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- 网状纤维染色实验服务
- 上海
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商：
上海经科化学科技有限公司
- 服务名称：
网状纤维染色实验服务
- 规格：
张
网状纤维染色实验服务
一、实验器材及试剂
1、 实验器材
2、 主要实验试剂
二、实验步骤
1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min，自来水洗。
2、酸性高锰酸钾染色：将高锰酸钾与硫酸1：1混合成酸性高锰酸钾，滴加该混合液处理
5min，蒸馏水洗。
3、草酸染色：滴加草酸漂白1-2min或者组织变成无色即可，蒸馏水洗3次。
4、硫酸铁铵染色：滴加硫酸铁铵染色5-15min(避光)，蒸馏水洗3次。
5、银染：取硝酸银2ml，逐滴加入浓氨水，边加边摇匀，出现沉淀后继续滴加浓氨水，至
沉淀刚好溶解，加入NaOH 2ml，再次形成沉淀，逐滴加入浓氨水，至沉淀刚好溶解，
加入蒸馏水定容至40ml，即为银氨液。滴加银氨液处理1-5min(避光)，蒸馏水洗3次。
6、还原染色：切片入10%的中性甲醛液还原1-3min(避光)，蒸馏水洗3次。
7、脱水封片：切片依次入无水乙醇I 5min -无水乙醇II 5min-无水乙醇Ⅲ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min透明，中性树胶封片。
8、显微镜镜检，图像采集分析。
三、结果判读：
网状纤维呈黑色或者黑褐色，背景呈棕黄色。
四、注意事项：
1、银氨液在避光4℃条件下可保存1-2月，使用前复温，可根据配制后存储时间的长短，
在第4、5步适当延长染色时间，促使银离子的结合。
2、NaOH、硫酸和草酸可以不避光常温保存，其余染色全部避光常温保存。
3、染色过程中，需要使用避光的染色盒进行染色。
4、在配制银氨液过程中，沉淀恰好溶解要严格控制。
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文献和实验网状纤维是一种纤细的纤维。它沿着网状细胞和突起分支，并互相交织成网，因而被称为网状纤维，又因这种纤维对银的浸染着色特别显著。故又称为嗜银纤维。它主要由III型 胶原蛋白 构成，也具有642nm周期性横纹.它主要分布于骨髓、脾、淋巴结、肝和肺等脏器。癌组织中间未见有网状纤维，但在其边缘可见有大量的网状纤维，但在其边缘可见有大量的网状纤维围绕，俗称癌巢。 ⑴网状纤维的形成 它的形成主要是在纤维母细胞的粗面内浆网
为白纤维。在HE染色中呈均一的粉红色，与周围间质区分不是很清楚。染色后，便可明显区别开来，易于观察病变时胶原纤维的变化。应用：(1)器官硬化性疾病的观察：如肝硬变、心肌瘢痕的观察，胶原染色更易于观察诊断。 (2)瘢痕与淀粉样物质鉴别：前者胶原纤维染色为阳性，后者为阴性。 (3)骨纤维异常增殖病与骨纤维化的鉴别：利用胶原纤维染色可较易观察前者胶原纤维紊乱，纵横交错，后者较规则。 二、网状纤维染色 网状纤维是非常细而短的纤维，大量堆积时则形成致密的网状，故有网状纤维之称。疏松组织中网状纤维比较
结缔组织由细胞和大量的细胞间质构成。间质包括基质和纤维两种成分。疏松结缔组织和致密结缔组织的纤维有胶原纤维，弹力纤维和网状纤维。 光学技术切片的结缔组织染色是指胶原纤维，弹力纤维和网状纤维染色，而通常所说的结缔组织染色多指胶原纤维染色。 一、胶原纤维染色法： 胶原纤维由纤维母细胞分泌产生。纤维母细胞，纤维粗细不等直径在1－2微米之间，呈分枝状，相互交织，少量常呈明显的纤维状；成熟的和大量存在于组织时
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