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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
416
- 英文名:
DNA Product Quick Clean-up Kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
室温(15~30℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括北京DNA产物快速纯化试剂盒厂家价格在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:北京DNA产物快速纯化试剂盒厂家价格
英文名:DNA Product Quick Clean-up Kit
产地:国产|进口
编号:WE0170
品牌:百奥莱博
规格:50次|200次
本试剂盒采用新型硅基质膜技术和试剂配方,通过离心吸附柱快速简单的结合-洗涤-洗脱三步即可从PCR产物或酶反应液(酶切,连接,探针标记等)中纯化回收100 bp-10 kb的DNA片段,每个吸附柱最高可吸附10μg的DNA,同时最大限度的去除引物、寡核苷酸、酶等杂质。纯化回收的DNA纯度及浓度高,完整性好,回收率高,可直接用于测序、连接和转化、标记、体外转录等分子生物学实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 | 200次 |
| Buffer PB | 30ml | 120ml |
| Buffer PS | 15ml | 60ml |
| Buffer PW(浓缩) | 6ml | 25ml |
| Buffer EB | 10ml | 30ml |
| 离心吸附柱DM及收集管 | 50套 | 200套 |
产品特点
1、快速简单:操作步骤少,15分钟完成,同时可处理多个样品,节省时间。
2、回收率高:新型硅基质膜技术和试剂配方保证每次最大量回收到纯度极高的目的DNA。
3、处理量大:每个离心吸附柱每次最多可吸附的DNA 量为10μg。
自备试剂:无水乙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、所有组分可在干燥、室温(15~30℃)环境稳定保存1年,更长时间保存可置于2- 8℃。当溶液低温保存时,使用前需在室温中放置一段时间,恢复至室温后使用。
2、本试剂盒可无选择性回收溶液中所有DNA片段,如需选择性回收特定片段,同时去除其他不同大小片段,请选择我公司的胶回收试剂盒(WE0168)
3、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer PW中加入无水乙醇。
4、使用前请检查Buffer PB是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀现象,可在37℃水浴几分钟,即可恢复澄清。
5、回收效率与初始DNA量和洗脱体积有关,初始量越少,洗脱体积越少,回收率越低。
6、所有离心步骤均可室温下进行。
操作步骤:
1、估计DNA反应液的体积,加入5倍体积的 Buffer PB,充分混匀(无需去除石蜡油或矿物油)。
注意:
1)如DNA反应体系为50μl(不包括石蜡油体积),则加入250μl Buffer PB。
2)在加入Buffer PB后检测溶液的pH值,若pH值>7.5,可向其中加入10-30μl的3 M醋酸*(pH5.0),从而将pH值调到5-7。
2、柱平衡:向已装入收集管中的吸附柱DM中加入200μl Buffer PS,13000rpm(~~~16200×g)离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
3、将步骤1中所得溶液加入到已装入收集管的吸附柱中,室温放置1分钟,13000rpm离心30-60 s,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
注意:吸附柱容积为750μl,若样品体积大于750μl可分批加入 。
4、向吸附柱中加入500μl Buffer PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)13000rpm离心30-60 s,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
注意:如果纯化的DNA用于盐敏感实验(例如平末端连接实验或直接测序),建议加入Buffer PW后静置2-5分钟再离心。
5、13000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。为确保下游实验不受残留乙醇的影响,建议将吸附柱开盖,置于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的乙醇。
6、将吸附柱放到一个新离心管(自备)中,向吸附膜中间位置悬空滴加30-50μl Buffer EB,室温放置1分钟。13000rpm离心1分钟,收集DNA溶液。-20℃保存DNA。
注意:
1)洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液,应保证其pH值在7.0-8.5之间(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)。
2)为了提高DNA的回收量,可将离心得到的溶液重新加到吸附柱中,室温放置2分钟,13000rpm离心1分钟。
3)洗脱体积不应小于30μl,体积过少会影响回收效率。
4)回收>10 kb的DNA片段时,Buffer EB应在50℃水浴中预热,适当延长吸附和洗脱时间,可增加回收效率。
储存条件:室温(15~30℃)。
更多有关北京DNA产物快速纯化试剂盒厂家价格的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·高纯质粒大提试剂盒
编号:WE0164
英文名称:PlaPure Maxi Extraction Kit
规格:10次
本试剂盒提供一种简单、快捷、高效的提取质粒的方法,在碱裂解法裂解细胞的基础上,采用独特的硅基质膜吸附技术和试剂配方,通过离心吸附柱在高盐状态下高效专一的结合溶液中的质粒DNA,经过两步洗涤,一步洗脱,最大限度的去除蛋白质、基因组、RNA和其他杂质。得到的DNA可直接用于PCR、酶切、测序、连接等生物学实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| Buffer P1 | 125ml |
| Buffer P2 | 125ml |
| Buffer P3 | 125ml |
| Buffer PB | 30ml |
| Buffer PW(浓缩液) | 50ml |
| Buffer EB | 30ml |
| RNase A(10 mg/ml) | 2ml |
| 吸附柱DQ及收集管 | 10套 |
| 离心管(50ml) | 10个 |
自备试剂:无水乙醇,异丙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、所有组分可在干燥、室温(15~30℃)环境稳定保存1年,更长时间保存可置于2~8℃,加入RNase A的Buffer P1 置于2~8℃可稳定保存6个月。
2、第一次使用前,将RNase A溶液全部加入到Buffer P1 中,混匀,置于2–8℃保存,使用前需在室温中放置一段时间,恢复至室温后使用。
3、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer PW中加入无水乙醇。
4、使用前请先检查Buffer P2 、Buffer P3、Buffer PB是否出现结晶或沉淀,如有结晶或沉淀现象,可在37℃水浴几分钟,即可恢复澄清(请勿剧烈晃动Buffer P2)。
5、注意不要直接接触Buffer P2 和Buffer P3,使用后应立即盖紧盖子。
6、提取质粒的量和纯度与细菌培养浓度、菌株种类、质粒大小、质粒拷贝数等因素有关。
7、所有离心步骤均可在室温下进行。
操作步骤:
1、取150ml过夜培养的菌液加入离心管(自备)中,12000×g离心3分钟收集细菌,尽量吸弃全部上清。
注意:质粒拷贝数较低或>10 kb时,可以使用更多菌液通过二次离心将菌体沉淀收集到同一个离心管中,同时后续所加试剂Buffer P1、P2及P3的量需按比例加倍。所加试剂的量必须能够充分裂解菌体,菌体过多、裂解不充分都会降低质粒的提取效率。
2、向留有菌体沉淀的离心管中加入12ml Buffer P1(请先检查是否已加入RNase A),使用移液器或涡旋振荡器充分混匀,悬浮细菌沉淀。
注意:如果菌块未彻底混匀,将会影响裂解效果,使提取量和纯度偏低。
3、向离心管中加入12ml Buffer P2,温和地上下颠倒混匀6-8次,充分混匀使菌体裂解,室温放置3-5分钟。此时溶液应变得清亮粘稠。
注意:温和混匀,不要剧烈震荡,以免打断基因组DNA,造成提取的质粒中混有基因组DNA片段。并且此步骤所用时间应不超过5分钟,避免质粒受到破坏。
4、向离心管中加入12ml Buffer P3,立即上下颠倒混匀6-8次,充分混匀,此时出现白色絮状沉淀,室温放置5分钟。12000×g离心10分钟。
注意:Buffer P3 加入后应立即混匀,避免产生局部沉淀。
5、取上清加入新的离心管(自备)中,向上清中加入11ml异丙醇,上下颠倒混匀。
6、将步骤5中的混合溶液转移到已装入收集管的吸附柱DQ中。12000×g离心2分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:吸附柱的最大容积为15ml,所以第5步中所得溶液分多次过柱。如果离心机转子倾角较大时,建议加入吸附柱的溶液体积不超过10ml,以防发生漏液现象。
7、向吸附柱中加入2.5ml Buffer PB,12000×g离心2分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
8、向吸附柱中加入10ml Buffer PW(请先检查是否已加入无水乙醇),12000×g离心2分钟,倒掉收集管中的废液。
9、重复步骤8。
10、将吸附柱重新放回收集管中,12000×g离心5分钟,倒掉废液,将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干吸附柱中残余的漂洗液。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
11、将吸附柱置于一个新的收集管中,向吸附膜的中间部位加入1-3ml Buffer EB,室温放置2-5分钟,12000×g离心5分钟,将质粒溶液收集到离心管中。-20℃保存质粒。
注意:
1)为了增加质粒的回收效率,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,室温放置2-5分钟,12000×g离心5分钟,将质粒溶液收集到离心管中。
2)洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液,应保证其pH值在7.0-8.5范围内(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0会降低洗脱效率。
3)质粒拷贝数较低或>10 kb时,Buffer EB在65-70℃水浴预热,适当延长吸附和洗脱的时间,可以增加提取效率。
储存条件:室温(15~30℃)
北京DNA产物快速纯化试剂盒厂家价格关键词:DNA产物快速纯化试剂盒,WE0170,DNA Product Quick Clean-up Kit
·SDS-PAGE上样缓冲液(还原,5×)
编号:WE0288
英文名称:SDS-PAGE Loading Buffer(Reducing, 5×)
规格:5×2ml
SDS-PAGE上样缓冲液(还原,5×)是以*酚蓝为染料,5倍浓缩的SDS-PAGE凝胶电泳上样缓冲液,应用于还原型SDS-PAGE的蛋白样品制备和上样。该缓冲液中含有DTT,可使蛋白质分子的链内二硫键和链间二硫键断裂,通过二硫键连接的各蛋白亚单位彼此分离,经考马斯亮蓝染色以后在电泳凝胶上显现清晰蛋白条带。
注意事项:
1、加样前在室温或37-40℃数分钟解冻后轻轻摇匀,以确保溶液混合均匀。
2、本试剂含有DTT,操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。
3、本产品仅用于科研,不能用于人体实验或人体治疗。
操作步骤:
1、将SDS-PAGE上样缓冲液(还原,5×)与蛋白样品按照1:4的比例混匀。
2、将蛋白样品置于沸水浴中加热3-5分钟。
3、待蛋白样品充分变性后冷却至室温,以小于3000 rpm的条件离心30秒。
4、离心后,以取适量上清,直接加入SDS-PAGE凝胶加样孔内, 进行常规电泳。
储存条件:-20℃
北京DNA产物快速纯化试剂盒厂家价格关键词:DNA产物快速纯化试剂盒,WE0170,DNA Product Quick Clean-up Kit
D-天冬*酸 Carbonate Buffer solution 1783-96-6
BTN131092 生物素 Biotin
BL0621 谷胱甘肽-琼脂糖凝胶4B Glutathione Sepharose 4B
DNA快速提取检测试剂盒
D-半乳糖醛酸 TES 91510-62-2
BFD003 猪口蹄疫0型病毒抗体检测试剂盒
ARB12239 大鼠血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)酶联免疫定量检测 Rat vascular endothelial cell growth factor d,vegf-d ELISA KIT
BL0768 原位细胞凋亡试剂盒
BTN130408 eTS抑制性差减杂交PCR试剂盒 SSH-PCR Kit
50-23-7
BFD033 喹诺酮类(QNS)快速检测试剂盒
四*硼* DL-Proline 3244-41-5
Tris抗原修复液(10×,pH10.0) 100ml
ARB12055 大鼠干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)elisa测定使用说明书 Rat stem cell factor/mast cell growth factor,scf/mgf ELISA KIT
赤霉素GA3 Tartrazine 77-06-5
PY01-051 麦芽浸膏 100克
植酸* BCA 14306-25-3
钨酸* PNPG 7790-60-5
BL1088 无噬菌体,低内毒素超级新生牛血清
SJ0288 Fluorescein 荧光素(荧光黄)
ARB10772 人抗α干扰素抗体(IFNα-Ab)检测服务 Human interferonαantibody,ifnα-ab ELISA KIT
我公司正在打折促销DNA纯化全系列产品,恭候您的咨询选购北京DNA产物快速纯化试剂盒厂家价格。
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文献和实验盒包括柱离心式DNA胶回收及PCR产物快速纯化试剂盒、柱离心式质粒小量快速抽提试剂盒、柱离心式高纯质粒小量快速抽提试剂盒、 柱离心式去内毒素超纯质粒小量快速抽提试剂盒、 质粒抽提、DNA胶回收、PCR产物纯化柱离心式多用途小量纯化试剂盒、柱离心式质粒中量抽提试剂盒 、柱离心式高纯度质粒中量抽提试剂盒、 柱离心式去内毒素超纯质粒中量抽提试剂盒 、核酸纯化小柱(质粒小抽、胶回收)、核酸纯化大柱(质粒中抽、大抽)等10个产品。 现因公司产品结构调整,转让该系列试剂盒的配方、生产工艺、生产设备。包教
洗脱液,接着按照3.2b进行)2a.加入2ulRNaseA(0.5mg/ml).加热至65°C摇晃4-5小时或者过夜以逆转交联。DNA采用PCR纯化试剂盒中厂家说明进行纯化。样品冻存于-20°C.样品之所以加入RnaseA是因为高浓度RNA会在使用PCR纯化试剂盒时干扰DNA的纯化。而纯化柱子的饱和度是既定的。2b.加入5ul蛋白酶K(20mg/ml).加热至65°C摇晃4-5小时或者过夜以逆转交联。采用酚/氯仿抽提的DNA使用乙醇沉淀于10ul的糖原(5mg/ml).中。100ul水重悬浮。样品
过的 DNA 聚合酶增强了与模板的亲和度,其灵敏度更高,因而所需的模板量少。过低的模板量会减少 PCR 的产量,过高的模板量可能造成非特异性扩增,所以 DNA 模板量的优化尤为重要。 除了 gDNA、cDNA 和质粒 DNA,PCR 产物也可作为模板以获得更高的产量。但 PCR 产物中存在的残余反应组分(如引物、dNTP、盐和副产物)可能会影响下一次的 PCR 反应。所以推荐在下一次 PCR 前使用 PCR 产物纯化试剂盒将 PCR 产物先进行纯化。 【DNA 聚合酶】 DNA 聚合酶是PCR扩增中最关键
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