北京WE0226型人类基因组DNA说明书

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括北京WE0226型人类基因组DNA说明书在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：北京WE0226型人类基因组DNA说明书
编号：WE0226
品牌：百奥莱博
英文名：Human Genomic DNA
产地：国产|进口
本产品是一类高纯度的基因组DNA提取物，琼脂糖凝胶(0.7%)电泳检测显示该DNA提取物大小在15Kb以上，且基本无降解，可广泛应用于PCR、酶切、杂交、微阵列分析等分子生物学实验。

北京WE0226型人类基因组DNA说明书极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·FITC标记驴抗兔IgG(H+L)
编号：WE0365
英文名称：Donkey Anti-Rabbit IgG,FITC Conjugated
规格：100μl
本产品为FITC标记的经亲和纯化的驴抗体，特异识别兔IgG，检测灵敏度高，本底低，常用于免疫荧光和流式细胞等标记检测。FITC即硫*酸荧光素，为一种常用的荧光染料，常用于免疫荧光和流式细胞检测等多标记检测。

免疫原：兔IgG
缓冲液：0.01M PBS，50%甘油，pH7.6
稳定剂：15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂：0.05%叠氮*
荧光团：FITC，Amax=492; Emax=520
应用范围：对于大多数实验(1：50-200)

·柱式小量血液基因组DNA提取试剂盒(0.1～20ml)
编号：WE0175
英文名称：Blood Genomic DNA Mini Extraction Kit(0.1-1ml)
规格：50次|200次
  本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的全血(用柠檬酸盐、EDTA或肝素等抗凝剂处理过的血液样品)、血浆、血清、血沉棕黄层、淋巴细胞、无细胞体液等样本中提取总DNA，包括基因组DNA，线粒体DNA及病毒DNA。本品可以处理0.1-1ml的全血，最高得率可达30μg，可纯化获得大小为100 bp到50 kb的DNA，纯化的DNA产量高、质量好，最大限度去除蛋白、色素、脂类及其他抑制性杂质污染，可直接用于PCR、荧光定量PCR、酶切和Southern Blot等实验。

试剂盒组成：

 

组份	50次	200次
Buffer RCL	125ml	2×260ml
Buffer GR	15ml	50ml
Buffer GL	15ml	50ml
Buffer GW1(浓缩液)	13ml	52ml
Buffer GW2(浓缩液)	15ml	50ml
Buffer GE	15ml	60ml
蛋白酶K	12.5 mg	50 mg
蛋白酶K 储存液	1.25ml	5ml
吸附柱 DM及收集管	50套	200套

产品特点
1、纯度高：提取的基因组DNA可直接用于下游PCR、荧光定量PCR、酶切等各种实验。
2、提取量大：可从0.1-1.0ml的全血中提取基因组DNA。
3、兼容性强：适用于处理各种抗凝血液和细胞样本。

自备试剂：无水乙醇

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、向蛋白酶K 中加入蛋白酶K 储存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。
2、样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
3、本试剂盒最多可以提取0.1-1ml全血样品或1×107个白细胞。
4、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
5、使用前请检查Buffer GL是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请将Buffer GL于56℃水浴孵育重新溶解。
6、试剂盒中的Buffer RCL浑浊后不能继续使用。

操作步骤：
1、样品处理：
1.1、提取200 ul血液样品时，向离心管(自备)中加入样本后，可直接进行下一步实验。
1.2、当血液样本量小于200μl时，加入Buffer GR补足至200μl，再进行下一步实验。
1.3、当血液样本量超过200μl时，加入1~2.5倍体积的Buffer RCL，轻轻涡旋或颠倒混匀，12000rpm(~～13400×g)离心1分钟，小心吸弃上清液，如果沉淀中还有红色，可以重复以上步骤一次。然后向沉淀中加入200μl Buffer GR，震荡至彻底混匀,再进行下一步实验。
1.4、如果处理血液样本为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝血，其红细胞为有核细胞，血液样本量为5-20μl，可加入Buffer GR，补足至200μl后进行后续实验。
注意：如果下游试验对RNA敏感，可加入4μl RNase A(100mg/ml)溶液，震荡15秒，室温放置5分钟。RNase A本试剂盒并未提供，如需要可单独向本公司订购，货号：WE0225S。
2、向以上溶液中加入20μl 蛋白酶K ，混匀。
3、加入200μl Buffer GL，震荡至彻底混匀。
注意：不要将蛋白酶K 和Buffer GL进行预混。
4、56℃孵育10分钟，其间颠倒混匀数次。
注意：孵育10分钟DNA的产量已经达到最大，继续延长孵育时间对DNA产量和纯度没有影响。
5、加入200μl无水乙醇，颠倒混匀数次。短暂离心，使管壁和壁盖上的液体集中到管底。
6、将步骤5所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱DM中，若一次不能加完溶液，可分多次转入。12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否加入无水乙醇), 12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
注意：如果提取样品是小鼠或猴子等血红素难以除去的种属的血液基因组，建议重复步骤7。
8、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
注意：如需进一步提高DNA纯度，可重复步骤8。
9、12000rpm离心2分钟，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。
10、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中，向吸附柱的中间部位悬空加入50-200μl Buffer GE或灭菌水，室温放置2-5分钟，12000rpm离心1分钟，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。
注意：
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)，pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)如果要提高DNA的终浓度，可以将所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上，室温放置2-5分钟，12000rpm离心1 分钟。
3)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响，如需长期保存，推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。

储存条件：室温(15～30℃)。


北京WE0226型人类基因组DNA说明书关键词：人类基因组DNA,Human Genomic DNA ,WE0226


·细胞核/浆蛋白抽提试剂盒
编号：WE0265
英文名称：Nuclear and Cytoplasmic Extraction Kit
规格：50次
  本试剂盒能够简单、快速的提取来源于哺乳动物细胞及组织的细胞核和细胞浆蛋白，所提取蛋白保持生物学活性。本试剂盒首先通过细胞浆蛋白抽提试剂裂解细胞膜，释放细胞浆蛋白，然后通过离心得到细胞核沉淀。最后通过细胞核蛋白抽提试剂抽提得到细胞核蛋白。抽提获得的核蛋白及浆蛋白纯度高，有效避免核/浆蛋白的交叉污染，可以用于Western、Gel Shift、报告基因检测以及酶活力测定等后续操作。

试剂盒组成：

组份	50次
Buffer A	50ml
Buffer B	3ml
Buffer C	25ml
Protease Inhibitor Cocktail	750μl

保存条件：Protease Inhibitor Cocktail：-20℃，其它组分：2～8℃

注意事项：
1、如需提取磷酸化蛋白请在抽提试剂中加入磷酸酶抑制剂。
2、所有样品操作请置于冰上进行。
3、可根据具体实验情况调整试剂用量，保证各试剂使用比例为Buffer A:Buffer B:Buffer C=100:5.5:50。
4、可以采用更高的速度来离心。

使用方法：

一、细胞中胞浆、胞核蛋白的提取
1、请在蛋白抽提前取出抽提试剂Buffer A和Buffer C进行预冷
2、收集细胞，计数。离心去上清。
3、1×107细胞中加入1ml Buffer A(按照1:99比例在蛋白抽提前2-3分钟内加入Protease Inhibitor Cocktail)，涡旋5秒以充分混匀，冰上孵育20分钟。
注意：各种细胞的特性不同，需要根据不同细胞的特性调整Buffer A的用量，如果蛋白浓度小，按比例减少Buffer A及后续Buffer B、Buffer C的用量。
4、加入55μl Buffer B，涡旋5秒以充分混匀，冰上孵育 1分钟。
5、4℃ 12000rpm(~～13400×g)离心 15分钟，收集上清(尽量收集干净上清液)至新的离心管中，-20℃保存(此提取液为胞浆蛋白)。
6、向上步所得的沉淀中加入500μl Buffer C(使用前按照1:99比例加入Protease Inhibitor Cocktail)，涡旋5秒以充分混匀，重悬沉淀，冰上孵育40分钟，每隔10分钟涡旋混匀一次，每次约15-30秒。
7、4℃ 12000rpm离心15分钟，收集上清(尽量收集干净上清液)至新的离心管中，-20℃保存(此提取液为胞核蛋白)。

二、组织中胞浆、胞核蛋白的提取
1、取材，保存组织。
2、在蛋白抽提前取出抽提试剂Buffer A和Buffer C进行预冷。
3、称组织重量，每100 mg组织中加入1ml Buffer A(按照1:99比例在蛋白抽提前2-3分钟内加入Protease Inhibitor Cocktail)，用匀浆器在冰上充分匀浆，放置在冰上孵育20分钟。
注意：各种组织的特性不同，需要根据不同组织调整Buffer A的用量，如果蛋白浓度小，按比例减少Buffer A及后续Buffer B、Buffer C的用量。
4、加入55μl Buffer B，涡旋5秒以充分混匀，放置在冰上孵育 1分钟。
5、4℃ 12000rpm离心 15分钟，收集上清(尽量收集干净上清液)至新的离心管中，-20℃保存(此提取液为胞浆蛋白)。
6、向上步所得的沉淀中加入500μl Buffer C(使用前按照1:99比例加入Protease Inhibitor Cocktail)，涡旋5秒以充分混匀，重悬沉淀，冰上孵育40分钟，每隔10分钟涡旋混匀一次，每次约15-30秒。
7、4℃ 12000rpm离心15分钟，收集上清(尽量收集干净上清液)至新的离心管中，-20℃保存(此提取液为胞核蛋白)。

储存条件：-20℃


北京WE0226型人类基因组DNA说明书关键词：人类基因组DNA,Human Genomic DNA ,WE0226

F040319 豚鼠IgG抗原 Guinea Pig IgG
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64285-73-0 3,3",5,5"-四甲基联*(代"*")*(代"胺")二盐*(代"酸") TMB 2HCL
NF-211 羊抗人C3C血清
PY02-305  葡萄糖半固体发酵培养基  250克  
*甲*(代"酚")绿-甲基红指示剂   100ml
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Tris*盐缓冲液(10×,pH7.8)   500ml

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