北京现货蛋白酶抑制剂混合物优惠

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖北京现货蛋白酶抑制剂混合物优惠在内的分子生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：北京现货蛋白酶抑制剂混合物优惠
英文名：Protease Inhibitor Cocktail(100×)
品牌：百奥莱博
规格：1ml
  本品为蛋白酶抑制剂的混合物，使用时取出实验所需蛋白抽提试剂进行预冷，按照1:99比例加入Protease Inhibitor Cocktail(例如990μl抽提试剂中加入10μl Protease Inhibitor Cocktail)，使其在抽提试剂中成1×工作液。

注意事项：
1．蛋白酶抑制剂严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤，吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。
2．操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。

储存条件：-20℃


关于北京现货蛋白酶抑制剂混合物优惠的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·抗VSV-G标签单克隆抗体
编号：WE0340
英文名称：Anti VSV-G-Tag Mouse Monoclonal Antibody
规格：20μl
疱疹性口炎病毒(VSV)属于弹状病毒家族，在出芽过程中从宿主细胞的细胞膜中释放出来，糖蛋白(VSV-G)包含一个区域，该区域的细胞膜外近端是作为VSV病毒出芽所必需的结构。VSV-G标签抗体能识别C末端，内部以及N末端的VSV-G标签(YTDIEMNRLGK)融合蛋白。

抗体类型：鼠单克隆抗体IgG1
免疫原：人工合成多肽(YTDIEMNRLGK)
应用范围：WB(1：500-5000)、ELISA(需摸索最佳稀释度)

·HRP标记驴抗兔IgG(H+L)
编号：WE0366
英文名称：Donkey Anti- Rabbit IgG,Peroxidase Conjugated
规格：100μl
本产品为过氧化物酶标记的经亲和纯化的驴抗体，特异识别兔IgG，检测灵敏度高，本底低，可用于Western Blot、ELISA 和免疫组化检测。酶标记抗体，是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学各个分支学科中的免疫化学制剂，具有特异、敏感和安全的特点。

免疫原：兔IgG
缓冲液：0.01M PBS，50%甘油，pH7.6
稳定剂：15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂：无(叠氮*是HRP抑制剂，抗体稀释液中请避免使用叠氮*作为防腐剂)
应用范围：
WB ECL发光检测(1：10000-200000)
ELISA(1：5000-100000)
WB 显色检测(1：5000-100000)
Immunohisto/cytochemistry(1：500-5000)


北京现货蛋白酶抑制剂混合物优惠关键词：蛋白酶抑制剂混合物,Protease Inhibitor Cocktail(100×),WE0259


·抗β-Actin单克隆抗体
编号：WE0354
英文名称：Anti β-Actin Mouse Monoclonal Antibody
规格：100μl
β-Actin是是横纹肌肌纤维中的一种主要蛋白质成分，也是肌肉细丝及细胞骨架微丝的主要成分。具有收缩功能，分布广泛，分子量为43 kDa，具有高度保守性，在细胞中的表达相对稳定，因此它常被用于校正系统的内参。

抗体类型：鼠单克隆抗体IgG2b
免疫原：β-Actin N末端多肽
应用范围：WB(1：500-5000)
应用种属：人，大鼠，小鼠，兔，猪，鸡，绵羊

·Taq DNA Polymerase
编号：WE0101
英文名称：Taq DNA Polymerase
规格：500U|2500U|10000U
  Taq DNA Polymerase是通过大肠杆菌表达纯化的重组酶。其基因来源于Thermus aquaticus polymerase。该蛋白分子量为94 kDa，具有5"→3"DNA聚合酶活性和5"→3"外切核酸酶活性，无3"→5"外切核酸酶活性，扩增得到的PCR产物3"端附有一个“A”碱基，因此可直接用于T/A克隆。本产品具有延伸速度快、扩增效率高的特点，主要适用于PCR法扩增DNA片段、DNA序列测定等实验。

产品组成：

 

组份	500 U	2500 U	10000 U
Taq DNA Polymerase(5 U/μl)	100μl	5×100μl	2×1ml
10×PCR Buffer	1.8ml	5×1.8ml	8×5ml

活性定义：用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在74℃，30分钟内，将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。

质量控制：
1、经过多次柱纯化，SDS-PAGE检测其纯度大于99%；
2、经检测无外源核酸酶活性；
3、PCR方法检测无宿主残余DNA；
4、能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因；
5、室温存放一个月，无明显活性改变。

使用方法：
以下举例为以人基因组DNA为模板，扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系：
 

试剂	50μl反应体系	终浓度
10×PCR Buffer	5μl	1×
dNTP Mix，10 mM each	1μl	200μM each
Forward Primer，10μM	2μl	0.4μM
Reverse Primer，10μM	2μl	0.4μM
Template DNA	<0.5μg	<0.5μg/50μl
Taq DNA Polymerase	0.25-0.5μl	1.25-2.5 U/50μl
ddH2O	up to 50μl

注意：引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

2、PCR反应条件:
 

步骤	温度	时间	循环数
预变性	94℃	2min
变性	94℃	30s	25-35个循环
退火	55-65℃	30s
延伸	72℃	30s
终延伸	72℃	2min

注意：
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定，本产品Taq DNA Polymerase的扩增效率为2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。


北京现货蛋白酶抑制剂混合物优惠关键词：蛋白酶抑制剂混合物,Protease Inhibitor Cocktail(100×),WE0259


·寡聚核苷酸Oligo(dT)15
编号：WE0161
英文名称：Oligo(dT)15
规格：50μl
  本产品是15个胸腺嘧啶组成的寡聚核苷酸，浓度为100μM，由mRNA合成cDNA时作为反转录引物使用。

质量控制：
1、HPLC分析确认纯度。
2、1 nmol 的本制品和2 ug 的5S rRNA，在37℃条件下反应24小时，RNA的电泳图像不发生改变。

使用方法：
使用时直接将Oligo(dT)15直接加入到反应体系中即可，建议每20μl体系中加入Oligo(dT)15 1μl。

储存条件：-20℃。

·细菌蛋白抽提试剂盒
编号：WE0261
英文名称：Bacterial Protein Extraction Kit
规格：100次
  本试剂盒使用温和的非离子型去污剂，适用于大肠杆菌表达的重组蛋白及转染昆虫细胞的蛋白提取。提取过程中不需进行超声破碎，有效避免了外源蛋白的污染。细菌蛋白抽提试剂盒在抽提试剂的基础上添加了溶菌酶、DNase I和蛋白酶抑制剂混合物，可提高蛋白提取效率并减轻因DNA引起的粘稠现象，有效避免蛋白降解。所提取的蛋白保持了生物学活性，可进行IP，Western Blot，蛋白纯化等下游操作。

试剂盒组成：

组份	100次
Bacterial Protein Extraction Reagent	100ml
Protease Inhibitor Cocktail	1ml
Lysozyme(50 mg/ml)	200μl
DNaseⅠ(1000U/ml)	100μl

保存条件：Lysozyme、DNaseⅠ、Protease Inhibitor Cocktail：-20℃，其它组分：室温

注意事项：
1、本产品适用于从新鲜或冻存细菌和昆虫细胞中提取蛋白。
2、本品采用Tris缓冲系统，蛋白提取后的纯化操作，请使用相同的缓冲系统。
3、使用本产品获得的蛋白裂解液，可用BCA或Bradford法进行蛋白定量。
4、对于特殊的菌株，如果抽提效果不理想，可在抽提蛋白前冰冻样品。
5、根据具体情况，可在本产品中加入蛋白酶抑制剂、盐、螯合剂、还原剂等。

使用方法：

细菌可溶性蛋白提取
1、5000×g离心10分钟，收集菌体。
2、可选步骤：每1ml Bacterial Protein Extraction Reagent中加入1μl DNase I(1000U/ml)、2μl Lysozyme(50 mg/ml)和10μl Protease Inhibitor Cocktail，涡旋震荡混匀。
3、按照每克菌体沉淀加入20ml Bacterial Protein Extraction Reagent的比例，向菌体沉淀中加入抽提液，充分涡旋或用移液器上下吹打直至菌体完全重悬。
4、重悬后，室温孵育10-15分钟(放置时间应根据细胞类型不同进行调整)。
5、15000×g离心5分钟。
6、转移上清至新的离心管中(上清中即为可溶性蛋白)，进行蛋白定量及下游实验。
注意：如目的蛋白以包涵体形式存在，可使用包涵体蛋白溶解液进行溶解或优化表达条件增加可溶性蛋白的表达。

昆虫细胞蛋白提取
1、低速离心收集细胞。每1ml Bacterial Protein Extraction Reagent中加入10μl Protease Inhibitor Cocktail即为1×工作液。
2、称量细胞湿重，按10ml/g的量加入1×工作液。
3、重悬后，冰上孵育20分钟(冰上放置时间应根据细胞类型不同进行调整)。
4、15000×g离心15分钟，分离可溶性蛋白。

常见问题分析
 

问题	可能原因	解决方法
目的蛋白不溶	目的蛋白表达为包涵体	优化表达条件或使用包涵体蛋白溶解液
		在蛋白抽提试剂中加入Lysozyme 和DNase I
加入Lysozyme 后目的 蛋白仍没有提取出来	温度过低	将使用试剂恢复至室温
	Lysozyme 活性降低或失活	加入更多的Lysozyme 或更换新的酶
提取物粘度高	DNase I 活性降低或失活	加入更多的DNase I 或更换新的DNase I
		将*离子的终浓度增加至2 mM
蛋白抽提后仍有大 部分蛋白存在于沉淀中	蛋白量过大	加入Lysozyme及DNase I
蛋白抽提试剂有沉底析出	温度过低	将蛋白抽提试剂恢复至室温

储存条件：-20℃

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