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一年
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北京百奥莱博科技有限公司
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室温
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")硝酸纤维素薄膜(NC膜)0.22μm 9cm×10cm怎么卖,我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:硝酸纤维素薄膜(NC膜)0.22μm 9cm×10cm怎么卖
规格:20片
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:ZN1902
产品规格:0.22μm 9cm×10cm/张 20 张/包
产品保存:室温保存,一年有效。
产品简介:
硝酸纤维膜能产生极好的结果,处理和保存更为简单。它不含纤维和树脂载体,是纯净的致密硝酸纤维,是一种已经验证的可应用于 Western、Northern和Southern 印迹杂交的介质。孔径为0.45µm的硝酸纤维膜推荐用于大多数分析型转印,孔径为0.22µm的硝酸纤维膜可用于转移小分子量蛋白(<20 kD)或核酸,能避免由于膜转移而导致的样品损失。
使用说明:
1.使用前需用转印液完全浸润 5-10 秒。
2.实验的任何步骤务必保持膜湿润。
3.本硝酸纤维素膜适用于化学发光(如 BeyoECL Star、BeyoECL Plus、ECL 等)、常规显色(如 DAB、TMB)、染色、同位素和荧光等方法进行检测。
注意事项:
1.膜两面都可与蛋白结合。
2.使用时请带上手套,以免手上油污沾染到膜上面。
3.可与丽春红,*基黑,印度墨水,胶体金,CPTS 等多种染料兼容。(其中丽春红、CPTS 等染料染色后,染料可以被洗掉,膜可以用做进一步的分析用;而酰胺黑、印度墨水等染料是不可逆的,染色后膜就不能用于进一步的分析)。
4.硝酸纤维素膜比较脆,容易破碎,操作要小心。
我公司的硝酸纤维素薄膜(NC膜)0.22μm 9cm×10cm怎么卖,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
双甘*肽 HSTU 556-50-3
F040321 猫IgG抗原 The cat IgG
DL-2-*基丁酸 D-Gluconic acid solution 2835-81-6
50-89-5 Thymidine 胸腺嘧啶核苷
BL0839 羊抗人IgM纯化抗体
BFD038 喹乙醇检测试剂盒
ARB11867 人糖缺失性转铁蛋白(CDT)酶联免疫定量检测 Human carbohydRate-deficient transferrin,cdt ELISA KIT
DNaseⅠ(RNase free) 2000U
ARB11684 人葡萄糖6磷酸异构酶(GPI)elisa检测说明书 Human glucose-6-phosphate isomerase,gpi ELISA KIT
丙*酸*基转移酶(ALT)检测试剂盒(赖氏微板法) 100T
5(6)-羧基荧光素二乙酸酯 ADA-2Na 124387-19-5
ARB10646 人血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)含量测试 Human vascuolar cell adhesion molecule 1,vcam-1 ELISA KIT
蔗糖-PBS溶液 5%|10%|20%|30% 500ml
矿物油 Potassium citrate monohydrate 8042-47-5
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3810-74-0 Streptomycin 硫*(代"酸")链霉素
顺-15-二十四碳单烯酸 Fructo-oligosaccharide 506-37-6
PY02-272 5%乳糖发酵培养基 250克
HC0281 八道整支灭菌移液器
ARB12475 大鼠前列腺素E1(PGE1)尿液中含量检测 Rat prostaglandin e1,pg-e1 ELISA KIT
MES buffer(0.1mol/L,pH8.0) 100ml
吡*(代"啶")乙酸盐*(代"酸")盐 Molecular sieves type 5A 6419-36-9
ARB14070 甘薯羽状斑驳病毒(SPFMV)Elisa分析
Annexin V-EGFP/PI 双染细胞凋亡检测试剂盒 20T|50T|100T
BTN120507 Xa因子蛋白酶 Factor Xa Protease Xa
尿素 Inositol 57-13-6
ARB10167 人TU3A蛋白(TU3A)免费代测 Human tu3a protein ELISA KIT
ARB12022 大鼠β2-微球蛋白(β2-MG)Elisa定量检测 Rat β2-microglobulin,bmg/β2-mg ELISA KIT
核糖核酸酶抑制剂 Tropaeolin O sodiu*(代"m") salt
ARB10871 人抗核糖核蛋白抗体(RNP-Ab)尿液中含量检测 Human anti-ribonucleo protein antibody,rnp-ab ELISA KIT
甲醛凝胶加样缓冲液(10×,RNase free) 5ml
BTN60206 Ampicillin Solution
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·CORIN mRNA原位杂交试剂盒
编号:ZN0319
规格:100T
基本信息:
保存条件:4℃保存一年
工作量:100张切片。
有效期:一年。
适用种属:hμman
标记方式:3’—尾段标记
试剂盒中内容:
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml;
2.预杂交液 2ml;
3.CORIN mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml;
4.封闭液 5ml;
5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml;
6.SABC-POD 5ml;
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
用户自备试剂:
原位杂交专用盖玻片;POLY-L-LYSINE;DEPC;20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC,0.5×SSC,0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
一.培养细胞和冰冻切片
准备工作:
固定液:4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6);1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g,柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O,分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序:
注意:最重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛"):37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲*透明,封片。
二.石蜡切片
如果有条件的话,应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后,及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6),含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块,固定1小时即可,较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感,如动物大脑,固定时间30-40分钟,一般不要超过1小时。
1.常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。
3.石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间,例如5分钟,10分钟,20分钟,30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察:
CORIN的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项:
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数,加上基因仅由四个碱基排列组合而成,因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照,基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时,用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释,一般稀释2—10倍;并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况;如果出现大量的细胞核着色,往往和标本固定时间过长有关,应重新处理标本。
北京百莱博科技有限公司专业生产免疫检测产品,欢迎来电咨询选购硝酸纤维素薄膜(NC膜)0.22μm 9cm×10cm怎么卖。
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文献和实验工艺的问题,使用后灵敏度会在一段时间内发生变化,遇到这种问题,就需要在点膜后放置一段时间,待稳定后方可进入调试生产。 硝酸纤维素膜NC膜 规格: 15X20cm 孔径: 0.45μm 保存: 5-15℃密封保存,保质期一年 产品简介: 本品外观洁白,膜正面呈光泽,与水接触应立即浸润,不能立即浸润老者视为失活,不能点样,膜面有花斑或有粉性结构皆视为次品。用于转移电泳,宜选孔经0.22或0.45,以保证膜的强度,并减少穿透损失,硝纤膜过份干燥时脆,湿时有弹性,操作时室内应保持
形式,灵敏、可重复的检测试剂的生产需要试剂生产商采用有效的途径制备检测线工作液。快速诊断试剂生产商经常对如何优化检测线相关的文章非常感兴趣。这些文章可以有助于研发人员涉及关于蛋白质固着于硝酸纤维素膜基本原理的讨论,并对研发人员在开发免疫层析试剂中面临的常见问题给予强调。由于关于蛋白质吸附于NC膜的问题普遍存在于侧向层析,因此这篇文章重点讨论这方面的问题。蛋白质吸附的重要性在免疫层析检测中,蛋白质固着于NC膜作为待测样本的捕获试剂。由于检测结果完全取决于捕获试剂在膜上达到良好的吸附效果,因此蛋白
液后自然下沉,这样可将膜片上聚集的小气泡赶着走。点样时,应将膜片表面多余的缓冲液用滤纸吸去,以免缓冲液太多引起样品扩散。但也不能吸得太干,太干则样品不易进入薄膜的网孔内,而造成电泳起始点参差不齐,影响分离效果。吸水量以不干不湿为宜。为防止指纹感染,取膜时,应戴指套或用镊子。 2、缓冲液的选择 醋酸纤维素薄膜电泳常选用pH8.6巴比妥溶液,其浓度为0.05mol/L—0.09mol/L。选择何种浓度与样品及薄膜的薄厚有关。选择时,先初步定下某一浓度,如电泳槽两极之间的膜长度为8 cm—10cm,则需
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