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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
788
- 英文名:
Gel DNA Extraction Micro Kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
室温(15~30℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
WE0169型微量凝胶DNA回收试剂盒价格的品牌:百奥莱博,是优质的核酸电泳和回收产品,用于生化科研试验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多微量凝胶DNA回收试剂盒等核酸电泳和回收产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:WE0169型微量凝胶DNA回收试剂盒价格
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:WE0169
英文名:Gel DNA Extraction Micro Kit
本试剂盒专用于从普通或低熔点琼脂糖凝胶中回收纯化微量DNA片段,溶胶速度快,并利用硅基质膜技术,以非常小的终洗脱体积(可少至10μl),从琼脂糖凝胶中,快速纯化50 bp-50 kb的DNA片段,纯化过程有效去除引物、寡核苷酸、酶等杂质,从而可获得高纯度、高浓度,完整性好的DNA,回收率高达90%。本试剂盒回收纯化的DNA可直接用于测序、连接和转化、酶切、标记、体外转录等分子生物学实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| Buffer PG | 25ml |
| Buffer PS | 15ml |
| Buffer PW(浓缩) | 10ml |
| Buffer EB | 10ml |
| 离心吸附柱DE及收集管 | 50套 |
自备试剂:无水乙醇,异丙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、所有组分可在干燥、室温(15~30℃)环境稳定保存1年,将吸附柱置于2~8℃可保存更长时间。
2、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer PW中加入无水乙醇。
3、使用前请检查Buffer PG如果出现结晶或者沉淀,可在37℃水浴中放置3-5分钟,即可恢复澄清。
4、电泳时最好使用新的电泳缓冲液,避免影响电泳和回收效果。
5、切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对DNA造成损伤。
6、回收率与初始DNA量和洗脱体积有关,初始量越少,洗脱体积越少,回收率越低。
7、将水浴锅预热至50℃。
8、Buffer PG中含有pH指示剂,当pH≤7.5时溶液的颜色为黄色,此时DNA才能够有效的与膜结合,当pH值偏高时溶液的颜色变为桔红色和紫色,需要进行调整。
操作步骤:
1、将单一目的DNA条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分),放入干净的离心管(自备)中,称量计算凝胶重量(提前记录离心管重量)。
注意:若胶块的体积过大,可将胶块切成碎块。
2、向胶块中加入1倍体积Buffer PG(如凝胶重为100 mg,其体积可视为100μl,依此类推)。
3、50℃水浴温育,其间每隔2-3分钟温和地上下颠倒离心管,以确保胶块充分溶解。如果还有未溶的胶块,可再补加一些溶胶液或继续放置几分钟直至胶块完全溶解。
注意:
1)凝胶完全融解后胶溶液为黄色,可进行后续操作;若胶溶液为桔红色或紫色,可向胶溶液中加10-30μl 的3 M醋酸*(pH5.0),将溶液的颜色调为黄色后再进行后续操作。
2)胶块完全溶解后最好将胶溶液温度降至室温再上柱,吸附柱在较高温度时结合DNA的能力较弱。
4、(可选步骤)当回收片段<300 bp时,应加入1/2胶体积的异丙醇,上下颠倒混匀(如凝胶重100 mg,则加入50μl的异丙醇)。
5、柱平衡:向已装入收集管中的吸附柱DE中加入200μl Buffer PS,13000rpm(~~~16200×g)离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
6、将步骤3或4所得溶液加入到已装入收集管的吸附柱中,室温放置2分钟,13000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
7、向吸附柱中加入450μl Buffer PW(使用前先检查是否已加入无水乙醇),13000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
注意:如果纯化的DNA用于盐敏感的实验(例如平末端连接或直接测序),建议加入Buffer PW静置2-5分钟再离心。
8、重复步骤7。
9、13000rpm离心1分钟,倒掉收集管中废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步目的是将吸附柱中残余乙醇去除,乙醇的残留会影响后续酶促反应(酶切、PCR等)。
10、将吸附柱放到一个新的1.5ml离心管(自备)中,向吸附膜中间位置悬空滴加10-50μlBuffer EB,室温放置2分钟。13000rpm离心1分钟收集DNA溶液。-20℃保存DNA。
注意:
1)为了提高DNA的回收量,可将离心得到的溶液重新滴加到吸附柱中,室温放置2分钟,13000rpm离心1分钟。
2)回收大于10 kb的DNA片段时,Buffer EB应在50℃水浴中预热,可增加回收效率。
储存条件:室温(15~30℃)。
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WE0169型微量凝胶DNA回收试剂盒价格关键词:微量凝胶DNA回收试剂盒,WE0169,Gel DNA Extraction Micro Kit
·抗GST标签单克隆抗体
编号:WE0352
英文名称:Anti GST-Tag Mouse Monoclonal Antibody
规格:100μl
该抗体为高纯度的鼠单克隆抗体,与GST结构域具有高亲和性,可灵敏特异地检测各种GST编码载体表达的GST-Tag融合蛋白。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG1
免疫原:人工合成多肽
应用范围:WB(1:500-5000)、ELISA(1:200-20000)
·HRP标记链霉亲和素
编号:WE0386
英文名称:Peroxidase-Streptavidin
规格:100μl
HRP标记链霉亲和素可用于微量抗原、抗体及核酸等大分子的定量、定性检测及定位观察研究,与生物化的抗体联合使用,可检测微量抗原的存在及分布。本产品可用于Immunohistochemistry(IHC)、Western Blot、ELISA等检测。
链霉亲和素与生物素具有极高的亲和力,反应呈高度专一性。每个链霉亲和素分子具有4个生物素分子结合位点,因此,它可同时以多价形式结合生物素化的大分子衍生物,通过标记的HRP催化底物显色,具有多级放大作用。与亲和素相比,链霉亲和素不带糖基、等电点低,在使用中表现出更低的背景和更高的检测灵敏性。
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:无(叠氮*是HRP抑制剂,抗体稀释液中请避免使用叠氮*作为防腐剂)
应用范围:
WB(1:1000-5000)
ELISA(1:1000-5000)
Immunohistochemistry(1:100-400)
WE0169型微量凝胶DNA回收试剂盒价格关键词:微量凝胶DNA回收试剂盒,WE0169,Gel DNA Extraction Micro Kit
·高效多重PCR Mix
编号:WE0124
英文名称:Super Multiplex PCR Mix
规格:1ml|5ml
本品是由SuperStar DNA Polymerase、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂等组成的预混体系,专用于多重PCR扩增。本品所含的 SuperStar DNA Polymerase是全新高效热启动酶,在常温下没有聚合酶活性,可有效减少PCR反应初期因引物错配而产生的非特异性扩增。独特的缓冲体系与热启动酶的组合,显著提高了PCR的扩增效率,扩增范围更广泛。本产品适用于各种类型的多重PCR反应,比如微卫星分析、基因分型和SNP检测等。
产品组成:
| 组份 | 1ml | 5ml |
| 2×Super Multiplex PCR Mix | 1ml | 5×1ml |
| ddH2O | 1ml | 5×1ml |
注意事项:
1、使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。
2、避免反复冻融,反复冻融可能使产品性能下降。如果在短期内需要频繁使用,可在2~8℃保存。
使用方法:
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
| 试剂 | 50μl反应体系 |
| 2×Super Multiplex PCR Mix | 25μl |
| Primer Pool | 0.1-0.3μM |
| DNA or cfDNA | 5ng-100ng |
| ddH2O | up to 50μl |
注意:引物浓度请以终浓度0.1-0.3μM作为设定范围的参考。
2、PCR反应条件
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 2 min | |
| 变性 | 98℃ | 20 s | 30-40个循环 |
| 退火延伸 | 65℃ | 90 s | |
| 终延伸 | 72℃ | 5 min |
注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购WE0169型微量凝胶DNA回收试剂盒价格。
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