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- roche
- 罗氏-11031163001
- 2025年11月13日
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- 供应商：
嵘崴达
- 保存条件：
−20°C
- 英文名：
T3 RNA Polymerase
- 规格：
1000 units
from Escherichia coli HB101
别名:mRNA, polymerase
一般描述
使用该酶，可以产生同源标记的单链 RNA。转录物可以用生物素或 DIG-11-UTP 进行非放射性标记，或用 [α-32P]-或[α-35S] 标记的核苷酸放射性标记至高比活性。T3 RNA 聚合酶是一种 DNA 依赖性 RNA 聚合酶，对其启动子具有高特异性。只有位于 T3 启动子下游的 DNA 才会被转录。特异性
启动子特异性T3 RNA 聚合酶具有极高的启动子特异性，仅转录噬菌体 T3 DNA 或克隆到 T3 启动子下游的 DNA。
热失活：通过加入 2 μl 0.2M EDTA（pH8.0）和/或加热至 65℃ 来终止反应。
应用
T3 RNA 聚合酶可以从克隆 DNA 模板（位于 T3 启动子下游）转录 RNA。使标记的 NTP 可以合成高度标记的 RNA。合成的 RNA 可用于许多应用，包括：- RNA 或 DNA 印迹技术
- 原位杂交
- RNase 保护研究：将酶合成的转录物用作前体 RNA，用于 RNA 剪接和加工的研究。
- 在转录反应期间，通过在 GTP 或 ATP 上过量添加 m7GpppG 或 m7GpppA，在体外合成加帽的 RNA。产生的反义 RNA 可导入细胞中，抑制相应基因的表达。
包装
1 个试剂盒包含 2 种组分| 10881775001 | RNA Polymerase, T7, 5000 U,RNA聚合酶，T7 |
| 11031171001 | RNA Polymerase, T3, 5000 U,RNA聚合酶，T3 |
| 3353575910 | DIG Oligo 3'-End Lab. Kit,2nd |
| 10481238001 | pBR322 DNA (1 A260 unit) |
| 11388908910 | Biotin-16-UTP,生物素- 16 - UTP |
| 11745816910 | DIG-Nick translat.mix f.in sit |
| 11093274910 | Anti-digoxigenin AP-conjungate |
| 10885819001 | pUC18 DNA,pUC18质粒DNA |
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文献和实验一般是指 DNA依存性 RNA聚合酶。是催化以 DNA为模板（ template）、三磷酸核糖核苷为底物、通过磷酸二酯键而聚合的合成 RNA的酶。因为在细胞内与基因 DNA的遗传信息转录为 RNA有关，所以也称转录酶。反应以下式示： n1 -n4 表示各个模板的 DNA链的胸腺嘧啶、胞嘧啶、鸟嘧啶、腺嘌呤的碱基数。通过特异的碱基配对的形成，合成具有与模板 DNA链完全互补的碱基排列的 RNA。反应是由（ 1） DNA与酶的结合
，则可计算其直径约为100A，即约为双链DNA的30bp节段的长度。然而全酶可结合约60个核苷酸 ，提示其形状应为椭圆球形。 结构 为什么细菌 的RNA聚合酶需要这么大和复杂的分子结构呢?而某些噬菌体特有的RNA聚合酶则要小得多，仅由一条多肽链组成。这证明RNA合成所需的机构可以远比宿主的酶小。这种情况说明，噬菌体内的转录仅需一条"最小"的机构。然而这种酶只能识别噬菌体本身所有的少数几个启动子;它们不能识别其他启动子。例如噬菌体T3和T7的RNA聚合酶分子很相似
合成是以DNA的一条链为模板而进行的，所以这种转录方式又叫做不对称转录。②都以四种三磷酸核苷的底物，原料；③都遵循DNA与RNA之间的碱基配对原由，A=U，T=A，C=G，合成与模板DNA序列互补的RNA链。④RNA链的延长方向是5’→3’的连续合成。⑤需要Mg2+或Mn2+离子。⑥并不需要引物。RNA聚合酶缺乏3’→5’外切酶活性，所以没有校正功能。 RNA聚合酶催化下列反应： 大肠杆菌RNA聚合酶的研究得比较透彻的，这是一个分子量达50多万，全酶由五咱亚基组成，去掉δ
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