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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
鸡卵泡基膜细胞
- 库存:
100
- 供应商:
上海淳麦生物
- 细胞类型:
鸡卵泡基膜细胞
- 物种来源:
详细请联系咨询
- 运输方式:
常温/干冰
- 年限:
10
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
T25/冷冻管
鸡卵泡基膜细胞
Cat NO.: CP-C002
1.产品名称:鸡卵泡基膜细胞
2.组织来源:鸡卵泡组织
3.产品规格:5×10^5cells/T25细胞培养瓶
4.细胞简介:
鸡卵泡基膜细胞分离自鸡卵泡组织;成熟卵泡是卵巢的组织结构成分之一,卵泡腔很大,卵丘很明显。卵泡内膜细胞紧靠卵泡颗粒层,与颗粒层细胞之间有一层基膜相隔,内膜细胞呈多边形,胞质清亮,胞核圆形,细胞间可见许多毛细血管,外膜细胞位于最外层,多呈梭形,与周围结缔组织分界不明显。卵泡(follicle)中卵母细胞四周有一层菱形或扁平细胞围绕,在卵泡开始发育、卵细胞成长的同时,周围的菱形细胞变为立方形,并由单层增生成复层,因其细胞浆内含有颗粒,故称为颗粒细胞。初级卵泡的颗粒细胞为单层;次级卵泡的颗粒细胞增至复层;成熟卵泡的颗粒细胞展开又变为单层。颗粒细胞的胞核大而圆,着色深,细胞的游离面有许多细长突起伸入放射带的凹陷部。
本公司生产的鸡卵泡基膜细胞采用先机械分离后胶原酶反复消化法、并通过专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10^5cells/瓶;细胞纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
5.培养基信息:
M199、FBS、Penicillin、Streptomycin等
我们推荐使用上海淳麦鸡卵泡基膜细胞专用完全培养基(产品货号:CM-C002)作为体外培养鸡卵泡基膜细胞的培养基。
| 293A 人胚肾细胞 Cat NO.: CL-0003 | |
细胞名称 | 293A (人胚肾细胞) |
种属 | 人 |
年龄(性别) | 胎儿 |
组织来源 | 肾 |
生长特性 | 贴壁 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
背景描述 | |
生长培养基 | DMEM高糖(货号:PM150210)+10% FBS(货号:164210-500)+1% P/S(货号:PB180120) |
培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃ |
鸡卵泡基膜细胞培养方法:
1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出25cm2培养瓶,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态,然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀细胞用12ml完全培养基重悬,然后按1:2比例进行分瓶传代,最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)待细胞完全贴壁后,观察培养结果,之后进行换液培养或传代。
3、细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中, 1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
原代细胞与细胞系有什么区别?
细胞培养物来源于原代外植体或分散的细胞悬液。通常在这样的培养物中细胞增殖形成汇合地单层细胞或密集地细胞悬液。根据传统定义,第一次收获和接种的细胞被称为原代细胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 这类细胞生命周期有限,在有限的生命周期内需掌握好细胞最大的生长空间,以保持细胞群中基因型和表型的一致性。细胞系是不断生长,分化的细胞群,因其经过遗传改造,致使其具有无限增长的潜能。体外生长的细胞系用于医疗或科研。实际上,连续细胞系可以用大量次培养基培养,随着代数的增加细胞的基因型和表型都有可能发生改变。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
1、倍增和代数有什么区别?倍增是培养物中细胞总数加倍,通常是指细胞指数或对数生长期。代数是指细胞群从培养瓶中移出,传代培养过程的次数,传代培养的目的是使细胞处于低密度以刺激其进一步生长。
2、接收到的冻存细胞该如何处理?收到包装箱后,立即将冻存细胞从干冰移入液氮中冻存。此过程尽量快以避免升温。不要将细胞储存在-80℃,这样会对细胞造成不可挽回的伤害。
3、有多少经验才能开始正常人类细胞培养?推荐有经验者在无菌环境下用层流净化罩工作,如果有经验的话对其它细胞类型也是很有利的。如果你是细胞培养的初学者或打算建立细胞培养实验室,我们会为你提供帮助。请联系我们的细胞培养专家。
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文献和实验1.实验动物 产蛋期母鸡(动物实验中心购买),普通饲料喂养,自由进食进饮;实验前禁食12h 2.主要试剂及仪器 EDTA-2Na购自国药集团化学试剂有限公司;双抗购自Hyclone公司;M199培养基、胎牛血清及Ⅱ型胶原酶均购自美国Gibico 公司;CO2恒温培养箱购自美国Thermo公司 3.实验步骤 A. 翅下静脉注射2mL EDTA-2Na(W/V,2%)溶液处死母鸡,新洁尔灭消毒液浸泡消毒5min,打开腹腔,剪取整个卵巢,小心剥离卵泡(以8-15g为最佳),置于装有PBS
卵巢合成的固醇激素。在卵巢组织中提纯的主要为雌二醇,其分子式中含两个OH基团,生理功效最强,其次为雌酮和雌三醇。 人的雌激素在排卵前是由卵泡,特别是卵泡膜的内层膜细胞所产生,其次是来自卵泡颗粒层;排卵后,黄体也产生雌激素。正常妇女雌激素分泌量每昼夜变动于100~500微克(μg),随生殖周期而不同。在循环血中,雌激素处于蛋白的结合体中。肝脏为其主要代谢场所,其代谢产物多,随尿排出。雌激素的生理作用是促进女性各种附属生殖器的生长发育,其中以子宫的生长发育最具代表性。如子宫
腔,从阴道排出,即为经血。退变及坏死的内膜呈小块状剥脱,直至功能层深部。月经期的持续时间一般为3~5天,因个体而差异并受环境变化的影响。在月经终止前,内膜基底层子宫腺残端的细胞迅速分裂增生,并铺展在脱落的内膜表面,内膜修复而进入增生期。 2.增生期 增生期(proliferation phase)又称卵泡期(follicular phase),为周期的第5~14天。此时期的卵巢内有若干卵泡生长,在卵泡分泌的雌激素作用下,子宫内膜发生增生性变化。在月经终止前,子宫内膜已修复,增生早期的子宫腺短直
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