Western半干法转膜液(固体)(1×干粉)优惠

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Western半干法转膜液(固体)(1×干粉)优惠的品牌：百奥莱博，是优质的免疫检测产品，用于生化研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多Western半干法转膜液(固体)(1×干粉)等免疫检测产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：Western半干法转膜液(固体)(1×干粉)优惠
规格：1包
编号：ZN1899
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
产品保存：室温保存，一年有效。
产品简介：
Western 半干法转膜液是一种安全无毒的转膜液，没有使用剧毒的甲醇。配制 Western 半干法转膜液的方法非常便捷，不需要调节 pH值。本 Western 转膜液共 1 瓶，可以配制 1 升 Western 半干转膜液。
使用说明：
1．将 Western 转膜液的粉剂，倒入到一洁净的烧杯中，加入蒸馏水到约700 毫升，溶解。
2．加入 200 毫升无水乙醇，混匀。
3．定容到 1 升。混匀后即可使用，无需调节 pH 值。
注意事项：
1．配制好的半干法转膜液可室温或 4℃保存。如果颜色变成浅棕色或黄褐色，应丢弃。
2．需使用分析纯级别及以上级别的乙醇。

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KP201 Pfu PCR MasterMix
酸性磷酸酶封闭液(100×)   50ml
BL1416 "Western blotting(山羊IgG)
8002-43-5 L-α-Phosphatidylcholine 卵磷脂
ARB12310 大鼠抗髓鞘相关糖蛋白抗体(MAG Ab)酶免分析 Rat anti-myelin associated glycoprotein antibody,mag ab ELISA KIT
SJ0709 RNaseA 10mg/ml
PY08-074  0.85%生理盐水 9ml  20支/盒  用作稀释液或菌悬液的制备
2,2’-联喹*(代"啉")-4,4’-二羧酸* Trans-zeatin Riboside 979-88-4
BTN130840 硫*(代"酸")*溶液,10mM,PCR级 MgSO4 ,PCR Grade
肌红蛋白 2,6-Dichloroindophenol 100684-32-0
腺苷脱*酶(ADA)检测试剂盒(波氏微板法)   100T
9041-35-4 葡聚糖凝胶G-25 Sephadex G-25 medium
ARB10656 人血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)含量测试 Human von willebrand factor,vwf ELISA KIT
过氧化物酶染色液(氧化WG-KI法)   2×10ml|2×20ml
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ARB11266 人骨形成蛋白(BMPs)代做ELISA实验 Human bone morphogenetic proteins,bmps ELISA KIT
BTN130698 3′-O-Me-m7G(5′)ppp(5′)G帽结构类似物 RNA Cap Structure Analogs
PY02-300  TPY琼脂培养基  250克  
ARB12765 小鼠L选择素(L-SelectIn/CD62L)elisa检测操作说明书 Mouse l-selectin ELISA KIT
ARB12776 小鼠Toll样受体9(TLR-9/CD289)ELISA代测服务 Mouse toll-like receptor 9,tlr-9 ELISA KIT
ARB10964 人免疫球蛋白A Fc段受体I(FcαRI/CD89)定量分析 Human receptor i for the fc region of immunoglobulin a,fcαri ELISA KIT
N-乙酰-L-色*酸 Acetoin 1218-34-4
硫*(代"酸")卡那霉素溶液(10mg/ml) Kanamycin 10mg/ml 10ml
BL0978 豚鼠外周血淋巴细胞分离液
F030607 FITC标记山羊抗小鼠IgG2b抗体 Goat Anti-Mouse IgG2b*FITC
ARB11456 人特异性免疫球蛋白E(sIgE)免费代测 Human specific immunoglobulin e,sige ELISA KIT
SJ0587 Trizol
PY01-138  血粉蛋白胨  250克  
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·Rb P103 mRNA原位杂交试剂盒
编号：ZN1216
规格：100T
基本信息：
保存条件：4℃保存一年
工作量：100张切片。
有效期：一年。
适用种属：hμman,rat,mouse
标记方式：3’—尾段标记
试剂盒中内容：
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml；
2.预杂交液 2ml；
3.Rb P103 mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml；
4.封闭液 5ml；
5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml；
6.SABC-POD 5ml；
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
用户自备试剂：
原位杂交专用盖玻片；POLY-L-LYSINE；DEPC；20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC，0.5×SSC，0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
一．培养细胞和冰冻切片
准备工作：
固定液：4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)；1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g，柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O，分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序：
注意：最重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛")：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲*透明，封片。
二．石蜡切片
如果有条件的话，应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后，及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6)，含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。
1．常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。
3．石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间，例如5分钟,10分钟，20分钟，30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察：
Rb的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项：
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数，加上基因仅由四个碱基排列组合而成，因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照，基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时，用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释，一般稀释2—10倍；并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况；如果出现大量的细胞核着色，往往和标本固定时间过长有关，应重新处理标本。

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