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Trypsin recombinant, Proteomics Grade
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嵘崴达
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−20°C
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需确认
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4 X 25 μG
重组胰蛋白酶,蛋白质组级
Trypsin recombinant, Proteomics Grade
recombinant enzyme expressed in Pichia pastoris
| packaging | pkg of 4 × 100 μg (03708969001) |
| pkg of 4 × 25 μg (03708985001) |
General description
该胰蛋白酶制剂由重组的巴斯德毕赤酵母菌株产生,因此不含胰凝乳蛋白酶。 蛋白质组学级的重组胰蛋白酶具有高比活性。
Specificity
丝氨酸内肽酶,在碱性氨基酸Arg和Lys的羧基侧特异性水解蛋白和肽。Arg和Lys的酰胺和酯键也被断裂。
Application
在用于质谱的样品制备过程中,使用蛋白质组学级的重组胰蛋白酶来特异性地消化通过二维凝胶电泳或液相色谱方法而分离的蛋白。
Preparation Note
稳定剂:在mM浓度范围的Ca2+
抑制剂:TLCK、DFP、PMSF、亮肽素、大豆胰蛋白酶抑制剂、鸡蛋中的胰蛋白酶抑制剂、抑肽酶、α 2-巨球蛋白、α 1-抗胰蛋白酶、APMSF和抗蛋白酶。
储存条件(工作溶液):-15至-25°C
重组后的溶液在-15至-25°C可稳定1个月。避免反复冻融!
Reconstitution
在用10 mM HCl重组后,蛋白质组学级的重组胰蛋白酶可在-15至-25 °C稳定最长达一个月。该产品在首次重组后必须通过适当的分装后进行储存,以避免反复冻融。
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文献和实验;HPLC 级)。 ( 5 ) n-Octyl-glycopyranoside (n-OGP)。 ( 6 ) 测序级猪胰蛋白酶。虽然也可用其他优质的测序级猪胰蛋白酶,但为了均一性和方便,使用 Promega 公司的测序级猪胰蛋白可以优化实验方案和数据。 ( 7 ) 碳酸氢铵缓冲液:25 mmol/L 碳酸氢铵缓冲液,pH 7.8。 ( 8 ) 乙腈/碳酸氢铵缓冲液:50/50 (V/V) 乙腈/25 mmol/L 碳酸氢铵缓冲液( pH 7.8)。 ( 9 ) 消化缓冲
-Translational Modifications (PTMs),分享在这儿,原文是英文,值得收藏和学习哦!文末也有PTMs的一些数据库分享!Introduction:在过去的几十年里,科学家们发现人类蛋白质组比人类基因组要复杂得多。虽然估计人类基因组由 20,000 至 25,000 个基因组成,但人类蛋白质组中的蛋白质总数估计超过 100 万个。这些估计证明单基因编码多个蛋白。基因组重组、选择性启动子处的转录起始、差异转录终止和转录本的选择性剪接是由单个基因产生不同 mRNA 转录本的机制。蛋白质翻译后修饰
而成),静置30min后,弃去上清液。然后加200/ul水清洗,静置30min后弃上清液。重复该步骤直至胶粒变为五色。 2. 脱水干燥:在胶粒中加入200ul乙腈静置30min后,弃上清液。重复该步骤至凝皎完全脱水变白。将乙腈吸出舍弃后,将胶粒置于37℃至完全干燥。 3. 酶液泡胀:测序级的胰蛋白酶用20mmol/L碳酸氢铵溶液配制为浓度12.5ng/ml后,加入适量酶液于胶粒中,并于4~C放置30rain使胶粒完全泡涨。然后吸出多余的酶液弃去,以防止质谱检测时出现过多的胰蛋白酶自身降解
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