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- 文献和实验
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3611
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连桥生物
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现货
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见说明
- 规格：
见说明
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文献和实验等。IL-1反应细胞增殖可以通过活性染料染色,显微镜直接计数,3H-TdR或125I-UdR的DNA掺入量或以活性细胞代谢率为指标来表示。本试验介绍L929细胞增殖MTT比色法。（一）IL-1的诱生体外试验可用LPS等有丝分裂原诱导单核-巨噬细胞产生IL-1,或用P388D1(鼠),THP-1(人)细胞株制备IL-1。本试验以小鼠巨噬细胞制备IL-1。1、取6～10周龄BALB/c或C57BL/6小鼠,雌雄均可,拉颈处死后用酒精消毒。2、用带9号针头的5ml注射器腹腔注入5ml冷的含5％小牛
ml 新配制的溶液II, 盖紧瓶盖,缓缓地颠倒离心管数次,以充分混匀内容物,冰浴10 分钟。 6、加9ml 用冰预冷的溶液III, 摇动离心管数次以混匀内容物,冰上放置15 分钟,此时应形成白色絮状沉淀。 7、4℃下5000g 离心15 分钟。 8、取上清液,加入50ml RNA 酶A(10mg/ml), 37℃水浴20 分钟。 9、加入等体积的饱和酚/氯仿,振荡混匀,4℃下12000g 离心10 分钟。 10、取上层水相, 加入等体积氯仿,振荡混匀,4℃下12000g 离心
悬浮于50ml用冰预冷的STE中（此步可省略）。 3、同步骤1方法离心以收集细菌细胞。 4、将细菌沉淀物重新悬浮于5ml溶液I中,充分悬浮菌体细胞。 5、加入12ml新配制的溶液II, 盖紧瓶盖,缓缓地颠倒离心管数次,以充分混匀内容物,冰浴10分钟。 6、加9ml用冰预冷的溶液III, 摇动离心管数次以混匀内容物,冰上放置15分钟,此时应形成白色絮状沉淀。 7、4℃下5000g离心15分钟。 8、取上清液,加入50ml RNA酶A(10mg/ml), 37℃水浴
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