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连桥生物
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文献和实验简介 实体瘤以三维(3D)空间构象生长,导致氧和营养物质以及其他物理和化学应力的异质性暴露。为了模拟三维空间构象,在肿瘤研究中普遍使用三 维体外培养模型。肿瘤干细胞 (CSC) 是指肿瘤内具有自我更新能力的那一小部分细胞,常常在化疗治疗后驱动肿瘤恶变和复发。传统上,肿瘤干细胞会从癌细胞系和肿瘤活检组织中分离出来,并在三维肿瘤球状体悬浮培养物中生长。 本实验方案描述了一种以 96 孔球形微孔板制备和培养肿瘤球状体的基本方法。这种基础培养和测定实验方案适用于所有球形微孔板。表 2 提供了将 96
简述:传统标准的BCA蛋白定量分析方法常规均使用试管或者微孔板进行检测,通过对传统方法进行改进,可使用BioTek公司的Take3TM 超微量多体积检测板进行原位微量BCA法蛋白定量分析。待测蛋白样品和BCA工作缓冲液按照顺序直接加在Take3TM板的微量定量孔处、温浴,使用EpochTM 微孔板分光光度计进行检测。和传统标准BCA方法(BCA工作缓冲液和蛋白质样品体积比为20:1)相比,该方法的蛋白检测灵敏度有明显的提高。相比与Mini-BCA分析方法,原位分析方法更加精确。介绍BCA
个),10%的多细胞孔(10个)和60%的空孔(58个)(图3B)。图3c显示了单细胞打印和有限稀释的空孔、单细胞孔和多细胞孔效率的直接比较。与有限稀释相比,x.sight的单细胞沉积效率提高了约3倍,从而增加了用于下游分析的潜在克隆数。 图3. x.sight与有限稀释的单细胞沉积效率对比克隆恢复率 随后测试了单细胞打印产生的克隆的生存能力,并将它们与有限稀释产生的克隆进行了比较。为了量化生存力,将来自有限稀释或单细胞打印的微孔板定期
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