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WE0202型新型植物RNA提取试剂盒(含DNase I)价

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  • ¥110 - 1850
  • 百奥莱博
  • WE0202-KED
  • 北京
  • 2025年07月09日
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    • 详细信息
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      594

    • 英文名

      RNAnt RNA Extraction Kit(DNase I)

    • 保质期

      1个月

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      2~8℃

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    WE0202型新型植物RNA提取试剂盒(含DNase I)价格厂家的品牌:百奥莱博,是优质的RNA纯化产品,用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多新型植物RNA提取试剂盒(含DNase I)等RNA纯化产品请联*(代"系")我司咨询订购。


    名称:WE0202型新型植物RNA提取试剂盒(含DNase I)价格厂家
    品牌:百奥莱博
    规格:50次
    产地:国产|进口
    编号:WE0202
      本试剂盒适用于从多种植物中提取RNA,即便是从多糖多酚含量丰富的植物中也能成功提取高质量的RNA,如水稻叶片、小麦叶片、玉米叶片、烟草叶、松针、银杏叶、杨树叶、石榴叶、冬青叶、苹果、桃、梨、西红柿、樱桃、杏、香蕉、葡萄、枇杷、桂圆果皮、桂圆果肉、荔枝果皮、荔枝果肉、大豆、花生、玉米、马铃薯块茎、月季花瓣、石榴花瓣,香菇、平菇等样本。独特的裂解液配方,可使细胞中的RNA酶迅速灭活,有效去除多糖多酚对RNA提取的影响,无需*酚、*仿等试剂,同时采用硅基质膜吸附RNA进行纯化,提取的总RNA纯度高,无基因组、蛋白质和其它杂质的污染,可用于Real Time RT-PCR、RT-PCR 、Northern Blot、Dot Blot、和体外翻译等多种下游实验。

    试剂盒组成

     
    组份 50次
    DNase I 1000 U
    10×Reaction Buffer 1000μl
    Buffer RLS 40ml
    Buffer RW1 40ml
    Buffer RW2(浓缩液) 11ml
    RNase-Free Water 10ml
    过滤柱FS及收集管 50套
    吸附柱RM及收集管 50套
    RNase-Free离心管(1.5ml) 50个

    保存条件:DNase I及10×Reaction Buffer -20℃保存,其它组分室温(15~30℃)。

    自备试剂:β-巯基乙醇、无水乙醇(新开封或提取RNA专用)

    产品特点
    1、适用范围广:可从各种植物中提取总RNA,即便是多糖多酚含量丰富的植物也能成功提取。
    2、纯度高:彻底去除污染物及下游反应抑制物,提取的RNA适合于多种下游应用。
    3、成功提取的样本:水稻叶片、小麦叶片、苹果、桃、梨、西红柿、樱桃、杏、香蕉、葡萄、桂圆果皮、桂圆果肉、荔枝果皮、荔枝果肉、黄豆、花生、马铃薯块茎、松针、银杏叶、杨树叶、冬青叶、月季等样本。

    RNA得率:
    植物样本(100mg) 总RNA量(μg)
    拟南芥荚果 ~50
    大豆 ~55
    玉米叶片 ~55


    实验前准备及重要注意事项/strong>:
    1、预防RNase污染,应注意以下几方面:
    ① 使用无RNase的塑料制品和枪头。
    ② 操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。
    2、提取的样品避免反复冻融,否则影响RNA提取得率和质量。
    3、Buffer RLS如果产生沉淀,请加热使其溶解后室温放置。
    4、Buffer RLS在使用前请加入β-巯基乙醇,1ml Buffer RLS加20μl β-巯基乙醇。加入β-巯基乙醇的Buffer RLS室温可保存1个月。
    5、第一次使用Buffer RW2前应按照试剂瓶标签的说明加入无水乙醇。

    操作步骤
    1、匀浆处理:取50-100mg植物组织在液氮中迅速研磨成粉末,加入500μl Buffer RLS(使用前请先检查是否加入β-巯基乙醇),立即涡旋剧烈震荡混匀。
    注意:对于含水量极其丰富的材料,如西瓜果肉,西红柿,梨果肉等,可以适当多加入些材料,最多可增加至200mg;对于富含淀粉的样本或成熟叶片,可适当增加Buffer RLS的用量,最多可增加至700μl。
    2、4℃ 12000rpm(~~13400×g)离心2分钟。
    3、将上清液转入已装入收集管的过滤柱中,4℃ 12000rpm离心1分钟,小心吸取收集管中的上清并转移至新的RNase-Free 离心管(自备)中,枪头尽量避免接触收集管中的细胞碎片沉淀。
    4、缓慢加入0.5倍上清体积的无水乙醇,混匀(此时可能会出现沉淀),将得到的溶液和沉淀一起转入已装入收集管的吸附柱中,若一次不能将全部溶液加入吸附柱中,请分两次转入。4℃ 12000rpm离心1分钟,弃废液,将吸附柱重新放回收集管中。
    5、向吸附柱RM中加入350μl Buffer RW1,4℃ 12000rpm离心1分钟,弃废液,将吸附柱重新放回收集管中。
    6、配制DNase I 混合液:取52μl RNase-Free Water,向其中加入8μl 10×Reaction Buffer和20μl DNase I(1 U/μl),混匀, 配制成终体积为80μl的反应液。
    7、向吸附柱中直接加入80μl DNase I 混合液,20-30℃孵育15分钟。
    8、向吸附柱RM中加入350μl Buffer RW1,4℃ 12000rpm离心1分钟,弃废液,将吸附柱重新放回收集管中。
    9、向吸附柱RM中加入500μl Buffer RW2(使用前检查是否加入无水乙醇), 4℃ 12000rpm离心1 分钟,弃废液,将吸附柱重新放回收集管中。
    10、重复步骤9。
    11、4℃ 12000rpm离心2分钟。
    注意:这一步的目的是将吸附柱中残余乙醇去除,乙醇残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
    12、将吸附柱RM装入新的RNase-Free Centrifuge Tubes(1.5ml)中,向吸附膜的中间部位悬空滴加30-50μl RNase-Free Water,室温放置2分钟,4℃ 12000rpm离心1分钟,得到的RNA溶液保存在-70℃,防止降解。
    注意:
    ① RNase-Free Water体积不应小于30μl,体积过小影响回收率。
    ② 如果要提高RNA的产量,可用30-50μl新的RNase-Free Water重复步骤12。
    ③ 如果要提高RNA浓度,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,重复步骤12。

    储存条件:2~8℃。

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    ·1.5 M Tris-HCl缓冲液(pH8.8)
    编号:WE0284
    英文名称:1.5 M Tris-HCl(pH8.8)
    规格:500ml

    ·Taq DNA Polymerase
    编号:WE0101
    英文名称:Taq DNA Polymerase
    规格:500U|2500U|10000U
      Taq DNA Polymerase是通过大肠杆菌表达纯化的重组酶。其基因来源于Thermus aquaticus polymerase。该蛋白分子量为94 kDa,具有5"→3"DNA聚合酶活性和5"→3"外切核酸酶活性,无3"→5"外切核酸酶活性,扩增得到的PCR产物3"端附有一个“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。本产品具有延伸速度快、扩增效率高的特点,主要适用于PCR法扩增DNA片段、DNA序列测定等实验。

    产品组成
    组份 500 U 2500 U 10000 U
    Taq DNA Polymerase(5 U/μl) 100μl 5×100μl 2×1ml
    10×PCR Buffer 1.8ml 5×1.8ml 8×5ml


    活性定义:用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74℃,30分钟内,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。

    质量控制
    1、经过多次柱纯化,SDS-PAGE检测其纯度大于99%;
    2、经检测无外源核酸酶活性;
    3、PCR方法检测无宿主残余DNA;
    4、能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因;
    5、室温存放一个月,无明显活性改变。

    使用方法
    以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

    1、PCR反应体系:

     
    试剂 50μl反应体系 终浓度
    10×PCR Buffer 5μl
    dNTP Mix,10 mM each 1μl 200μM each
    Forward Primer,10μM 2μl 0.4μM
    Reverse Primer,10μM 2μl 0.4μM
    Template DNA <0.5μg <0.5μg/50μl
    Taq DNA Polymerase 0.25-0.5μl 1.25-2.5 U/50μl
    ddH2O up to 50μl  

    注意:引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。

    2、PCR反应条件:

     
    步骤 温度 时间 循环数
    预变性 94℃ 2min  
    变性 94℃ 30s 25-35个循环
    退火 55-65℃ 30s
    延伸 72℃ 30s
    终延伸 72℃ 2min  


    注意:
    1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
    2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,本产品Taq DNA Polymerase的扩增效率为2 kb/min。
    3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。

    储存条件:-20℃,避免反复冻融。


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    ·RRX标记山羊抗兔IgG(H+L)
    编号:WE0382
    英文名称:Goat Anti-Rabbit IgG, Rhodanmine Red-X Conjugated
    规格:100μl
    本产品为RRX标记的经抗原亲和纯化的山羊抗体,特异识别兔IgG。使用本产品检测灵敏度高,本底低,对其他种属IgG无明显交叉反应,常用于免疫荧光和流式细胞等标记检测。Rhodamine Red-X(RRX)是近年新开发的一种荧光素,被激发后产生较明亮的红色荧光。它比普通的荧光更加明亮,不容易淬灭,背景更低。由于其发射波长介于Cy2(或FITC)和Cy5中间,且重叠较少,RRX可与Cy2和Cy5一起用于同一样本的多重标记检测。

    免疫原:兔IgG
    缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
    稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
    防腐剂:0.05%叠氮*
    荧光团:Rhodamine Red-X,Amax=570; Emax=590
    应用范围:对于大多数实验(1:25-100)

    ·蛋白快速染色液
    编号:WE0278
    英文名称:FastStain Protein Staining Reagent
    规格:500ml
      本产品采用独特的配方,可对电泳后凝胶上的蛋白质条带进行染色,而对凝胶本底几乎没有着色。染色过程仅需15分钟,染色后几乎不需要脱色。本产品灵敏度高,可检测到15ng BSA蛋白;若实验对检测灵敏度有较高要求,可将凝胶放置在染色液中2小时,可达到最大灵敏度(BSA:5ng)。

    注意事项
    1、操作时请务必佩戴手套,如溅到皮肤上,请立即用大量水冲洗。
    2、染色前的凝胶洗涤非常重要,否则会造成凝胶染色背景加深。
    3、如染色后有轻微背景,可将染色后的凝胶用过量蒸馏水室温洗涤、脱色。
    4、本产品适用于变性和非变性凝胶电泳后的蛋白染色。

    操作步骤

    I 常规操作步骤
    1、常规PAGE电泳完成后,小心取下凝胶,根据凝胶的大小,将其放置在一个可微波加热的容器中。
    2、加入足量的纯水,使凝胶可以在其中自由晃动,微波加热至沸腾。室温晃动2 min,彻底弃去水。
    3、取20-25ml(以液面刚好覆盖凝胶为宜)凝胶染液加入到纯水洗涤后的凝胶的盒中,使其足以没过凝胶,轻轻晃动。并在微波炉中高火加热至沸腾,取出后室温轻轻摇动,5-10 min后凝胶中的蛋白条带开始显色,15 min后显色基本完成。
    注意:此操作检测的灵敏度为:用BSA检测,灵敏度为15ng。若实验对检测灵敏度有较高要求,可将凝胶放置在染色液中2小时,可达到最大灵敏度(用BSA检测,灵敏度为5ng)。

    II 快速助染步骤:
    1、常规PAGE电泳完成后,小心取下凝胶,根据凝胶的大小,将其放置在一个可微波加热的容器中。
    2、加入足量的纯水,使凝胶可以在其中自由晃动,微波加热至沸腾。室温晃动2 min,弃去水。
    3、重复步骤2两次。
    4、取20-25ml(以液面刚好覆盖凝胶为宜)凝胶染液加入到含纯水洗涤后的凝胶的盒中,使其足以没过凝胶,轻轻晃动后,微波高火加热至沸腾,取出后置于室温并轻轻晃动,5-10 min后凝胶中的蛋白条带开始显色,15 min后显色完成。
    注意:此操作检测的灵敏度为:用BSA检测,灵敏度为5ng。

    储存条件:室温



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