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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输
- 保质期:
长期
- 英文名:
DTT,Protein Grade
- 库存:
573
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
DTT(蛋白级)现货促销是高品质的蛋白质研究产品,由北京百奥莱博供应,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多DTT(蛋白级)等蛋白质研究产品请联系我司咨询订购。
名称:DTT(蛋白级)现货促销
编号:BTN131053
英文名:DTT,Protein Grade
产地:国产|进口
规格:5g
品牌:百奥莱博
本产品是用于还原蛋白质二硫键的水溶性试剂。维持单硫醇的还原状态并可定量还原二硫键。 使用DTT和Ellman 试剂可以特异、灵敏地分析二硫键。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
关于DTT(蛋白级)现货促销的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·辛甲基β葡糖苷
编号:BTN131044
英文名称:Octyl-β-Glucoside
规格:1g
本产品是一种广泛用于溶解膜蛋白的非离子型去垢剂。低分子量,可通过透析去除。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
·T7核酸外切酶
编号:BTN130632
英文名称:T7 Exonulease
规格:1000U
本产品作用于双链DNA,沿 5´→3´方向催化去除 5´单核苷酸,它既能从5´末端起始消化,也能从双链DNA的切刻或缺口处起始消化。它既能降解 5´磷酸化 DNA 也能降解 5´去磷酸化DNA。据报道,它能沿 5´→3´方向降解RNA/DNA杂交双链上的RNA或DNA,但不能降解双链或单链RNA。该酶纯化自含TYB12内含肽融合子的E.coli菌株。
产品特点:
1.5´→3´核酸外切酶活性。
2.切下DNA的5´单核苷酸。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| T7核酸外切酶(10U/μL) | 1000U |
| 10×反应Buffer | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位指在50μL反应体系中,25℃条件下,30分钟内能从双链DNA底物上催化产生1nmol的酸溶性脱氧核糖核苷酸所需要的酶量。
·一步式胞浆蛋白微量制备试剂盒
编号:BTN91203
英文名称:One-Step Cytoplasmic Protein Miniprep Kit
规格:30次
本产品是专门用于小量真核培养细胞中制备胞浆蛋白.细胞质是真核细胞活动的重要场所,很多与新陈代谢和信号传递的蛋白质都存在于细胞质中,这些蛋白就叫胞浆蛋白。
产品特点:
1.一步式操作,整个提取制备过程简便,只需要半小时。
2. 实验重复性好,尤其适合同时处理多个样品。
3.可用于培养的动物细胞,也可以用于新鲜动物组织细胞。
4. 温和裂解法,制备的胞浆蛋白能保持天然活性,可以直接用于活性检测、蛋白浓度测定、各种蛋白质电泳等后续研究。
储存条件:低温运输,4℃保存、有效期一年。
使用方法:
将培养到55%-65%覆盖率的体外培养的真核细胞用胰酶法处理后转移到离心管中,离心30秒,在细胞沉淀中加入0.5mL溶液A,悬浮后冰浴10分钟,振荡10分钟,混匀后室温离心10秒,上清即为细胞浆提取物,可以直接放-70℃保存或直接使用。
DTT(蛋白级)现货促销关键词:DTT,Protein Grade,DTT(蛋白级),BTN131053
·柱式石蜡包埋组织DNA提取试剂盒
编号:BTN130934
英文名称:FFPE DNA column extraction kit
规格:30次
·dCTP溶液(2.5mM)
编号:BTN130915
英文名称:dCTP Solution(2.5mM)
规格:2mL
dCTP分子式为C9H13N3O13P3Na3,分子量是533.1,消光系数为9.1×103M-1×cm-1(pH7.0)。λmax为271nm。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
·柱式分枝杆菌RNA提取试剂盒
编号:BTN130845
英文名称:Mycobacteria RNA Column extraction kit
规格:50次
dCTP分子式为C9H13N3O13P3Na3,分子量是533.1,消光系数为9.1×103M-1×cm-1(pH7.0)。λmax为271nm。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
·糖原干粉(分子生物学级)
编号:BTN131189
英文名称:Glycogen Powder
规格:1g
本产品为分子生物学级糖原干粉。不含DNase,RNase,可以用作沉淀DNA或RNA的辅助沉淀剂。
储存条件:室温运输和保存,有效期一年。
·20% PVP K30溶液(DNA级)
编号:BTN100865
英文名称:Glycogen Powder
规格:250mL
本产品为分子生物学级糖原干粉。不含DNase,RNase,可以用作沉淀DNA或RNA的辅助沉淀剂。
储存条件:室温运输和保存,有效期一年。
·一步法无内毒素质粒DNA提取试剂盒
编号:BTN80201
英文名称:One-step Endotoxin-free plasmid DNA extraction kit
规格:50次
本试剂盒是在一步式质粒DNA提取试剂盒2.0(BTN70903)和液相内毒素清除剂(BTN60607)两产品的基础上开发出来的无内毒素质粒DNA提取试剂。用本产品提取的质粒DNA,内毒素的污染浓度低,适合于转染等对内毒素的污染敏感的实验。
试剂盒特点:
1.在提取质粒前去除内毒素(存在于细菌表面),从源头上避免料内毒素和质粒DNA 接触,从根本上防止了内毒素对质粒DNA的污染。
2. 独创的一步法质粒DNA提取技术,操作快捷,只需要5-10分钟。
3.质粒回收率高,一次处理后90%的质粒DNA可以回收回来。
4. 得到的质粒DNA可以直接用于转染等实验。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 菌体内毒素清除剂 | 200ml |
| 溶液A | 50ml |
| 吸附柱活化液 | 25ml |
| 离心吸附柱(小提) | 50只 |
| 离心吸附柱(小提)套管 | 50只 |
| 通用预洗液 | 50ml |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脱液2.0 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存(溶液A最好4℃保存),有效期一年。
使用方法:
一:菌体内毒素的清除
1. 收集1.5-3mL E.coli 饱和菌液,12000rpm离心1分钟,弃上清,得到细菌沉淀。
2.在沉淀中加入1mL菌体内毒素清除剂,温和混匀后10000-12000rpm离心1分钟,弃上清(含内毒素)。
3. 再重复上述操作3次,得到的菌体沉淀可以直接进入下面的一步法质粒DNA提取操作。
二:一步法质粒DNA提取
4.在菌体沉淀中加入0.6mL溶液A(用前需摇匀),充分吹打或振荡30秒裂解细菌,直到裂解液变澄清(一般需要半分钟左右)。注:此方法丌同于碱裂解法,故可以充分吹打或振荡。
5.活化离心吸附柱:在离心吸附柱中加入0.5mL 吸附柱活化液,套上收集管后室温放置2分钟,然后12000rpm离心2分钟,倒弃穿透液,再将吸附柱套上收集管后待用。活化后的离心吸附柱必须立即使用。如果丌活化,质粒得率将低20-40%左右。
6. 将第4 步得到的裂解液全部转移到离心吸附柱中,室温静置2分钟使质粒DNA 不膜结合。注意:必须静止2分钟,否则质粒DNA 丌容易吸附上。
7.室温12000~15000g离心半分钟,弃穿透液。
8.在离心吸附柱中加入0.6mL的通用预洗液(注意:是通用预洗液,丌是通用洗柱液,丌要用错。通用预洗液非常容易产生沉淀,用前需要加热到60℃左右使之融化,混匀后再用),室温12000~15000g离心半分钟,弃穿透液。
9.在离心吸附柱中加入0.6mL的通用洗柱液,室温12000~15000g离心半分钟,弃穿透液。
10.在离心吸附柱中加入0.4mL的通用洗柱液,室温12000~15000g离心半分钟,弃穿透液。
11.室温12000~15000g离心半分钟,甩干残留液体。
12. 将离心柱置于一个新的1.5mL自备塑料离心管中,加入30-100μL DNA洗脱液2.0,室温放置2分钟。
13. 12000~15000g离心半分钟,离心管底溶液即无内毒素质粒DNA。
DTT(蛋白级)现货促销关键词:DTT,Protein Grade,DTT(蛋白级),BTN131053
·MTT检测试剂盒
编号:BTN111105
英文名称:MTT Assay Kit
规格:500次
MTT广泛用于检测细胞生长,其原理是MTT可以被活细胞线粒体内的脱*酶还原生成深紫色的formazan结晶,而死细胞则无此活性。深紫色的formazan结晶被溶解后可以通过测定490nm波长的光吸收而测定出其浓度,并由此推测出细胞的活力,细胞增殖越旺盛,则吸光度越高;细胞毒性越大,则吸光度越低。其原理如下:
产品特点:
1.采用独特的Formazan溶解液,可以充分溶解formazan,减少误差。
2.背景低,灵敏度高,线性范围宽,重复性好。
3.本产品为足够500次(5个96孔细胞培养板)微孔板检测。
4.可用于生物活性因子活性检测、抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验、肿瘤放射敏感性测定等。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 5ml |
| 溶液B | 50ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输、-20℃保存(但溶液B也可以常温运输和保存),有效期一年。
使用方法:
下面操作是检测细胞毒性的试验,其他应用跟此类似或更简单(如生长曲线试验),操作步骤可以以此为基础稍作修改即可,故不再赘述。
㈠、接种细胞
1.按常规胰酶消化法消化汇合的单层细胞,收集到含血清的培养基中。
2.200g离心5分钟收集细胞沉淀。
3.用培养基重悬细胞沉淀,制备成单细胞悬浮液并计数。
4.将细胞稀释到2.5×10³个/mL~5×10⁴个/mL之间(需要根据细胞的生长速度决定),如果不知道生长数度,一般可以稀释到1×10⁴个/mL。
5.将足够量的细胞悬液转移到培养皿中(便于用排枪取样)。一个96孔板的MTT检测需要约20mL的细胞悬液。
6.用排枪在96孔板除的第2-11列各孔正中央加入200μL细胞悬液(对正常细胞)。如果是肿瘤细胞,则加入100μL肿瘤细胞悬液和100μL培养基(总体积为200μL)。注意:一定要把细胞加在孔的正中,否则细胞会聚集在孔的角落处,影响试验。
7.用排枪在96孔板除的第1和第12各孔中加入跟细胞悬液等体积的培养基。第1 列各孔将作为+培养基-细胞+MTT对照(用于测OD时调零),第12列加培养基的作用是减少边缘效应对第11 列反应的影响。
8.按常规细胞培养方法在37℃和5% CO2条件下孵育1-3天,使细胞进入指数生长期。
㈡、药物处理
9.用培养基将药物稀释到8个待测浓度(如果不知道待测浓度,则需要预试验确定),一般一种药物需要做3块平行板。
10.去除第2到第11列(共10列)各孔中的培养基(不要触动细胞),保留第1 列和第12列各孔中的培养基。
11.在第2和第11列(共2列)的各孔中加入200μL新鲜培养基,这些孔将作为+培养基+细胞-药物的对照。
12.在第3到第10列(共8列)各孔中加入8个浓度梯度的待测药物,每列加入一个浓度的药物。
13.按常规方法把96孔板继续放在在37℃和5% CO2条件下孵育一定的时间,此段时间即为药物处理细胞的时间,由用户自己决定。
14.处理结束后去除第2 到第11列(共10列,均含细胞)所有孔中的培养基,并再加入100μL新鲜培养基。
15.每天换培养使细胞数量扩增2-3倍(所需时间随细胞不同而不同)。
㈢、存活细胞计数
16.在生长末期,去除第1到第11列各孔中的培养基后,再加入100μL新鲜培养基和10μL溶液A(含MTT成分),用锡箔包裹住96孔板后放在37℃和5% CO2条件下继续培养4-8小时。注意:溶液A在低温情况下会凝固,使用前请室温放置或20-25℃水浴至全部溶解,摇匀后使用。MTT有致癌性,一定要带手套操作。
17.小心吸弃孔内培养基(含溶液A)。由于培养基可能会影响光吸收,最好尽可能去除。
18.每孔加入100μL溶液B,置摇床上低速振荡10分钟,使MTT形成的formazan结晶物充分溶解。
19.由于产物不稳定,故需要立即在酶联免疫检测仪上选择490nm测定吸光度。
注意:用第1 列各孔(+培养基-细胞+MTT对照)调零。
20.计数同样处理的各次重复的平均值。
21.以药物浓度为横轴,以吸光度为纵轴绘制曲线。由于各处理吸光度绝对值差别很大,一般需将其转化成生长抑制率(以不加药物的第2和第11列各孔数据的平均数作为100%),这样便于计算出IC50,用于各种药物处理效果的比较。注意:如果测生长曲线,则以时间为横轴。正常生长曲线一般呈现S型,具有促进作用的则斜率加大。
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文献和实验联物 1 瓶 (7 mL) 试剂 C. 蛋白阻断剂 1 瓶 (7 mL) C0102 鼠兔通用SABC(HRP) 试剂盒 200片 300 Vector分装 试剂盒成分(切片数以每张切片滴加50ul 计算) :
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:用于放射免疫、酶联免疫以及作为稀释剂或者封闭剂等。 5、 牛血清白蛋白(细胞培养级),纯度98%即可,但是要求脂肪酸含量和内毒素含量极低,如:sigma货号为A8806的BSA(国外长期缺货,国内也没现货的)以及Equitech bio货号为BAH66的BSA(我们公司长期有现货供应)。 作用:细胞培养及细胞培养相关的实验等。 6、 金标级牛血清白蛋白,高纯度,纯度99%以上。
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