人IL8重组蛋白 分子生物学试剂

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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")人IL8重组蛋白 分子生物学试剂，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：人IL8重组蛋白 分子生物学试剂
编号：ZN1662
产地：国产|进口
规格：100ng
来源：大肠杆菌
特异性：人
应用：WB 阳性对照
形态：冻干粉
纯度：>98%，RP-HPLC&SDS-PAGE
保存条件：-20℃保存 1 年以上，避免反复冻融。

人IL8重组蛋白 分子生物学试剂极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：
9037-22-3 Amylopectin 支链淀粉
ARB12384 大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)Elisa分析 Rat tumor necrosis factor α,tnf-α ELISA KIT
ARB12139 大鼠生长激素(GH)ELISA检测服务 Rat growth hormone,gh ELISA KIT
J0101 抗猪瘟病毒(CSFV)血清 10000ml/25000ml
ARB10003 人1,3-二磷酸甘油酸(1,3-DPG)Elisa分析 Human 1,3-disphosphoglyceRate,1,3-dpg ELISA KIT
ARB11569 人基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/GelAtInAse A)酶标法分析 Human matrix metalloproteinase 2/gelatinase a,mmp-2 ELISA KIT
NF-256 冻干抗人CP血清
通用细胞冻存液   50ml
BL0230 Dextran T-70  葡聚糖 T-70
十七酸 Fmoc-Trp-OH 506-12-7
BTN100812 BLOTTO溶液 BLOTTO Solution
PY02-045  胆硫乳琼脂(DHL)  250克  
ARB13365 牛乳糖酶(LActAse)ELISA检测服务 
ARB13742 兔超敏C反应蛋白(hs-CRP)代做ELISA实验 Rabbit high sensitivity c-reactive protein,hs-crp ELISA KIT
100684-32-0 肌球蛋白(肌红蛋白) Myoglobin
ARB11377 人前降*素(PCT)酶标法分析 Human procalcitonin,pct ELISA KIT
CYB162014 兔抗猪IgG(抗血清) 0.5ml
SJ0324 G-1-P    D-葡萄糖-1-磷酸二*
BL1059 大豆蛋白胨
四甲基*化铵(四水) EDTA tetrasodiu*(代"m") salt 373-68-2
盐*(代"酸")四环素 MSG 64-75-5
人IL8重组蛋白 分子生物学试剂关键词：ZN1662,人IL8重组蛋白,百奥莱博

BL0643 *基-琼脂糖凝胶CL-4B Phenyl -Sepharose CL-4B
E0619 抗凝裂解马血 100ml/500ml
BTN90608 中提柱式BAC DNAOUT Midi Column BAC DNAOUT
对**甘*酸 LVFX 6212-33-5
DP338 N96 植物基因组DNA提取试剂盒
ARB13496 鸡病毒性肠炎病毒(DEV)Elisa方法检测 Chicken virus enteritis,dev ELISA KIT
PY08-075  磷酸盐缓冲液 225ml  20瓶/箱  用作稀释液
BL0850 兔抗山羊IgG纯化抗体
SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒   50T|100T
ZCQX02 兔全血 500ml
HC0141 螺旋口不锈钢酒精灯(防泄漏防爆)
青霉素链霉素溶液 Zinc gluconate
PY01-127  明胶蛋白胨  250克  
5141-20-8 亮绿 Light Green
BTN131152 兔抗鸡IgY,辣根过氧化物酶标记 Rabbit Anti-Chicken IgY,HRP Conjugate
SJ0643 T4 ligase T4连接酶
F010104 小鼠抗人血清白蛋白抗体 Monoclonal Mouse Anti-HAS
ET105 Taq Plus DNA Polymerase
碳酸*洗液(10%)   500ml
人IL8重组蛋白 分子生物学试剂关键词：ZN1662,人IL8重组蛋白,百奥莱博


·E-Cadherin mRNA原位杂交试剂盒
编号：ZN0424
规格：100T
基本信息：
保存条件：4℃保存一年
工作量：100张切片。
有效期：一年。
适用种属：hμman
标记方式：3’—尾段标记
试剂盒中内容：
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml；
2.预杂交液 2ml；
3.E-Cadherin mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml；
4.封闭液 5ml；
5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml；
6.SABC-POD 5ml；
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
用户自备试剂：
原位杂交专用盖玻片；POLY-L-LYSINE；DEPC；20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC，0.5×SSC，0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
一．培养细胞和冰冻切片
准备工作：
固定液：4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)；1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g，柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O，分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序：
注意：最重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛")：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲*透明，封片。
二．石蜡切片
如果有条件的话，应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后，及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6)，含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。
1．常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。
3．石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间，例如5分钟,10分钟，20分钟，30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察：
E-Cadherin的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项：
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数，加上基因仅由四个碱基排列组合而成，因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照，基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时，用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释，一般稀释2—10倍；并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况；如果出现大量的细胞核着色，往往和标本固定时间过长有关，应重新处理标本。

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