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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
594
- 英文名:
RNAnt RNA Extraction Kit(DNase I)
- 保质期:
1个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
2~8℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
WE0202型新型植物RNA提取试剂盒(含DNase I)价格厂家的品牌:百奥莱博,是优质的RNA纯化产品,用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多新型植物RNA提取试剂盒(含DNase I)等RNA纯化产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:WE0202型新型植物RNA提取试剂盒(含DNase I)价格厂家
品牌:百奥莱博
规格:50次
产地:国产|进口
编号:WE0202
本试剂盒适用于从多种植物中提取RNA,即便是从多糖多酚含量丰富的植物中也能成功提取高质量的RNA,如水稻叶片、小麦叶片、玉米叶片、烟草叶、松针、银杏叶、杨树叶、石榴叶、冬青叶、苹果、桃、梨、西红柿、樱桃、杏、香蕉、葡萄、枇杷、桂圆果皮、桂圆果肉、荔枝果皮、荔枝果肉、大豆、花生、玉米、马铃薯块茎、月季花瓣、石榴花瓣,香菇、平菇等样本。独特的裂解液配方,可使细胞中的RNA酶迅速灭活,有效去除多糖多酚对RNA提取的影响,无需*酚、*仿等试剂,同时采用硅基质膜吸附RNA进行纯化,提取的总RNA纯度高,无基因组、蛋白质和其它杂质的污染,可用于Real Time RT-PCR、RT-PCR 、Northern Blot、Dot Blot、和体外翻译等多种下游实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| DNase I | 1000 U |
| 10×Reaction Buffer | 1000μl |
| Buffer RLS | 40ml |
| Buffer RW1 | 40ml |
| Buffer RW2(浓缩液) | 11ml |
| RNase-Free Water | 10ml |
| 过滤柱FS及收集管 | 50套 |
| 吸附柱RM及收集管 | 50套 |
| RNase-Free离心管(1.5ml) | 50个 |
保存条件:DNase I及10×Reaction Buffer -20℃保存,其它组分室温(15~30℃)。
自备试剂:β-巯基乙醇、无水乙醇(新开封或提取RNA专用)
产品特点:
1、适用范围广:可从各种植物中提取总RNA,即便是多糖多酚含量丰富的植物也能成功提取。
2、纯度高:彻底去除污染物及下游反应抑制物,提取的RNA适合于多种下游应用。
3、成功提取的样本:水稻叶片、小麦叶片、苹果、桃、梨、西红柿、樱桃、杏、香蕉、葡萄、桂圆果皮、桂圆果肉、荔枝果皮、荔枝果肉、黄豆、花生、马铃薯块茎、松针、银杏叶、杨树叶、冬青叶、月季等样本。
RNA得率:
| 植物样本(100mg) | 总RNA量(μg) |
| 拟南芥荚果 | ~50 |
| 大豆 | ~55 |
| 玉米叶片 | ~55 |
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、预防RNase污染,应注意以下几方面:
① 使用无RNase的塑料制品和枪头。
② 操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。
2、提取的样品避免反复冻融,否则影响RNA提取得率和质量。
3、Buffer RLS如果产生沉淀,请加热使其溶解后室温放置。
4、Buffer RLS在使用前请加入β-巯基乙醇,1ml Buffer RLS加20μl β-巯基乙醇。加入β-巯基乙醇的Buffer RLS室温可保存1个月。
5、第一次使用Buffer RW2前应按照试剂瓶标签的说明加入无水乙醇。
操作步骤:
1、匀浆处理:取50-100mg植物组织在液氮中迅速研磨成粉末,加入500μl Buffer RLS(使用前请先检查是否加入β-巯基乙醇),立即涡旋剧烈震荡混匀。
注意:对于含水量极其丰富的材料,如西瓜果肉,西红柿,梨果肉等,可以适当多加入些材料,最多可增加至200mg;对于富含淀粉的样本或成熟叶片,可适当增加Buffer RLS的用量,最多可增加至700μl。
2、4℃ 12000rpm(~~13400×g)离心2分钟。
3、将上清液转入已装入收集管的过滤柱中,4℃ 12000rpm离心1分钟,小心吸取收集管中的上清并转移至新的RNase-Free 离心管(自备)中,枪头尽量避免接触收集管中的细胞碎片沉淀。
4、缓慢加入0.5倍上清体积的无水乙醇,混匀(此时可能会出现沉淀),将得到的溶液和沉淀一起转入已装入收集管的吸附柱中,若一次不能将全部溶液加入吸附柱中,请分两次转入。4℃ 12000rpm离心1分钟,弃废液,将吸附柱重新放回收集管中。
5、向吸附柱RM中加入350μl Buffer RW1,4℃ 12000rpm离心1分钟,弃废液,将吸附柱重新放回收集管中。
6、配制DNase I 混合液:取52μl RNase-Free Water,向其中加入8μl 10×Reaction Buffer和20μl DNase I(1 U/μl),混匀, 配制成终体积为80μl的反应液。
7、向吸附柱中直接加入80μl DNase I 混合液,20-30℃孵育15分钟。
8、向吸附柱RM中加入350μl Buffer RW1,4℃ 12000rpm离心1分钟,弃废液,将吸附柱重新放回收集管中。
9、向吸附柱RM中加入500μl Buffer RW2(使用前检查是否加入无水乙醇), 4℃ 12000rpm离心1 分钟,弃废液,将吸附柱重新放回收集管中。
10、重复步骤9。
11、4℃ 12000rpm离心2分钟。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余乙醇去除,乙醇残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
12、将吸附柱RM装入新的RNase-Free Centrifuge Tubes(1.5ml)中,向吸附膜的中间部位悬空滴加30-50μl RNase-Free Water,室温放置2分钟,4℃ 12000rpm离心1分钟,得到的RNA溶液保存在-70℃,防止降解。
注意:
① RNase-Free Water体积不应小于30μl,体积过小影响回收率。
② 如果要提高RNA的产量,可用30-50μl新的RNase-Free Water重复步骤12。
③ 如果要提高RNA浓度,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,重复步骤12。
储存条件:2~8℃。
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WE0202型新型植物RNA提取试剂盒(含DNase I)价格厂家关键词:含DNase I,WE0202,RNAnt RNA Extraction Kit(DNase I),新型植物RNA提取试剂盒,新型植物RNA提取试剂盒(含DNase I)
·1.5 M Tris-HCl缓冲液(pH8.8)
编号:WE0284
英文名称:1.5 M Tris-HCl(pH8.8)
规格:500ml
·Taq DNA Polymerase
编号:WE0101
英文名称:Taq DNA Polymerase
规格:500U|2500U|10000U
Taq DNA Polymerase是通过大肠杆菌表达纯化的重组酶。其基因来源于Thermus aquaticus polymerase。该蛋白分子量为94 kDa,具有5"→3"DNA聚合酶活性和5"→3"外切核酸酶活性,无3"→5"外切核酸酶活性,扩增得到的PCR产物3"端附有一个“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。本产品具有延伸速度快、扩增效率高的特点,主要适用于PCR法扩增DNA片段、DNA序列测定等实验。
产品组成:
| 组份 | 500 U | 2500 U | 10000 U |
| Taq DNA Polymerase(5 U/μl) | 100μl | 5×100μl | 2×1ml |
| 10×PCR Buffer | 1.8ml | 5×1.8ml | 8×5ml |
活性定义:用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74℃,30分钟内,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。
质量控制:
1、经过多次柱纯化,SDS-PAGE检测其纯度大于99%;
2、经检测无外源核酸酶活性;
3、PCR方法检测无宿主残余DNA;
4、能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因;
5、室温存放一个月,无明显活性改变。
使用方法:
以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系:
| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 10×PCR Buffer | 5μl | 1× |
| dNTP Mix,10 mM each | 1μl | 200μM each |
| Forward Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Reverse Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Template DNA | <0.5μg | <0.5μg/50μl |
| Taq DNA Polymerase | 0.25-0.5μl | 1.25-2.5 U/50μl |
| ddH2O | up to 50μl |
注意:引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2、PCR反应条件:
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 94℃ | 2min | |
| 变性 | 94℃ | 30s | 25-35个循环 |
| 退火 | 55-65℃ | 30s | |
| 延伸 | 72℃ | 30s | |
| 终延伸 | 72℃ | 2min |
注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,本产品Taq DNA Polymerase的扩增效率为2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
WE0202型新型植物RNA提取试剂盒(含DNase I)价格厂家关键词:含DNase I,WE0202,RNAnt RNA Extraction Kit(DNase I),新型植物RNA提取试剂盒,新型植物RNA提取试剂盒(含DNase I)
·RRX标记山羊抗兔IgG(H+L)
编号:WE0382
英文名称:Goat Anti-Rabbit IgG, Rhodanmine Red-X Conjugated
规格:100μl
本产品为RRX标记的经抗原亲和纯化的山羊抗体,特异识别兔IgG。使用本产品检测灵敏度高,本底低,对其他种属IgG无明显交叉反应,常用于免疫荧光和流式细胞等标记检测。Rhodamine Red-X(RRX)是近年新开发的一种荧光素,被激发后产生较明亮的红色荧光。它比普通的荧光更加明亮,不容易淬灭,背景更低。由于其发射波长介于Cy2(或FITC)和Cy5中间,且重叠较少,RRX可与Cy2和Cy5一起用于同一样本的多重标记检测。
免疫原:兔IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:0.05%叠氮*
荧光团:Rhodamine Red-X,Amax=570; Emax=590
应用范围:对于大多数实验(1:25-100)
·蛋白快速染色液
编号:WE0278
英文名称:FastStain Protein Staining Reagent
规格:500ml
本产品采用独特的配方,可对电泳后凝胶上的蛋白质条带进行染色,而对凝胶本底几乎没有着色。染色过程仅需15分钟,染色后几乎不需要脱色。本产品灵敏度高,可检测到15ng BSA蛋白;若实验对检测灵敏度有较高要求,可将凝胶放置在染色液中2小时,可达到最大灵敏度(BSA:5ng)。
注意事项:
1、操作时请务必佩戴手套,如溅到皮肤上,请立即用大量水冲洗。
2、染色前的凝胶洗涤非常重要,否则会造成凝胶染色背景加深。
3、如染色后有轻微背景,可将染色后的凝胶用过量蒸馏水室温洗涤、脱色。
4、本产品适用于变性和非变性凝胶电泳后的蛋白染色。
操作步骤:
I 常规操作步骤:
1、常规PAGE电泳完成后,小心取下凝胶,根据凝胶的大小,将其放置在一个可微波加热的容器中。
2、加入足量的纯水,使凝胶可以在其中自由晃动,微波加热至沸腾。室温晃动2 min,彻底弃去水。
3、取20-25ml(以液面刚好覆盖凝胶为宜)凝胶染液加入到纯水洗涤后的凝胶的盒中,使其足以没过凝胶,轻轻晃动。并在微波炉中高火加热至沸腾,取出后室温轻轻摇动,5-10 min后凝胶中的蛋白条带开始显色,15 min后显色基本完成。
注意:此操作检测的灵敏度为:用BSA检测,灵敏度为15ng。若实验对检测灵敏度有较高要求,可将凝胶放置在染色液中2小时,可达到最大灵敏度(用BSA检测,灵敏度为5ng)。
II 快速助染步骤:
1、常规PAGE电泳完成后,小心取下凝胶,根据凝胶的大小,将其放置在一个可微波加热的容器中。
2、加入足量的纯水,使凝胶可以在其中自由晃动,微波加热至沸腾。室温晃动2 min,弃去水。
3、重复步骤2两次。
4、取20-25ml(以液面刚好覆盖凝胶为宜)凝胶染液加入到含纯水洗涤后的凝胶的盒中,使其足以没过凝胶,轻轻晃动后,微波高火加热至沸腾,取出后置于室温并轻轻晃动,5-10 min后凝胶中的蛋白条带开始显色,15 min后显色完成。
注意:此操作检测的灵敏度为:用BSA检测,灵敏度为5ng。
储存条件:室温
我公司生产供应销*(代"售")的RNA纯化产品正全系列现货促销,满分期待您的垂询选购WE0202型新型植物RNA提取试剂盒(含DNase I)价格厂家。
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文献和实验、promega无法提取的海棠等、均可用该产品成功提取。 推荐:北京艾德莱生物的RN09 EASYspin 植物RNA提取试剂盒为独家产品,世界领先水平,不使用苯酚,氯仿有毒性物质,采用离心柱型操作,添加有自主创新的多糖多酚去除成分,是多糖多酚样品的特效产品,不需要液氮,20分钟内得到高质量RNA。成功提取Promega无法提取的海棠叶片、Qiagen无法提取的黑加仑等样品。是国产试剂赶超世界先进水平的一个典型例子。同时北京艾德莱推出的RN38 EASYspin Plus植物RNA提取试剂盒进一步解决
填补Qiagen空白的植物RNA提取试剂盒(包括多糖多酚困难样品)
一下植物RNA为什么不能提取成功的原因: 市面上最常见的RNA提取试剂盒无非是两种:第一种:TRIzol改良类方法(包括溶液型的和离心柱型的)、第二种:直接裂解过柱子的方法(离心柱) 第一种试剂盒失败的原因1:RNA市面上面最流行的方法就是TRIzol,或者TRIzol改良,或者TRIzol加离心柱一类的改良方法。TRIzol也就是异硫*酸胍/苯酚/氯仿原理一步法的方法最适合的对象是动物源性的组织细胞,针对普通多糖多酚低的植物性的材料,TRIzol类原理产品也可以提取。但是多糖
大小不一样的引物对。3) 将RNA提取物用RNase-free的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I处理后的RNA清洁(cleanup),请联系我们索取具体操作说明书。4) 在步骤去蛋白液RW1漂洗前,直接在吸附柱RA上进行DNase I处理。请联系我们索取具体操作说明书。6. RNA 纯度及浓度检测:完整性: RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳 (电泳条件:胶浓度1.2%;0.5×TBE电泳缓冲液;150v,15 分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA 为rRNA,电泳后UV
技术资料暂无技术资料 索取技术资料









