北京WE0123型高效热启动DNA聚合酶哪里卖

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名称：北京WE0123型高效热启动DNA聚合酶哪里卖
编号：WE0123
产地：国产|进口
规格：500U|2500U
  本产品是一种采用最新封闭技术的Taq DNA Polymerase，适用于HotStart PCR。在70℃以下，酶的活性中心被完全封闭，有效抑制了聚合酶活性，并能够在低温条件下有效抑制引物的非特异性退火及引物二聚体引起的非特异性扩增。在95℃条件下孵育5分钟后，酶的部分活性得以释放。随着热循环的不断进行，剩余的酶活会源源不断地释放出来，这就使得此酶克服了常规Taq酶容易出现平台期的弊端，其扩增效率大大提高。
  本品进行PCR扩增时，PCR产物3"末端附有一个“A”碱基，可直接用于T/A克隆。本产品具有扩增速度快、特异性好、稳定性好的特点，主要应用于对扩增产物要求量大的PCR和RT-PCR反应。

产品组成：

 

组份	500U	2500U
SuperStar DNA Polymerase，5 U/μl	100μl	5×100μl
10×PCR Buffer	1.8ml	5×1.8ml

注意：本产品的10×PCR Buffer中含有15 mM*离子。

活性定义：用活性化的大马哈鱼精子 DNA 作为模板/引物，在74℃，30分钟内，将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。

质量控制：
1、经过多次柱纯化，SDS-PAGE检测其纯度大于99%；
2、经检测无外源核酸酶活性；
3、PCR方法检测无宿主残余DNA；
4、能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因。

使用方法：
以下举例为以人基因组DNA为模板，扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	终浓度
10×PCR Buffer	5μl	1×
dNTP Mix，10 mM each	1μl	200μM each
Forward Primer，10μM	2μl	0.4μM
Reverse Primer，10μM	2μl	0.4μM
Template DNA	<0.5μg	<0.5μg/50 μ l
SuperStar DNA Polymerase，5 U/μl	0.5μl	2.5 U/50μl
ddH2O	up to 50μl

注意： 可以在室温下配制反应液，最好将试剂置于冰上。引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

2、PCR反应条件

步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	5 min
变性	94℃	0.5-1 min	25-35个循环
退火	50-68℃	0.5-1 min
延伸	72℃	1 min
终延伸	72℃	10 min

注意：
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定，本产品中所包含的SuperStar DNA Polymerase的延伸速率为1 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

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·一步法RT-PCR试剂盒
编号：WE0129
英文名称：UltraRT One Step RT-PCR Kit
规格：100次
  本试剂盒是专为一步法RT-PCR实验研制，逆转录和PCR在同一反应体系中进行，反应过程中无需添加试剂，无需打开管盖，在避免污染的同时提高了检测灵敏度和实验效率。本试剂盒包括全新高效逆转录酶、快速热启动DNA聚合酶，同时包含适用于逆转录和PCR扩增的反应缓冲液和实验中所必需的其它组分。UltraRT逆转录酶RNase H活性缺失，减少了逆转录反应中RNA的降解。该逆转酶逆转录效率高，可对少量RNA模板进行良好的逆转录反应。PCR反应使用的快速热启动DNA聚合酶具有扩增效率高、特异性强、延伸速度快的优良性能。独特的缓冲体系使逆转录酶和聚合酶同时发挥最大功效。使用本试剂盒扩增得到的目的产物3"端附有一个″A″碱基，可直接用于T/A克隆。

试剂盒组成：

组份	100次
UltraRT OneStep EnzymeMix	50μl
2×UltraRT OneStep Buffer	1.4ml
RNase-Free Water	1.5ml

注意事项：
1、在操作过程中应避免RNase污染，防止RNA降解或实验中的交叉污染，建议在专门的区域进行RNA操作，使用专门的仪器和耗材，操作人员带口罩和一次性手套并经常更换手套。
2、实验尽量使用一次性塑料器皿，若使用玻璃器皿，应使用0.1%DEPC(焦碳酸二乙酯)水溶液在37℃处理12小时，并在120℃下高压灭菌30分钟后使用，或者将玻璃器皿在180℃下干热灭菌60分钟后使用。实验中用到的无菌水应使用0.1%的DEPC处理后进行高压灭菌。
3、本试剂盒中的所有试剂使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。所涉及的酶类使用后应尽快放回-20℃，避免反复冻融。
4、本试剂盒必须使用特异性引物，引物的选择可根据具体实验来选择，引物设计的好坏直接影响到RT-PCR 反应的结果，设计引物时需考虑GC含量，引物长度，引物位置，PCR产物的二级结构等因素，建议采用专业的引物设计软件来设计。

使用方法：
1、将RNA模板、引物、OneStep RT-PCR Buffer、UltraRT OneStep RT-PCR EnzymeMix和RNase-Free Water溶解并置于冰上备用。
2、根据以下表格配制反应体系：
 

试剂	25μl反应体系	终浓度
2×UltraRT OneStep Buffer	12.5μl	1×
Forward Primer，10μM	1μl	0.4μM
Reverse Primer，10μM	1μl	0.4μM
UltraRT OneStep EnzymeMix	0.5μl
RNA Template	Xμl	1 pg–1μg
RNase-Free Water	up to 25μl

注意：引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

3、涡旋震荡混匀，短暂离心，将溶液收集到管底。
4、将热循环仪预热到45℃，将PCR管置于热循环仪中，进行RT-PCR反应。

反应条件：

步骤	温度	时间	循环数
反转录	45℃	30 min
PCR预变性	95℃	2 min
变性	94℃	30 s	30-40 个循环
退火	55-65℃	30 s
延伸	72℃	30 s
终延伸	72℃	5 min

注意：
1)一般PCR实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，退火时间一般为20-30秒，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
2)延伸时间根据扩增的片段大小设定，本产品中包含的DNA Polymerase扩增效率为1 kb/30s。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。循环次数太少，扩增量不足；循环次数多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以，在保证产物得率的前提下，应尽量减少循环次数。

5、反应结束后取5μl反应产物，加入适量上样缓冲液后进行电泳检测结果。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。


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·尿液DNA样本保存管
编号：WE0403
英文名称：Urine DNA Storage Tube
规格：20套
尿液DNA样本采集与常规血液DNA样本采集相比，是一种新型的对人体无伤害、无痛苦的采集DNA样本的方法。尿液DNA样品保存管不仅能够保存尿液中的基因组，还能够保存尿液中游离循环DNA(cfDNA)。因为研究证明血浆cfDNA部分是来自于肿瘤、胎儿和移植器官的，并且血浆游离DNA能够通过肾脏透进入尿液，这就为无创诊断带来极大的应用价值。
尿液DNA样本保存管采集尿液样本之后，能够在6-35℃稳定保存DNA长达7天。尿液DNA样品保存管是由EDTA抗凝剂和特殊的保护剂组成，能够有效抑制尿液中的核酸酶，并避免尿液中脱落细胞基因组DNA的释放，同时也能够用于保存尿液中的血细胞。具有采集方便、无创、常温储存与运输等优点，这就为尿液样本的运输及储存提供了极大的便利。该产品适用于无创产前筛查与一些疾病的早期诊断相关的研究。




北京WE0123型高效热启动DNA聚合酶哪里卖关键词：高效热启动DNA聚合酶,SuperStar DNA Polymerase,WE0123

PY04-051  PNB(对硝基*(代"*")甲*(代"酸"))  50 mg/支×10支  加入100ml改良罗氏(L-J)培养基基础中制成PNB培养基，用于分枝杆菌菌型鉴定
58-86-6 D-Xylose   D-木糖
F040314 马IgG抗原 Horse IgG
D0101 脱纤维新生牛血(无菌 pet瓶装)
葡萄糖检测试剂盒(己糖激酶比色法)   20T
BL0483 NP-41 LYSIS BUFFER 裂解液
D0502 脱纤维驴血(无菌 袋装)
ARB11778 人新生儿促甲状腺素(N-TSH)检测服务 Human neonatal thyroid stimulating hormone,n-tsh ELISA KIT
BTN120695 新生霉素溶液 Novobiocin Sodium Solution
ARB13880 猪白介素8(IL-8/CXCL8)酶标法分析 Porcine interleukin 8,IL-8 ELISA KIT
ARB11199 人组织相容性复合体I类相关基因A(MICA)定量分析 Human mica  ELISA KIT
PY02-140  TTC琼脂基础  250克  
ARB12484 大鼠总三碘甲腺原*酸(TT3)elisa检测操作说明书 Rat tt3 ELISA KIT
ARB11296 人钩端螺旋体IgG(Lep IgG)ELISA检测服务 Human leptospira igg,lep igG ELISA KIT
547-50-8 Methyl Orange 甲基橙
ARB14016 绵羊胰岛素(INS)Elisa分析 Sheep insulin ELISA KIT
植物膜蛋白/叶绿体蛋白提取试剂盒   50T|100T
ARB10741 人纤溶酶/纤维蛋白溶酶(PL/Fbn)含量测试 Human plasmin/fibrinolysin,pl/fbn ELISA KIT
ARB10203 人β2糖蛋白1抗体IgA(β2-GP1 Ab IgA)免费代测 Human β2-glycoprotein 1 antibody iga,β2-gp1 ab iga ELISA KIT

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