FIH mRNA原位杂交试剂盒多少钱

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括FIH mRNA原位杂交试剂盒多少钱在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：FIH mRNA原位杂交试剂盒多少钱
产地：国产|进口
规格：100T
基本信息：
保存条件：4℃保存一年
工作量：100张切片。
有效期：一年。
适用种属：rat
标记方式：3’—尾段标记
试剂盒中内容：
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml；
2.预杂交液 2ml；
3.FIH mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml；
4.封闭液 5ml；
5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml；
6.SABC-POD 5ml；
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
用户自备试剂：
原位杂交专用盖玻片；POLY-L-LYSINE；DEPC；20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC，0.5×SSC，0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
一．培养细胞和冰冻切片
准备工作：
固定液：4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)；1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g，柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O，分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序：
注意：最重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛")：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲*透明，封片。
二．石蜡切片
如果有条件的话，应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后，及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6)，含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。
1．常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。
3．石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间，例如5分钟,10分钟，20分钟，30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察：
FIH的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项：
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数，加上基因仅由四个碱基排列组合而成，因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照，基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时，用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释，一般稀释2—10倍；并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况；如果出现大量的细胞核着色，往往和标本固定时间过长有关，应重新处理标本。

欲咨询购买FIH mRNA原位杂交试剂盒多少钱，请致电北京百奥莱博科技有限公司，为您提供最全面周到的产品服务，除此之外，我公司正在促销以下产品：
γ-L-谷*酰对硝基*(代"*")胺一水合物 Cresyl Violet acetate 24032-35-7
BOC-L-谷*酸 CTAC 2419-94-5
BTN130570 植物Actin小鼠单抗 Plant Actin Mouse Mab
即用型细菌冻存液   50ml
T4 RNA连接酶 TTAC
ARB10217 人β连环蛋白/联蛋白(β-CAt)酶免分析 Human β catenin,β-cat ELISA KIT
PY02-063  抗生素检定培养基Ⅱ号(PH7.8-8.0)  250克  
BL1415 "Western blotting(兔IgG)
1806-34-4 POPOP 1,4-双(5-*基恶唑)*(液闪增剂)
5-*尿嘧啶 Gallic acid 51-21-8
SJ0858 胎牛血清(低内毒素无支原体)
F020104 兔抗酪蛋白抗体 Rabbit Anti-casein
SJ0758 1-*胺
碱蓝6B Aminophylline hydrate 1324-80-7
ARB13213 小鼠凋亡诱导因子(AIF)代做ELISA实验 Mouse apoptosis inducing factor,aif ELISA KIT
肝素*溶液(0.5%,62.5KU)   100ml
BTN81105 琼脂糖 Agarose
ARB13424 鸡一氧化*(代"氮")(NO)ELISA检测服务 Chicken nitric oxide,no ELISA KIT
PY02-428  假单胞P琼脂  250克  
胸腺嘧啶 Myokinase 65-71-4
ARB10225 人β羟丁酸(β-OHB)ELISA代测服务 Human beta-hydroxybutyric acid,β-ohb ELISA KIT
FIH mRNA原位杂交试剂盒多少钱关键词：ZN0520,百奥莱博,FIH mRNA原位杂交试剂盒

KG204 血液直接PCR试剂盒
BL1123 柠檬酸*抗原修复液(50×)
BL0875 羊抗BSA免疫血清
组蛋白提取试剂盒 histone extraction kit  50T|100T
BTN100409 6 nt随机引物 Hexamer
L-精*酸 Pepsin(porcine stomach mucose) 74-79-3
花宝3号 α-Bromoisobutyric acid
标准蛋白质溶液(BSA,100mg/ml)   1ml
BTN90402 蛋白胶微量回收试剂盒 Protein Gel Mini-Extraction Kit
9041-35-4 Sephadex G-25 medium(葡聚糖凝胶G-25)
ARB11921 人髓鞘碱性蛋白抗体(MBP)Elisa定量检测 Human myelin basic protein autoantibody,mbp ELISA KIT
121714-22-5 Fluo-3,AM(*离子探针)
D-木糖 L-allo-Threonine 58-86-6
CYB164005 羊抗人白蛋白-HRP
琼脂糖凝胶6FF X-GalNAc
ARB12692 大鼠凝血因子Ⅻ(FⅫ)检测服务 Rat coagulation factor Ⅻ,fⅫ ELISA KIT
4-*基马尿酸* Thymoquinone 94-16-6
ARB12725 小鼠25羟基维生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)elisa检测 Mouse 25-dihydroxy vitamin d3,hvd3 ELISA KIT
血红蛋白检测试剂盒(微板法)   100T
ARB11824 人褪黑素(MT)elisa检测操作说明书 Human melatonin,mt ELISA KIT
FIH mRNA原位杂交试剂盒多少钱关键词：ZN0520,百奥莱博,FIH mRNA原位杂交试剂盒

D-天冬酰胺一水物 Chlorosulphonphenol S 2058-58-4或5794-24-1
7725-54-0 过硫*(代"酸")胺 Ammonium Persulfate
BTN130660 ATP硫*(代"酸")化酶 ATP Sulfurylase
ARB11144 人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3(TRAIL-R3)血清中含量检测 Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 3,traIL-r3 ELISA KIT
邻*酚红指示剂   100ml
肌醇 Rose Bengal 87-89-8
BL0883 兔抗狗IgG免疫血清
85-86-9 Sundan  苏丹Ⅲ
Taq Platinum DNA Polymerase 
ARB10107 人His-tag elisa检测 
HC0198 移液器架(通用茶色)
ARB13440 鸡白介素1(IL-1)elisa检测操作说明书 Chicken interleukin 1,IL-1 ELISA KIT

我公司生产供应销*(代"售")的基因结构和功能正全品类优惠促销，十分期待您的咨询选购FIH mRNA原位杂交试剂盒多少钱。