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Biotin RNA Labeling Mix
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嵘崴达
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40 μL
生物素RNA标记混合物
sufficient for 20 reactions (transcription), pkg of 40 μL, solution
别名:
Biotin
一般描述
用于生物素-16-UTP标记RNA的便捷核苷酸混合物。
特异性
热灭活:添加2 μl 0.2 M EDTA (pH 8.0)以终止反应。
应用
生物素RNA标记混合物已用于通过生物素-16-UTP与SP6、T7和T3 RNA聚合酶体外转录的RNA标记。
生物素标记RNA还应用于一系列杂交技术:
- DNA印迹
- RNA印迹
- 斑点印迹
- 菌落及菌斑清除
- RNA酶保护试验
- 原位杂交
- 微阵列杂交
- RNA pull down试验
特点和优势
组份
10x 浓缩液包含: ATP、CTP、GTP各10mM,6.5mM UTP,3.5mM生物素-16-UTP,pH 7.5
罗氏试剂
| 11685597910 | Biotin RNA Labeling Mix 10x, 生物素RNA标记混合物 |
| 11685619910 | Fluorescein RNA Label.Mix 10x,RNA荧光标记 |
| 11666916001 | Lumi-Film Chem.lum.Detect.F(7.,罗氏试剂,roche试剂 |
| 11096176001 | Blocking Reagent阻断剂(常备货), |
| 3353583910 | DIG Oligo Tailing Kit, 2nd gen |
| 10838292001 | T4 Polynucleotide Kinase, 1000,T4多聚核苷酸激酶 |
| 10642720001 | DNA Polymerase I, Endonucl.-fr,DNA聚合酶I |
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文献和实验。 9. 最后,样品加入叠氮钠(终浓度0.5 g/L)及1.0 g/L BSA。将结合产物置4℃,避光保存,亦可加入50%重蒸甘油,置-20℃保存。 要点: 1. 如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对0.1 mol/L 碳酸氢钠缓冲液或0.5 mol/L 硼酸缓冲液 2. 所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件。
步骤 1. 在一支灭菌的Eppendof离心管中加入20μl探针DNA(0.5-1μg/μl,溶解于水中 2. 避光条件下加等体积的光敏生物素醋酸盐并混匀。 3. 将装有反应液的离心管置于冰模中,暗室中在光标记灯下照射30分钟(灯距样品15cm)。 4. 加入无菌水至总体积为100μl 5. 加入100μl仲丁醇,混匀。10000rpm离心10min,去上层液,再加入仲丁醇,离心,使水相浓缩至30
1ml/管,蛋白质在1-3ml之间洗下; 9.最后,样品加入叠氮钠(终浓度0.5g/L)及1.0g/L BSA。将结合产物置4℃,避光保存,亦可加入50%重蒸甘油,置―20℃保存。 要点: 1. 如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对0.1 mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5 mol/L硼酸缓冲液充分透析; 2. 所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个
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