网状纤维染色实验

                网状纤维染色实验服务

一、实验器材及试剂
1、 实验器材
2、 主要实验试剂

二、实验步骤
1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min，自来水洗。
2、酸性高锰酸钾染色：将高锰酸钾与硫酸1：1混合成酸性高锰酸钾，滴加该混合液处理
5min，蒸馏水洗。
3、草酸染色：滴加草酸漂白1-2min或者组织变成无色即可，蒸馏水洗3次。
4、硫酸铁铵染色：滴加硫酸铁铵染色5-15min(避光)，蒸馏水洗3次。
5、银染：取硝酸银2ml，逐滴加入浓氨水，边加边摇匀，出现沉淀后继续滴加浓氨水，至
沉淀刚好溶解，加入NaOH 2ml，再次形成沉淀，逐滴加入浓氨水，至沉淀刚好溶解，
加入蒸馏水定容至40ml，即为银氨液。滴加银氨液处理1-5min(避光)，蒸馏水洗3次。
6、还原染色：切片入10%的中性甲醛液还原1-3min(避光)，蒸馏水洗3次。
7、脱水封片：切片依次入无水乙醇I 5min -无水乙醇II 5min-无水乙醇Ⅲ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min透明，中性树胶封片。
8、显微镜镜检，图像采集分析。

三、结果判读：
网状纤维呈黑色或者黑褐色，背景呈棕黄色。

四、注意事项：
1、银氨液在避光4℃条件下可保存1-2月，使用前复温，可根据配制后存储时间的长短，
在第4、5步适当延长染色时间，促使银离子的结合。
2、NaOH、硫酸和草酸可以不避光常温保存，其余染色全部避光常温保存。
3、染色过程中，需要使用避光的染色盒进行染色。
4、在配制银氨液过程中，沉淀恰好溶解要严格控制。



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