北京Tmem240 mRNA原位杂交试剂盒品牌

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京Tmem240 mRNA原位杂交试剂盒品牌，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京Tmem240 mRNA原位杂交试剂盒品牌
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
规格：100T
编号：ZN1411
基本信息：
保存条件：4℃保存一年
工作量：100张切片。
有效期：一年。
适用种属：mouse
标记方式：3’—尾段标记
试剂盒中内容：
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml；
2.预杂交液 2ml；
3.Tmem240 mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml；
4.封闭液 5ml；
5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml；
6.SABC-POD 5ml；
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
用户自备试剂：
原位杂交专用盖玻片；POLY-L-LYSINE；DEPC；20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC，0.5×SSC，0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
一．培养细胞和冰冻切片
准备工作：
固定液：4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)；1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g，柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O，分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序：
注意：最重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛")：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲*透明，封片。
二．石蜡切片
如果有条件的话，应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后，及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6)，含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。
1．常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。
3．石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间，例如5分钟,10分钟，20分钟，30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察：
Tmem240的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项：
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数，加上基因仅由四个碱基排列组合而成，因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照，基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时，用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释，一般稀释2—10倍；并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况；如果出现大量的细胞核着色，往往和标本固定时间过长有关，应重新处理标本。

除北京Tmem240 mRNA原位杂交试剂盒品牌外，我公司正在打折促销以下产品：

·浓缩型免疫组化试剂盒(DyLight 488-SABC)(山羊IgG)
编号：ZN1849
规格：1盒
产品规格：1KIT
保存条件：4℃可保存一年，应避免冷冻。

工作原理：
SABC 是专为免疫化学而设计的，用以显示组织或细胞中的抗原分布。DyLight 是一种近年来
被广泛应用的新型荧光染料，由于具有很好的光谱宽度、更强的荧光强度，更高的光学耐受
性(抗淬灭性)和特异性，对 pH 不敏感、分子较小而渗透性更好的优势，标记的抗体比 Cy2
和 FITC 标记的更亮，但背景更低；DyLight® 488-SABC，将链霉亲和素—生物素引入荧光系
统，能进一步提高敏感性及降低背景。DyLight® 488 最大吸收峰 493nm；最大发射峰 518nm。
呈黄绿色。
试剂盒内容：
1．正常浓缩兔血清(稀释比 1:10)2ml/4ml/10ml
2．生物素标记兔抗山羊IgG(参考效价 1：100)0.2ml/0.4ml/1ml
3．SABC- DyLight 488(参考效价 1：200-800)0.2ml/0.4ml/1ml
4．另有三个滴瓶可供稀释试剂用
石蜡片染色步骤：
1．切片脱蜡至水。
2．根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
3．封闭：滴加稀释的正常兔血清封闭液(稀释比 1:10),室温 20分钟。甩干，勿洗。
4．滴加适当稀释的一抗(山羊IgG)，37℃孵育1~2 小时或 4℃过夜。PBS洗5 分
钟×3次。
5．滴加稀释的生物素标记兔抗山羊IgG(参考效价 1:100),37℃孵育30分钟。PBS洗5 分
钟×3次。
6．滴加稀释的SABC- DyLight 488(参考效价 1:200-800)，37℃孵育30分钟。PBS洗5
分钟×4次。
7．水溶性封片剂或抗荧光衰减封片剂封片。荧光显微镜观察
建议：
1．热修复可选用枸橼酸盐缓冲液、EDTA 抗原修复液、PBS 缓冲液
、TBS 缓冲液等作为抗原修复液。
2．酶修复可选用复合修复液、抗原修复液Ⅰ、胰蛋
白酶、胃蛋白酶消化组织。


北京Tmem240 mRNA原位杂交试剂盒品牌关键词：百奥莱博,Tmem240 mRNA原位杂交试剂盒,ZN1411

ARB10048 人AgoutI相关蛋白(AGRP)elisa测定使用说明书 Human agouti related protein,agrp ELISA KIT
D-葡萄糖醛酸* Choline chloride 207300-70-7
甲酰胺加样缓冲液(10×)   5ml
碘化铋* Ethylparaben 41944-01-8
A0201 特级新生牛血清(无菌采制)
羧甲基壳聚糖 Protein protectant HPD 83512-85-0
末端转移酶 Spermidine trihydrochloride 9027-67-2
ARB10639 人血管内皮细胞生长因子(VEGF)酶联免疫定量检测 Human vascular endothelial cell growth factor,vegf ELISA KIT
BTN60210 硫*(代"酸")链霉素溶液 Streptomycin Sulfate Solution
69-78-3 DTNB 5,5二巯基-2,2-二硝基*(代"*")甲醛
ARB11223 人细胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)ELISA代测服务 Human cytokeRatin fragment antigen 21-1,cyfra21-1 ELISA KIT
ARB10521 人白细胞共同抗原(LCA/CD45)elisa测定使用说明书 Human leukocyte common antigen,lca/cd45 ELISA KIT
北京Tmem240 mRNA原位杂交试剂盒品牌关键词：百奥莱博,Tmem240 mRNA原位杂交试剂盒,ZN1411

DN2101 M13噬菌体单链基因组DNA快速提取试剂盒
D0301 脱纤维绵羊血(无菌 pet瓶装) 100ml/200ml/500ml
D0201 脱纤维山羊血(无菌 pet瓶装) 100ml/200ml/500ml
ARB12777 小鼠T细胞活化连接蛋白(LAT)定量分析 Mouse linker for activation of t cell,lat ELISA KIT
F020209 兔抗小鼠IgG抗体 Rabbit Anti-Mouse IgG
ARB13756 骆驼转化生长因子β2(TGFβ2)elisa检测操作说明书 Camel transforming growth factors β2,tgfβ2 ELISA KIT
ARB13224 小鼠脱*表雄酮(DHEA)ELISA代测服务 Mouse dehydroepiandrosterone,dhea ELISA KIT
ARB10340 人水蛭素(HRD)elisa检测说明书 Human hirudin,hrd ELISA KIT
PY01-100  海藻酸*  500克  
L-谷*酰胺溶液  0.2mol/L 100ml
ARB10864 人抗核小体抗体IgG(AnuA-IgG)尿液中含量检测 Human anti-nucleosome antibody igg,anua-igG ELISA KIT
二*并-18-冠醚-6 Basic Red 1:1 14187-32-7
BL0864 羊抗人C3免疫血清 0.5ml
磺胺甲氧哒嗪 Potassium carbonate 80-35-3
ARB11546 人凋亡相关半胱*酸肽酶4(CAsp4)酶免分析 Human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase,casp4 ELISA KIT
氧化型辅酶Ⅱ单*盐 5"-GTP,2Na 1184-16-3
ARB10292 人广谱细胞角蛋白(P-CK)Elisa方法检测 Human pan-cytokeRatin,p-ck ELISA KIT
草酸* HOTT 553-91-3
美满霉素 Anion exchang resin 13614-98-7
Quant one step qRT-PCR 
BL1295 青链霉素混合液(100×)

北京百莱博科技有限公司专业生产基因结构和功能产品，欢迎来电咨询选购北京Tmem240 mRNA原位杂交试剂盒品牌。