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256
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一年
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北京百奥莱博科技有限公司
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4℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京浓缩型免疫组化试剂盒(SABC-Cy3)(人IgG)现货,我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京浓缩型免疫组化试剂盒(SABC-Cy3)(人IgG)现货
编号:ZN1856
产地:国产|进口
规格:1盒
产品规格:1KIT
保存条件:4℃可保存一年,应避免冷冻
工作原理:
SABC 是专为免疫化学而设计的,用以显示组织或细胞中的抗原分布。SABC-Cy3 代表了新一代的免疫荧光方法。Cy3 比传统上的荧光更具有亲水性,因而不会因疏水性而引起非特异性吸附或聚合,从而背景更低。而且其敏感性和稳定性都更好。Cy3 在 554nm 激化,在568-574nm 发射荧光,呈鲜红色。
试剂盒内容:
1.正常浓缩兔血清(稀释比 1:10)1ml/2ml/5ml
2.生物素标记兔抗人 IgG(参考效价 1:100)0.1ml/0.2ml/0.5ml
3.SABC- Cy3(参考效价 1:100)0.1ml/0.2ml/0.5ml
4.另有三个滴瓶可供稀释试剂用
石蜡片染色步骤:
1.切片脱蜡至水。
2.根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
3.封闭:滴加稀释的正常兔血清封闭液(稀释比 1:10),室温 20分钟。甩干,勿洗。
4.滴加适当稀释的一抗(人 IgG),37℃孵育1~2 小时或 4℃过夜。PBS洗5分钟×3次。
5.滴加稀释的生物素标记兔抗人 IgG(参考效价 1:100),37℃孵育30分钟。PBS洗5分钟×3次。
6.滴加稀释的SABC- Cy3(参考效价1:100-),37℃孵育30分钟。PBS洗5分钟×4次。
7.水溶性封片剂或抗荧光衰减封片剂封片。荧光显微镜观察建议:
1.热修复可选用枸橼酸盐缓冲液、EDTA 抗原修复液、PBS 缓冲液、TBS 缓冲液等作为抗原修复液。
2.酶修复可选用复合修复液、抗原修复液Ⅰ、胰蛋白酶、胃蛋白酶消化组织。
更多有关北京浓缩型免疫组化试剂盒(SABC-Cy3)(人IgG)现货的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·超灵敏免疫组化试剂盒(抗小鼠IgG-HRP)
编号:ZN1866
规格:3ml/6ml/12ml/50ml
适于一抗来源为小鼠的抗体
产品规格:3ml/6ml/12ml
保存条件:4℃可保存一年,应避免冷冻。
工作原理:
用聚合标记方法将过氧化物酶连接到二抗上,形成类似于章鱼的超大分子抗体-酶聚合物,替代传统方法中的二抗和三抗。这种聚合物拥有强大的信号放大能力,同时有很强的组织细胞渗透力,特别适合免疫组化的应用。此系列检测试剂与传统的三步法比较具有简单,快速,高敏感,低背景等特点。
试剂盒内容:
1.5%BSA 封闭液 3ml/6ml/12ml
2.聚合 HRP 标记抗小鼠 IgG 3ml/6ml/12ml
3.3%H2O2 3ml/6ml/12ml
石蜡片染色步骤:
1.石蜡切片,常规脱蜡至水。
2.3%H2O2 去离子水室温孵育5-10分钟,以消除内源性过氧化物酶活性。PBS冲洗,5分钟×3次。
3.根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
4.封闭。滴加 5%BSA 封闭液,37℃孵育30分钟,甩干,勿洗。
5.滴加一抗(小鼠 IgG),37℃孵育1-2 小时或 4℃过夜。PBS 冲洗,5分钟×3次。
6.滴加聚合 HRP 标记抗小鼠 IgG,37℃孵育30分钟,PBS 冲洗,5分钟×3次。
7.显色液显色,镜下控制反应时间。显色剂可选 DAB或 AEC。自来水充分冲洗。
8.根据需要进行苏木素复染,染色时间为0.5-2分钟。脱水,透明。
9.选用中性树胶,水溶性封片剂或其他适当的封片剂封片。
建议:
1.热修复可选用枸橼酸盐缓冲液、EDTA 抗原修复液、PBS 缓冲液、TBS 缓冲液等作为抗原修复液。
2.酶修复可选用复合修复液、抗原修复液Ⅰ、胰蛋白酶、胃蛋白酶消化组织。
北京浓缩型免疫组化试剂盒(SABC-Cy3)(人IgG)现货关键词:百奥莱博,浓缩型免疫组化试剂盒(SABC-Cy3)(人IgG),ZN1856
·ARF1 mRNA原位杂交试剂盒
编号:ZN0088
规格:100T
基本信息:
保存条件:4℃保存一年
工作量:100张切片。
有效期:一年。
适用种属:hμman,rat,mouse
标记方式:3’—尾段标记
试剂盒中内容:
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml;
2.预杂交液 2ml;
3.ARF1 mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml;
4.封闭液 5ml;
5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml;
6.SABC-POD 5ml;
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
用户自备试剂:
原位杂交专用盖玻片;POLY-L-LYSINE;DEPC;20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC,0.5×SSC,0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
一.培养细胞和冰冻切片
准备工作:
固定液:4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6);1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g,柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O,分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序:
注意:最重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛"):37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲*透明,封片。
二.石蜡切片
如果有条件的话,应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后,及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6),含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块,固定1小时即可,较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感,如动物大脑,固定时间30-40分钟,一般不要超过1小时。
1.常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。
3.石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间,例如5分钟,10分钟,20分钟,30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察:
ARF1的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项:
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数,加上基因仅由四个碱基排列组合而成,因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照,基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时,用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释,一般稀释2—10倍;并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况;如果出现大量的细胞核着色,往往和标本固定时间过长有关,应重新处理标本。
北京浓缩型免疫组化试剂盒(SABC-Cy3)(人IgG)现货关键词:百奥莱博,浓缩型免疫组化试剂盒(SABC-Cy3)(人IgG),ZN1856
ARB10095 人D-乳酸脱*酶(D-LDH)elisa测定使用说明书 Human d-lactate dehydrogenase,d-ldh ELISA KIT
6381-92-6 乙二*(代"胺")四乙酸二* EDTA Na2
PY01-062 肌醇 25克
2-甲基吲哚 TMB-PS 95-20-5
F020226 兔抗猫IgG抗体 Rabbit Anti-Cat IgG
ARB11838 人凝血因子Ⅶ(FⅦ)酶联免疫定量检测 Human coagulation factor Ⅶ,fⅦ ELISA KIT
ARB10776 人抗乙型肝炎病毒核心IgM抗体(HBcAb-IgM)检测服务 Human anti-hepatitis b virus core igm,hbc-igM antibody ELISA KIT
ARB12370 大鼠肾上腺素(EPI)定量分析 Rat epinephrine/adrenaline,epi ELISA KIT
曲拉通x-100 Sodium 1-hexanesulfonate 9002-93-1
Western封闭液 100ml
F030704 BIOTIN标记小鼠抗HIS抗体 Monoclonal Mouse Anti-His*BIOTIN
BL1276 4×非变性蛋白上样缓冲液
ARB13354 牛戊型肝炎抗原(HEV)Elisa定量检测
F020218 兔抗人IgG抗体 Rabbit Anti-Human IgG
CYB161008 兔IgG(冻干粉)
CYB164028 羊抗鸡IgG(1:500~1000)-HRP
L-组*酸甲酯2盐*(代"酸")盐 PEG200 7389-87-9
BTN131079 重组蛋白A Recombinant Protein A
酸性固绿染色液 2×50ml
SJ0769 麦芽侵粉
F030107 HRP标记兔抗卵清蛋白抗体 Rabbit Anti-OVA*HRP
十八烷基三甲基*化铵 5-?Acetyl-?2-?bromopyridine 112-03-8
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