
溶液B	15ml
溶液C	50ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，4℃保存，其中试剂A需-20℃保存，有效期半年。

使用方法：
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

一、酶液提取
1．细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量(104个)：酶提取液体积(mL)为500～1000：1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL酶提取液)，超声波破碎细菌或细胞(冰浴，功率20％或200 W，超声3秒，间隔10秒，重复30次)；15000g 4℃离心10分钟，取上清，置冰上待测。
2．组织：按照组织质量(g)：酶提取液体积(mL)为1：5～10的比例(建议称取约0.1 g组织，加入1mL酶提取液)，进行冰浴匀浆。15000g 4℃离心10分钟，取上清，置冰上待测。

二、 测定操作步骤
1．分光光度计预热30分钟以上，调节波长至400nm，蒸馏水调零。
2．取出试剂A，临用前向试剂瓶中加入5mL蒸馏水，充分溶解备用，制备成溶液A工作液(用不完的溶液A仍需-20℃保存)。
3．样本测定(在EP管中依次加入下列试剂)：

试剂名称	对照管(μl)	测定管(μl)
样本	50	50
蒸馏水	200	0
溶液A工作液	0	200
溶液B	250	250
迅速混匀，放入37℃准确水浴30分钟
溶液C	1000	1000
充分混匀，400nm处测定吸光值A，计算ΔA=A测定-A对照。每个测定管需设一个对照管。

三、酶活性计算公式
标准条件下测定的回归方程为y=0.00543x -0.0027；x为标准品浓度(nmol/mL)，y为吸光值。
注：V反总：反应总体积，0.5mL；V样：反应中样本体积，0.05mL；V样总：加入酶提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细胞或细菌总数，500万；T：反应时间，30分钟。
1．按照样本蛋白浓度计算：
 酶活性定义：每mg 组织蛋白每分钟产生1nmol对-硝基*(代"*")酚定义为一个酶活力单位。
 β-GAL活力(nmol/min/mg prot)=[(ΔA+0.0027)÷0.00543×V反总]÷(V样×Cpr)÷T=61.39×(ΔA+0.0027)÷Cpr
 如果需要另外测定，建议使用本公司BCA蛋白质含量测定试剂盒。
2．按照样本鲜重计算：
 酶活性定义：每g组织每分钟产生1nmol对-硝基*(代"*")酚定义为一个酶活力单位。
 β-GAL活力(nmol/min/g鲜重)＝[(ΔA+0.0027)÷0.00543×V反总]÷(W×V样÷V样总)÷T=61.39×(ΔA+0.0027)÷W
3．按细菌或细胞密度计算：
 酶活性定义：每1万个细菌或细胞每分钟产生1nmol 对-硝基*(代"*")酚定义为一个酶活力单位。
 β-GAL活力(nmol/min/104cell)=[(ΔA+0.0027)÷0.00543×V反总]÷(500×V样÷V样总)÷T=0.123×(ΔA +0.0027)

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·柱式鼠尾DNA提取试剂盒
编号：BTN121102
英文名称：Rat tail DNA column extraction kit
规格：50次
大鼠和小鼠是重要的生命科学实验材料，鼠尾则是小鼠最佳活体样品，常用于基因型的快速检测。本试剂盒采用独特的酶和缓冲体系，可以快速得高质量、高纯度的基因组DNA。

产品特点：
1. 即开即用，不需要自己准备各种溶液。
2. 简单快速，最快可在60分钟内从0.5 鼠尾中提取到10μg DNA。
3. 柱式法回收，所得DNA 纯度高(OD260/280一般在1.7-1.9)。片段大(一般在20 kb以上)、纯度高。
4. 安全环保：无需有机试剂抽提。
5.可用于后续的酶切、PCR、Southern杂交、文库构建等实验。
6. 除鼠尾外，还可用于其他动物组织(心，肝、肾、脾和肌肉等)。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	50ml
蛋白酶K溶液(10mg/mL)	1ml
溶液B	15ml
溶液C	50ml
离心吸附柱(15层膜)	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液2.0	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存(蛋白酶K溶液需要低温运输，-20℃保存)，有效期一年。

使用方法：
1. 剪取0.5-1cm鼠尾(约15-30mg)，尽量剪短成的1mm左右小段，放入干净的1.5mL塑料离心管中。若不需要立即使用，可以在液氮中或-80℃长期放置，或-80℃放置数天。如果是动物心，肝、肾、脾和肌肉等组织，则取30mg左右并充分剪碎。
2. 加入1mL溶液A和20μl蛋白酶K溶液(10mg/mL)，37℃保温10小时(一般过夜保温就可以)。也可以放置于65℃金属浴或水浴中保温2小时，其间每间隔10分钟涡旋混匀一次(或用手指用力弹击离心管底部数次)以帮助鼠尾酶解。对于老年小鼠鼠尾，可以适当增加酶解时间到3-4小时。如果有温控混合器使反应体系始终处于摇晃状态，则效果更佳。
3. 加入0.3mL的溶液B和0.2mL的自备*仿，振荡器上振荡30秒充分混匀。
4. 12000rpm室温离心3分钟，小心将上清转移到新的1.5mL塑料离心管中。
5.在上清液中加入等体积的溶液C，上下颠倒30秒充分混匀。
6. 将混合液分两次转移到离心吸附柱中。每次是先将0.7-0.8mL混合液转移到离心吸附柱中，室温放置2分钟，12000rpm室温1分钟，弃穿透液。再把剩余的一半上柱，重复此操作。
7. 将0.7mL通用洗柱液加入到离心吸附柱中，12000rpm室温离心半分钟，弃穿透液。
8. 将0.3mL通用洗柱液加入到离心吸附柱中，12000rpm离心半分钟(此步为第二次洗涤，一般可以省略)。
9. 空甩离心吸附柱半分钟去除残留液体。
10. 将离心吸附柱放置在一新的1.5mL塑料离心管中，加入30-50μl DNA 洗脱液2.0。
11. 12000rpm离心1分钟，管底即为DNA溶液，可立即用于PCR，也可长期保存在－20℃。


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SV1633 SNAP-Surface 488
YT374 DNA聚合酶(高保真)(高效率)(双平端克隆) Efficient & HiFi DNA Polymerase
WE0158 miRNA荧光定量检测试剂盒 miRNA qPCR Assay Kit
BTN130843 分枝杆菌RNA提取试剂盒 Mycobacterium RNA extraction kit
SV0980 5-甲基-dCTP
YT021 DNA Ladder(100bp-10kb)(21条带)(DNA分子量标准) DNA Ladder (0.1-10 kb, 21 bands)
KFS104 线粒体细胞核转位分析试剂盒(HCS法)
SY0332 斑蝥素(蛋白*(代"磷")酸酶2A抑制剂) Cantharidin (Inhibitor of PP2A)
SV0066 AsiSI限制性内切酶 AsiSI Restriction Endonuclease
KFS305 自噬检测试剂盒(荧光显微镜，MDC法)
HR0145 植物线粒体蛋白提取试剂盒 Plant mitochondrial protein extraction kit
YT923 EGFR抑制剂(AEE788) 3NVP-AEE788
BTN130647 尿嘧啶糖基化酶抑制剂(UGI) Uracil Glycosylase Inhibitor
BTN100948 橙黄G溶液(电泳级) Orange G Solution,electrophoresis grade
SV1485 蛋白去糖基化混合液 Protein deglycosylated mixture
YT268 EMSA定制探针(1.75μM) EMSA Probe(1.75μM)
BTN90504 大肠杆菌XL1-Blue化学感受态细胞 E.coli XL1-Blue Chemical Competent Cell
SY0593 溶酶体绿色荧光探针 Lysosome Green DND-189
SV0760 TspMI限制性内切酶 TspMI Restriction Endonuclease
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·一站式miRNA柱式提取试剂盒
编号：BTN80104
英文名称：One-stop miRNA column extraction kit
规格：50次
本试剂盒是目前国内外市场上最快速最简单的小RNA分离纯化产品。

试剂盒特点：
1.一步法直接分离纯化小RNA，比两步法(先分离总RNA和再纯化其中的小RNA)和PAGE电泳回收法更简单。得到的小RNA长度大部分在200nt以下，包括5S RNA、tRNA、miRNA、Pre-miRNA、pri-miRNA、siRNA、shRNA和snRNA等。
2. 柱式操作，比miRNA提取试剂盒更加简单快捷，整个过程只需要十多分钟。
3.适用范围广，可以用于动物组织、血液及部分植物组织等实验材料。
4.小RNA 纯净，OD260/280一般都在1.9以上。
5.产率一般为20-40μg/100mg动物组织。
6. 无基因组DNA的污染。
7.可用于RT-PCR、miRNA 标记、microarray等后续实验。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	25ml
溶液B	25ml
溶液C	50ml
离心吸附柱	100套
通用洗柱液	50ml
RNA洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
由于离心吸附柱的吸附量限制，本产品每次提取只能处理100mg左右的各种组织，可以在1.5mL塑料离心管中。如果处理样品量大，请分成很多相当于微量提取的量进行，最后再收集在一起。

1. 新鲜配制裂解液。将溶液A和溶液B按1:1的比例混合，然后根据组织细胞类型的不同分为下面及种情况使用。注意：溶液A和溶液B混合后必须立即使用，不要放置，否则会产生沉淀。
a)对贴壁细胞：吸尽培养液，在每10平方厘米细胞中加入1mL新鲜配制的裂解液，用枪轻柔吹打数次，确保细胞全部裂解。
b)对悬浮细胞：离心收集细胞，吸尽液体，在每1-5×106 悬浮细胞中加入1mL新鲜配制的裂解液，用枪轻柔吹打数次，确保细胞全部裂解。如果是fibroblasts或carcinoma cell，1mL 新鲜配制的裂解液的细胞使用量不要超过1×106个细胞。
c)对新鲜的动物组织：先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入10mL或15mL塑料离心管中，每50-100mg 组织加1mL 新鲜配制的裂解液，用匀浆器匀浆30秒左右。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA)，建议组织的使用量不要超过50mg/mL裂解液，否则十分容易产生DNA污染。
d)对新鲜的植物组织：先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入10mL或15mL塑料离心管中，每50-100mg 组织加1mL 新鲜配制的裂解液，用匀浆器匀浆30秒左右。
e)对 RNAhold 保存动物或植物组织：先用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块，放入10mL或15mL塑料离心管中，每50-100mg组织加1mL新鲜配制的裂解液，用匀浆器匀浆30秒左右。
2. 将裂解物转移至一个干净的1.5mL塑料离心管中，然后加入0.2倍体积的自备*仿(1mL裂解物需0.2mL *仿)，振荡器上充分振荡混均30秒。
3. 12000～15000g室温离心3～5分钟。
4. 将上清液(约0.6-0.8mL)转移到一根离心吸附柱中以去除大RNA(最好标记以跟后面要用的专门吸附小RNA的另一离心吸附柱区别开来，本试剂盒提供的离心吸附柱之间没任何区别，可以随机选一个做大RNA 吸附，另一个做小RNA 吸附)。注意：离心后下层有机相和中间层含有DNA和蛋白质，避免触及，否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见，可以留下100μL上清液不取。同时吸取上清时最好缓慢进行，否则容易吸出交界面的不可见的丝状DNA。
5. 12000～15000g室温离心半分钟，收集管中的穿透液。大RNA 及DNA将与离心吸附柱的膜结合，小RNA 将存在于穿透液中。但由于离心吸附柱的最大吸附能力为40μg动物RNA，20μg植物RNA，如果样品中的大RNA含量高于上面数值，则穿透液中将同时含有大RNA和小RNA，在此情况下，穿透液需要再次重复上柱以去除大RNA。由于此时离心吸附柱已经吸附了大RNA，所以需要预处理(具体步骤见本手册最后的附录)。
6.在最后得到的不含大RNA的穿透液中加等体积的溶液C，混匀。此时溶液的总体积约1.5mL。
7. 先转移约0.75mL 到一新的离心吸附柱中。注意：不要使用已经使用过的、用来吸附大RNA的离心吸附柱。12000～15000g室温离心半分钟，弃收集管中的穿透液。
8. 将上步上柱剩余的样品转移到离心吸附柱中，12000～15000g室温离心半分钟，弃收集管中的穿透液。
9. 加 0.7mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液。
10. 加 0.3mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液。此步一般可以省略。
11. 12000～15000g室温离心半分钟以甩出残联液体。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会影响miRNA的使用。
12. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 收集管中，加入50-100μLRNA 洗脱液。
13. 12000～15000g室温离心半分钟，离心管中溶液即为miRNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。

附录：
1. 将结合有大RNA和DNA的离心吸附柱中加入0.1mL自备的超纯水,12000～15000g室温离心半分钟，弃收集液。
2. 再加 0.1mL自备的超纯水，重复上步一次。
3. 将第5 步的得到、需要进一步去除其中大RNA和DNA污染的穿透液直接上柱，12000～15000g室温离心半分钟，收集穿透液(此穿透液含小RNA)。
4. 如果大 RNA 已经去干净，可以直接进入第6 步；如果大RNA 没有去除干净，则用本附录1-2的方法处理离心吸附柱，然后再将此穿透液加入(接本附录第3 步)。一般样品只需要额外处理一次就可以去除全部的大RNA污染。

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