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血液基因组DNA提取试剂盒 价格

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  • ¥100 - 1980
  • 百奥莱博
  • WE0176-DAE
  • 北京
  • 2025年07月12日
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      311

    • 英文名

      BalbGen Blood DNA Kit

    • 保质期

      10天

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      室温(15~30℃

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    北京百奥莱博专业生产供应血液基因组DNA提取试剂盒 价格,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。


    名称:血液基因组DNA提取试剂盒 价格
    产地:国产|进口
    编号:WE0176
    英文名:BalbGen Blood DNA Kit
    品牌:百奥莱博
    规格:可处理50ml血液|可处理200ml血液
      本试剂盒提供了一种快速、灵活的方法,适用于新鲜或冷冻全血(用柠檬酸盐、EDTA或肝素等抗凝剂处理过的样品)提取总DNA,包括基因组DNA和线粒体DNA。本品可以灵活处理0.1-20ml的全血,采用非离心柱的方法,无需使用*酚、*仿等有机溶剂,有效去除蛋白、色素、脂类及其它抑制性杂质污染。整个过程在一个管中操作,减少了污染及样本混淆的风险。提取的DNA产量高、质量好,可直接用于PCR、荧光定量PCR、酶切和Southern Blot以及文库构建等实验。

    试剂盒组成

     
    组份 可处理50ml血液 可处理200ml血液
    Buffer FG1 2×65ml 2×260ml
    Buffer FG2 30ml 120ml
    Buffer GE 15ml 60ml
    蛋白酶K 3 mg 12.5mg
    蛋白酶K 储存液 1.25ml 1.25ml


    保存条件:Buffer FG1 2~8℃,其他组分室温(15~30℃)。

    产品特点
    1、纯度高:提取的基因组DNA可直接用于下游PCR、荧光定量PCR、酶切等各种实验。
    2、提取量大:可从0.1-20ml的全血中提取DNA,无需使用*酚、*仿等有机溶剂。
    3、兼容性强:适用于处理各种血液和细胞样本。

    自备试剂:异丙醇、70%乙醇

    实验前准备及重要注意事项/strong>:
    1、向蛋白酶K 中加入指定用量(0.3ml/1.25ml)的蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。
    2、所有离心操作均在室温下完成。
    3、血液样品反复冻融,会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。所得基因组DNA也应尽可能避免反复冻融,以免降解。如果提取冷冻血液的基因组DNA,建议37℃水浴,迅速解冻后再进行后续操作。
    4、血液样品的储存:
    1)短期保存:已加入抗凝剂的血液样品可在2~8℃储存最多10天,对于某些实验例 如Southern杂交等,需要得到完整全长的基因组DNA,请将血液样品在2~8℃储存不超过3天,此时基因组DNA的降解程度较轻。
    2)长期保存:已加入抗凝剂的血液请置于-70℃保存(如果提取的是高分子量的DNA,推荐使用EDTA作为抗凝剂)。

    操作步骤

    一、从100~900μl全血中提取基因组(以300μl血液处理量为例)
    1、取300μl全血于2ml离心管(自备)中,加入300μl(样本等体积)Buffer FG1,上下颠倒混匀5次,10000×g离心30秒,弃上清。
    2、再向离心管中加入450μl(1.5倍样本体积)Buffer FG1,涡旋震荡,使沉淀完全分散。10000g离心30秒,弃上清,并把离心管倒置于干净的吸水纸上,放置2分钟。
    注意:在极少情况下沉淀可能会松弛,所以要缓慢倒掉上清。将离心管倒置在吸水纸上,可以减少管壁上清的回流。
    3、按照附表配制Buffer FG2与蛋白酶K 的混合液(比例100:1)。
    注意:此混合液最好现用现配.井在配好后1小时之内用完。
    4、加入150μl的Buffer FG2与蛋白酶K 的混合液,立即涡旋混匀至溶液无团块。
    注意:
    1)如果有多个样品同时操作,加入Buffer FG2/蛋白酶K 混合液后立即涡旋震荡,不要等所有样品部加完后再震荡。
    2)通常涡旋震荡3-4次.毎次5秒,可以使沉淀充分悬浮,如果涡旋震荡后发现沉淀中含胶状物质可以再加入30μl的Buffer FG2/蛋白酶K 混合液,再次混旋混匀。
    5、65℃孵育10分钟,其间颠倒混匀数次。
    注意:如果样品颜色从红色变成橄榄绿说明蛋白消化完全。
    6、加入150μl导丙醇,上下颠倒彻底混匀直至出现丝状或簇状基因组DNA。
    注意:与异丙醇完全混合对于沉淀DNA非常重要。如果样品中白细胞含量少,可能看不到DNA,则至少上下频倒高心管20次确保沉淀完全。
    7、10000×g离心5分钟。
    注意:如果沉淀贴壁不牢,可以适当延长离心时间或増大离心力。
    8、弃上清,并把离心管倒置于干净的吸水纸上吸干。
    注意:少数时候沉淀可能贴壁不牢,注意不要吸弃沉淀。
    9、加入300μl的70%乙醇,涡旋震荡5秒,10000×g离心5分钟,弃上清。
    注意:如果沉淀贴壁不牢,可以适当延长离心时间或増大离心力。
    10、把离心管倒置于干净的吸水纸上5分钟,确保沉淀在管中 。
    注意:在管底可见白色的DNA沉淀,在极少情況下沉淀可能会松弛 ,所以要缓慢倒掉上清。
    11、空气干燥DNA沉淀直至所有的液体挥发干净(至少5分钟)。
    注意:乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、 PCR等)实验,但避免过度干操DNA沉淀,因过度干燥会使DNA难于溶解。
    12、加入200lμl的Buffer GE,低速涡旋5秒,65℃孵育1小时溶解DNA,期间轻弹数次助溶。-20℃保存DNA。
    注意:如果DNA没有完全溶解,可室温过夜。如果使用少量的FG3溶解DNA,建议延长孵育时间。

    二、从1~5ml全血中提取基因组(以3ml血液外理量为例)
    1、取3ml全血于15ml离心管(自备)中,加入3ml(样本等体积)Buffer FG1,上下颠倒混匀5次,2500×g离心5分钟,弃上清。
    2、再向离心管中加入4.5ml(1.5倍样本体积)Buffer FG1,涡旋震荡,使沉淀完全分散。2500×g离心5分钟,弃上清,并把离心管倒置于干净的吸水纸上,放置2分钟。
    注意:在极少情况下沉淀可能会松弛 ,所以要缓慢倒掉上清。将离心管倒置在吸水纸上,可以減少管壁上清的回流。
    3、按照附表配制缓冲液FG2与蛋白酶K 的混合液(比例100:1)。
    注意:此混合液最好现用现配,井在配好后1h之内用完。
    4、加入1.5ml Buffer FG2/蛋白酶K 混合液,立即涡旋混匀至溶液无团块。
    注意:
    1)如果有多个样品同时操作,加入Buffer FG2/蛋白酶K 混合液后立即涡旋振荡,不要等所有样品都加完后再震荡。
    2)通常涡旋震荡3-4次,毎次5秒可以使沉淀充分悬浮,如果涡旋震荡后发现沉淀中含胶状物质可以再加入300lμl的Buffer FG2/蛋白酶K 混合液,再次涡旋混匀。
    5、65℃孵育10~30分钟,其间颠倒混匀数次。
    注意:如果样品额色从红色变成橄榄绿说明蛋白消化完全。
    6、加入1.5ml导丙醇,上下颠倒彻底混匀直至看到DNA。
    注意:与异丙醇完全混合对于沉淀DNA非常重要。如果样品中白细胞含量少,可能看不到DNA,则至少上下颠倒离心管20次确保沉淀完全。
    7、2500×g离心5分钟。
    注意:如果沉淀贴壁不牢,可以造当延长离心时间或増大离心力。
    8、弃上清,并把离心管倒置于干净的吸水纸上吸干。
    注意:在管底可见自色的DNA沉淀,在极少情况下沉淀可能会松弛 ,所以要缓慢倒掉上清。
    9、加入1.5ml的70%乙醇,涡旋震荡5秒,2500×g离心5分钟,弃上清。
    注意:如果沉淀贴壁不牢.可以适当延长离心时间或増大离心力。
    10、把离心管倒置于干净的吸水纸上5分钟,确保沉淀在管中 。
    注意:在极少情况下沉淀可能会松弛,所以要缓慢倒掉上清。
    11、空气干燥DNA沉淀直至所有的液体挥发干净(至少5分钟)。
    注意:乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、 PCR等)实验,但避免过度干燥DNA沉淀,因过度干燥会使DNA难于溶解。
    12、加入300μl的Buffer GE,低速涡旋5秒,65℃孵育1小时溶解DNA,期间轻弹数次助溶。一20℃保存DNA。
    注意:如果DNA没有完全溶解,可室温过夜。如果使用少量的FG3溶解DNA,建议延长孵育时间。

    三、从6~20ml全血中提取基因组(以10ml血液处理量为例)
    1、取10ml全血于50ml离心管(自备)中,加入10ml Buffer FG1,上下颠倒混匀5次,2500×g离心5分钟。
    2、再向离心管中加入15ml Buffer FG1,涡旋震荡,使沉淀完全分散。2500×g离心5分钟,弃上清,并把离心管倒置于干净的吸水纸上,放置2分钟。
    注意:在极少情况下沉淀可能会松弛,所以要缓慢倒掉上清。
    3、按照附表配制缓冲液FG2与蛋白酶K 的混合液(比例100:1)。
    注意:此混合液最好现用现配,井在配好后1小时之内用完。
    4、加入5ml Buffer FG2/蛋白酶K 混合液,立即涡旋混匀至溶液无团块。
    注意:
    1)如果有多个样品同时操作,加入Buffer FG2/蛋白酶K 混合液后立即涡旋震荡,不要等所有样品都加完后再震荡。
    2)通常涡旋震荡3-4次,毎次5秒可以使沉淀充分悬浮,如果涡旋震荡后发现沉淀中含胶状物质可以再加入1ml BufferFG2/蛋白酶K 混合液,再次涡旋混匀。
    5、65℃孵育30分钟,其间颠倒混匀数次。
    注意:如果样品颜色从红色变成橄榄绿说明蛋白消化完全。
    6、加入5ml导丙醇,上下颠倒彻底混匀直至看到DNA。
    注意:与异丙醇完全混合对于沉淀DNA非常重要,应该至少上下颠倒离心管20次确保沉淀完全。
    7、2500×g离心5分钟。
    注意:如果沉淀贴壁不牢,可以适当延长离心时间或増大离心力。
    8、弃上清,并把离心管倒置于干净的吸水纸上吸干。
    注意:在管底可见白色的DNA沉淀,在极少情况下沉淀可能会松弛 ,所以要缓慢倒掉上清。
    9、加入5ml的70%乙醇,涡旋震荡5秒,2500×g离心5分钟,弃上清。
    注意:如果沉淀贴壁不牢,可以适当延长离心时间或増大离心力。
    10、把离心管倒置于干净的吸水纸上5分钟,确保沉淀在管中 。
    注意:在极少情况下沉淀可能会松驰 ,所以要缓慢倒掉上清。
    11、空气干燥DNA沉淀直至所有的液体挥发干净(至少5分钟)。
    注意:乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、 PCR等)实验,但避免过度干燥DNA沉淀,因过度干燥会使DNA难于溶解。
    12、加入1ml的Buffer GE,低速涡旋5秒,65℃孵育1小时溶解DNA,期间轻弹数次助溶。-20℃保存DNA。
    注意:如果DNA没有完全溶解.可室温过夜。如果使用少量的FG3溶解DNA,建议延长孵育时间。

    附表:不同体积血液所需各种缓冲液用量
    缓冲液 血液样品的体积(μl)
    100 300 1000 3000 5000 10000 20000
    Buffer FG1(μl) 250 750 2500 7500 12500 25000 50000
    Buffer FG2(μl) 50 150 500 1500 2500 5000 10000
    蛋白酶K(μl) 0.5 1.5 5 15 25 50 100
    异丙醇(μl) 50 150 500 1500 2500 5000 10000
    70%乙醇(μl) 50 150 500 1500 2500 5000 10000
    Buffer GE(μl) 100 200 200 300 500 1000 1000
    补加FG2和蛋白酶K 混合液 10 30 100 300 500 1000 1000


    储存条件:室温(15~30℃)。

    欲了解更多血液基因组DNA提取试剂盒 价格的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:

    ·TOP10感受态细胞
    编号:WE0251
    英文名称:TOP10 Competent Cell
    规格:100μl×10支
      本产品是大肠杆菌TOP10菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的热击转化。TOP10是一种常用于质粒克隆的菌株,其φ80lacZΔM15基因产物可与载体编码的β-半乳糖苷酶*基端实现α互补,可用于蓝白斑筛选。使用pUC19质粒检测,转化效率可达108,适用于高效的质粒DNA克隆并能保证高拷贝质粒的稳定复制。

    产品组成
    组份 0.1ml×10支
    TOP10 Competent Cell 10×100μl
    Control DNA pUC19,0.1ng/μl 10μl


    实验前准备及重要注意事项
    1、感受态细胞一定要用干冰运输。感受态细胞应在-80℃下保存,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。
    2、转化所有步骤均在无菌条件下操作。
    3、包装中有0.1ng/μl的pUC19DNA,供对照试验使用。

    使用方法
    1、取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl,可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
    2、待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
    3、42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
    4、向每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150 rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
    5、根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。
    注意:
    1)涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4000rpm,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
    2)新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
    3)涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

    储存条件:-80℃。


    血液基因组DNA提取试剂盒 价格关键词:血液基因组DNA提取试剂盒 ,BalbGen Blood DNA Kit,WE0176


    ·HRP标记抗c-Myc标签单克隆抗体
    编号:WE0333
    英文名称:HRP Conjugated Anti c-Myc Tag Mouse Monoclonal Antibody
    规格:20μl|100μl
    本抗体为经辣根过氧化物酶(HRP)直接标记的抗c-Myc标签鼠单克隆抗体,可高度特异识别重组蛋白C末端或N末端的c-Myc标签(EQKLISEEDL), 而不受邻近*基酸组成的影响,可用于检测c-Myc Tag融合蛋白。本产品经HRP直接标记,无需使用二抗,可直接用相应酶底物显色或化学发光法检测目的蛋白,减化了实验步骤,避免由二抗交叉反应引起的非特异性条带。

    抗体类型:鼠IgG
    免疫原:人工合成多肽
    标记物:HRP
    应用范围:WB(1:1000-5000)、ELISA(1:1000-20000)

    ·2×Bes Taq MasterMix(含染料)
    编号:WE0104
    英文名称:2×Bes Taq MasterMix(With Dye)
    规格:1ml|5ml|25ml
      本品是由Bes Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系,浓度为2×。Es Taq DNA Polymerase具有扩增效率高、错配率低的优良性能。独创的MasterMix配方使整个反应体系非常稳定,超过98%的PCR扩增能一次成功,同时复杂模板也能得到有效扩增,并可最大限度地减少人为误差和污染。本产品已加入染料(蓝色),反应结束后可直接进行电泳检测,无需再使用上样缓冲液。扩增得到的PCR产物3"端附有一个“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。主要适用于常规PCR反应和对高保真性有要求的基因克隆等实验。

    产品组成
    组份 1ml 5ml 25ml
    2×Bes Taq MasterMix(With Dye) 1ml 5×1ml 5×5ml
    ddH2O 1ml 5×1ml 5×5ml

    注意:2×Bes Taq MasterMix含有Bes Taq DNA Polymerase,3 mM MgCl2 和400μM each dNTP。

    质量控制
    1、经检验无外源核酸酶活性;
    2、PCR方法检测无宿主残余DNA;
    3、能有效地扩增多种基因组中的单拷贝基因。

    使用方法
    以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

    1、PCR反应体系
    试剂 50μl反应体系 终浓度
    2×Bes Taq MasterMix(With Dye) 25μl
    Forward Primer,10μM 2μl 0.4μM
    Reverse Primer,10μM 2μl 0.4μM
    Template DNA <0.5μg <0.5μg/50μl
    ddH2O up to 50μl  

    注意:引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。

    2、PCR反应条件
    步骤 温度 时间 循环数
    预变性 94℃ 2 min  
    变性 94℃ 30 s 25-35 个循环
    退火 55-65℃ 30 s
    延伸 72℃ 30 s
    终延伸 72℃ 2 min  


    注意:
    1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
    2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,Bes Taq DNA Polymerase的扩增效率为2 kb/min。
    3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。

    储存条件:-20℃,避免反复冻融。


    血液基因组DNA提取试剂盒 价格关键词:血液基因组DNA提取试剂盒 ,BalbGen Blood DNA Kit,WE0176

    BL0372 Glass beads acid-Washed  玻璃珠
    甲*(代"酚")红指示剂   100ml
    85-86-9 苏丹Ⅲ
    1405-41-0 硫*(代"酸")庆大霉素 Gentamycin Sulfate
    ARB11122 人肺炎支原体抗体(MP-Ab)酶免分析 Human mycoplasma pneumoniae antibody,mp-ab ELISA KIT
    ARB10260 人二磷酸尿核苷葡糖醛酸基转移酶2家族肽B4(UGT2B4)Elisa定量检测 Human uridine dipho-sphate glucuronosyltransferase 2 family polyPeptide b4,ugt2b4 ELISA KIT
    CYB164045 兔抗生物素-HRP(1:500~1000)
    ARB14026 植物赤霉素(GA)尿液中含量检测 Plant gibberellic acid,ga ELISA KIT
    ACD抗凝剂(B)   100ml
    60-18-4 L-Tyrosine  L-酪*酸
    无机焦磷酸化酶 Sorbic acid 9024-82-2
    F030840 BIOTIN标记兔抗驴IgG抗体 Polyclonal Rabbit Anti-Donkey IgG*BIOTIN
    RPMI 1640 Medium   500ml
    ARB13286 小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)含量检测 Mouse coagulation factor Ⅱ,fⅡ ELISA KIT

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