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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
911
- 英文名:
BaReSYBR Mixture
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括WE0140型实时荧光定量PCR预混体系(SYBR GreenⅠ)现货在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:WE0140型实时荧光定量PCR预混体系(SYBR GreenⅠ)现货
产地:国产|进口
编号:WE0140
规格:5ml
品牌:百奥莱博
本品是专用于染料法(SYBR GreenⅠ)实时荧光定量PCR的预混体系, 浓度为2×, 包含HotStar Bes Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、SYBR Green I荧光染料和Mg2+,操作简单方便。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后的cDNA靶序列的检测。本品中所含的荧光染料SYBR Green I可以与所有的双链DNA相结合,使该产品可以用于多种不同靶序列的检测而不需合成特异性标记探针。经独特方法处理的热启动DNA聚合酶和专门的PCR缓冲液使本品具有特异性高的特点,满足常规荧光定量检测。该产品应用范围广,适用于无需ROX作为校正染料的荧光定量PCR仪。
产品组成:
| 组份 | 5ml |
| 2×BaReSYBR Mixture | 5×1ml |
| ddH2O | 5×1ml |
注意事项:
1、使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。
2、本产品中含有荧光染料SYBR Green I,保存本产品或配制PCR反应液时应避免强光照射。
3、避免反复冻融本品,反复冻融可能使产品性能下降。本产品长期保存可置于-20℃,避光。如果在短期内需要频繁使用,可在2~8℃保存。
4、本品不能用于探针法荧光定量PCR。
使用方法:
以下举例为常规PCR反应体系和反应程序,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系:
| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 2×BaReSYBR Mixture | 25μl | 1× |
| Forward Primer,10μM | 1μl | 0.2μM |
| Reverse Primer,10μM | 1μl | 0.2μM |
| Template DNA | 2μl | |
| ddH2O | up to 50μl |
注意:
1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果,可以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2)通常DNA模板的量以10-100ng基因组DNA或1-10ng cDNA为参照,因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同,可对模板进行梯度稀释,以确定最佳的模板使用量。
2、PCR反应程序:
两步法PCR:
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min | |
| 变性 | 95℃ | 15 s | 35-40个循环 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 1 min | |
| 融解曲线分析 | 95℃ | 15 s | |
| 60℃ | 1 min | ||
| 95℃ | 15 s | ||
| 60℃ | 15 s |
注意:
1)本产品所采用的热启动酶需在预变性95℃、5 min条件下实现酶的活化。
2)建议采用两步法PCR反应程序,若提高反应特异性,可提高退火温度,以60-64℃作为设定范围的参考;若因使用Tm值较低的引物等原因,得不到良好的实验结果时,可尝试进行三步法PCR扩增,退火温度请以 56℃-64℃的范围作为设定参考。
3)融解曲线分析请以所使用的荧光定量PCR仪推荐的程序进行设定,本程序是以ABI 7500荧光定量PCR仪为参照设定。
储存条件:-20℃,避免反复冻融
关于WE0140型实时荧光定量PCR预混体系(SYBR GreenⅠ)现货的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·抗GST标签琼脂糖介质
编号:WE0331
英*(代"文")名称:Anti-GST Mouse Monoclonal Antibody Agarose Resin
规格:100μl|500μl
抗GST标签免疫亲和介质是将抗GST标签的单克隆抗体共价偶联到琼脂糖上,这种琼脂糖能进行免疫沉淀或者免疫共沉淀,能检测含有GST标签的蛋白。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG1
免疫原:人工合成多肽序列
应用范围:IP
·Super DNA Ladder
编号:WE0243
英*(代"文")名称:Anti-GST Mouse Monoclonal Antibody Agarose Resin
规格:100次(500μl)|500次(5×500μl)
Super DNA Ladder由10条DNA片段组成,分别为10000bp、5000bp、3000bp、2000bp、1,500 bp、1000bp、750 bp、500 bp、250 bp和100 bp。本产品含有1×Loading Buffer的DNA溶液,可取5μl直接电泳,使用十分方便;电泳时1000bp的DNA片段量约为150ng,显示亮带,其他条带的DNA量约为50ng。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、本产品可直接化冻混匀使用,无需加热。
2、请及时更换电泳缓冲液并使用新制琼脂糖凝胶,以免影响电泳结果。
3、DNA琼脂糖凝胶电泳时,凝胶的纯度对DNA条带的清晰度影响很大,因此尽量选用质量好的琼脂糖,推荐凝胶浓度为1%-3%,电压4-8 v/cm。
4、凝胶浓度与DNA片段的分离性能关系密切。凝胶浓度越大,对短片段DNA分离性能越好;反之,凝胶浓度越小,越有利于长片段DNA的分离。
使用方法:
取5μl 加入琼脂糖凝胶的加样孔中(如果加样孔较宽,大于6mm时,须适当增加上样量),进行电泳。

1%琼脂糖凝胶电泳图(5μl)
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期24个月。
WE0140型实时荧光定量PCR预混体系(SYBR GreenⅠ)现货关键词:BaReSYBR Mixture,实时荧光定量PCR预混体系(SYBR GreenⅠ),WE0140
·二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index Primer1-12)
编号:WE0241
英*(代"文")名称:NGS Multiplex Oligos for Illumina(Index Primers Set I)
规格:24次|96次
本试剂盒提供了二代测序建库中使用的adaptor与primer,专为illumina平台建库设计,index primer的设计可满足多重高通量测序时制备多个文库样本的需要,制备的文库可用于Illumina GAIIx,HiSacnSQ、HiSeq 2500/2000/1000和MiSeq sequencing等测序平台的测序。
试剂盒组成:
| 组份 | 24次 | 96次 |
| Adaptor for Illumina | 60μl | 240μl |
| Universal Primer for Illumina | 30μl | 120μl |
| Index 1– 12 Primers for Illumina | 12×10 μ l | 12×20 μ l |
自备仪器、试剂和耗材:
1、磁力架:建议使用DynaMagTM-2(货号: 12321D)。
2、DNA纯化回收试剂盒:建议使用百奥莱博磁珠法DNA纯化回收试剂盒(货号: WE0205)。
3、DNA建库试剂盒:建议使用百奥莱博二代测序快速DNA建库试剂盒(货号: WE0229)。
4、无水乙醇。
5、反应管:建议使用低吸附的PCR管与1.5ml离心管;枪头:建议使用高质量过滤枪头防止试剂盒、文库样本污染。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、Adaptor为双链结构,请勿将其置于室温温度以上,以免发生解链、影响使用。
2、Index primer开盖前请短暂离心,使液体收集到管底,以免不同引物间交叉污染。
使用流程

操作步骤:
百奥莱博二代测序多样本接头引物试剂盒使用方法请按照百奥莱博二代测序快速DNA建库试剂盒(Cat .No.WE0229)protocol进行。
Adaptor for Illumina:
5´-/5Phos/ GATCGGAAGAGCACACGTCTGAACTCCAGT*C -3´
5´-ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATC*T-3´
Universal Primer for Illumina:
5-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATC*T -3´
Index 1–12 Primers for Illumina:
| Index Primers for Illumina | Index | |
| Index 1 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATCGTGATGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
ATCACG |
| Index 2 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATACATCGGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
CGATGT |
| Index 3 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATGCCTAAGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
TTAGGC |
| Index 4 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTGGTCAGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
TGACCA |
| Index 5 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATCACTGTGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
ACAGTG |
| Index 6 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATATTGGCGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
GCCAAT |
| Index 7 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATGATCTGGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
CAGATC |
| Index 8 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTCAAGTGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
ACTTGA |
| Index 9 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATCTGATCGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
GATCAG |
| Index 10 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATAAGCTAGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
TAGCTT |
| Index 11 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATGTAGCCGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
GGCTAC |
| Index 12 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTACAAGGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
CTTGTA |
储存条件:-20℃
WE0140型实时荧光定量PCR预混体系(SYBR GreenⅠ)现货关键词:BaReSYBR Mixture,实时荧光定量PCR预混体系(SYBR GreenⅠ),WE0140
·HRP标记驴抗兔IgG(H+L)
编号:WE0366
英*(代"文")名称:Donkey Anti- Rabbit IgG,Peroxidase Conjugated
规格:100μl
本产品为过氧化物酶标记的经亲和纯化的驴抗体,特异识别兔IgG,检测灵敏度高,本底低,可用于Western Blot、ELISA 和免疫组化检测。酶标记抗体,是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学各个分支学科中的免疫化学制剂,具有特异、敏感和安全的特点。
免疫原:兔IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:无(叠氮*是HRP抑制剂,抗体稀释液中请避免使用叠氮*作为防腐剂)
应用范围:
WB ECL发光检测(1:10000-200000)
ELISA(1:5000-100000)
WB 显色检测(1:5000-100000)
Immunohisto/cytochemistry(1:500-5000)
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购WE0140型实时荧光定量PCR预混体系(SYBR GreenⅠ)现货。
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文献和实验分析.4、几个概念:(1)扩增曲线 :(2) 荧光阈值:(3)Ct值:CT值的重现性:5、定量原理:理想的PCR反应: X=X0*2n非理想的PCR反应: X=X0 (1+Ex)nn:扩增反应的循环次数X:第n次循环后的产物量X0:初始模板量Ex:扩增效率5、标准曲线6、绝对定量1)确定未知样品的 C(t)值2)通过标准曲线由未知样品的C(t)值推算出其初始量二、实时荧光定量PCR的几种方法介绍 方法一:SYBR Green法 (一)工作原理 1、SYBR Green 能结合到双链DNA的小沟
了长足的发展,比如BioTeke公司的荧光定量系列产品就以其优良的品质和亲民的价格越来越受到国内用户的青睐,目前还可以申请试用装。为了证明其荧光定量系列产品的品质,BioTeke公司特邀请了山东大学细胞发育遗传学实验室进行了BioTeke的SYBR GREEN I实时荧光定量产品和T公司的实时荧光定量试剂的比对实验。具体实验如下:实验材料小鼠肝脏组织山东大学实验室提供样品cDNA实验方法RNA提取:Bioteke RNApure高纯总RNA提取试剂盒,操作步骤请参考说明书。目的基因:小鼠管家基因β–
(donor) 和能量受体 (acceptor) 对, 其中供体的发射光谱与受体的吸收光谱重叠,当它们在空间上相互接近到一定距离 (1~10 nm) 时,激发供体而产生的荧光能量正好被附近的受体吸收,使得供体发射的荧光强度衰减,受体荧光分子的荧光强度增强。 图一. 荧光共振能量转移原理图 实时荧光 PCR 技术种类 染料法 SYBR Green I 是一种比较常见的荧光染料,可以非特异的结合双链 DNA 小沟,它可以嵌合进 DNA 双链,但不结合单链。当 SYBR Green I 在溶液
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