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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量供应
- 供应商:
上海彩佑实业有限公司
- 检测范围:
6个月
- 检测方法:
ELISA
- 适应物种:
小鼠
- 标记物:
见说明书
- 样本:
血清血浆
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥800.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥2200.0 |
试剂盒的检测原理:
参考图1,组织、细胞等样品表面的抗原先与一抗结合,后者再与生物素标记的二抗结合;按照适当比例将Streptavidin和生物素标记的辣根过氧化物酶(Biotin-labeled Horseradish Peroxidase, Biotin-HRP)或生物素标记的碱性磷酸酶(Biotin-labeled Alkaline Phosphatase, Biotin-AP)混合,形成网络状的SABC-HRP或SABC-AP (Streptavidin-Biotin Complex containing HRP/AP)复合物;接着二抗上标记的生物素再与SABC-HRP/AP结合,加入HRP/AP底物进行显色或发光反应即可检测到相应的信号。其中Streptavidin和Biotin-HRP/AP混合后形成网络状复合物是信号能被放大的关键,相当于一个待检测的生物素分子通过SABC-HRP/AP复合物的识别最终可以由很多个HRP/AP分子来显示其信号,从而达到了信号放大的效果。
图1. SABC试剂盒的检测原理图。图中以生物素标记的HRP为例,生物素标记AP的检测信号放大原理与其完全一致。

试剂盒检测效果:
参考图2和图3,免疫染色的信号可以轻松增强5倍以上!
图2. Hela细胞Tubulin免疫染色效果图。A. 阴性对照组(不加一抗)。B. SABC-HRP实验组。C. HRP标记二抗对照组。
图3. Hela细胞Tubulin免疫染色效果图。A. 阴性对照组(不加一抗)。B. SABC-AP实验组。C. AP标记二抗对照组。
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文献和实验和含量进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学(immunohistochemistry)技术或免疫细胞化学(immunocytochemistry)技术。 2. 原理 根据抗原抗体反应和化学显色原理,组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合,再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应,前者再用标记辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AKP)等的抗生物素(如链霉亲和素等)结合,最后通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分,在光学
即可)。 5、细胞通透:目的是使抗体能够充分地进入胞内进行结合反应。一般用Triton X-100、蛋白酶k等通透液。如Triton X-100可以溶解细胞膜、细胞核膜、细胞器膜上的脂质而使抗体及大分子结构的物质进入胞浆和胞核内,故在细胞免疫组化时尤为推荐使用,这样抗体就能顺利进入胞内与相应抗原结合。在免疫组织化学(>10um厚切片) 和免疫细胞化学中一般用Triton X-100 作为细胞通透剂,在膜上打孔。 6、灭活内源性过氧化物酶和生物素:在传统的ABC法和SP法中,免疫组化反应结果容易收到
性过氧化物酶和生物素 在传统的ABC法和SP法中,免疫组化反应结果容易收到内源性过氧化物酶和生物素的干扰,必须用过氧化氢和卵白素等进行灭活。灭活内源性POD一般3%过氧化氢灭活时间短点,可以10min左右,而0.3%过氧化氢则可以适当延长封闭时间,一般10~30 min;用甲醇配置过氧化氢比双蒸水或PBS可能好在保护抗原和固定组织作用,过氧化氢孵育时间过长易引起脱片;现用现配,配好后4度避光保存。不过,现在已有“第二代即用型免疫组化试剂盒”避免内源性生物素的干扰,推荐使用。 7、血清
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