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540
- 英文名:
Developing Powder
- 保质期:
长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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冷藏
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖WE0303型显影粉特价促销在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:WE0303型显影粉特价促销
编号:WE0303
产地:国产|进口
规格:20套
英文名:Developing Powder
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WE0303型显影粉特价促销关键词:显影粉,WE0303,Developing Powder
·Alexa Fluor 488/PI细胞凋亡检测试剂盒
编号:WE0327
英文名称:Annexin V-Alexa Fluor 488/PI Apoptosis Detection Kit
规格:50次
本试剂盒是一种采用Annexin V-Alexa Fluor 488与PI双染法进行细胞早期凋亡分析的检测试剂盒。
细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面,这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝*酸(PS)从细胞膜内转移到细胞膜外,使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂,正常主要存在于细胞膜的内面,在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。Annexin V具有易于结合到磷脂类如PS的特性,对PS有高度的亲和性。因此,该蛋白可充当一敏感的探针检测暴露在细胞膜表面的PS。PS转移到细胞膜外不是凋亡所独特的,也可发生在细胞坏死中。两种细胞死亡方式间的差别是在凋亡的初始阶段细胞膜是完好的,而细胞坏死在其早期阶段细胞膜的完整性就被破坏。另外一种活细胞非透过性荧光染料碘化丙啶不能通过完整的活细胞,但能够对坏死和凋亡晚期的细胞进行染色, 因此通常将Annexin V与PI配合染色, 以区别凋亡早期细胞与坏死细胞和凋亡的晚期细胞。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| 4×Binding Buffer | 10ml |
| Propidium Iodide,PI | 500μl |
| Annexin V-Alexa Fluor 488 | 250μl |
注意事项:
1、消化细胞时不能用含EDTA的胰酶。
2、本试剂盒需使用流式细胞仪进行检测。
3、需自备PBS和去离子水。
4、荧光染料均存在淬灭问题,保存和使用过程中请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
5、PI对人体有刺激性,请注意适当防护。
6、请穿实验服并戴一次性手套操作。
操作步骤:
1、细胞样品的准备:
a.对于贴壁细胞:小心收集细胞培养液到一离心管内备用。用胰酶消化细胞,至细胞可以被轻轻用移液管或枪头吹打下来时,加入前面收集的细胞培养液,吹打下所有的贴壁细胞,并轻轻吹散细胞。再次收集到离心管内。1000×g左右离心3-5分钟,沉淀细胞。对于特定的细胞,如果细胞沉淀不充分,可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清,可以残留约50μl左右的培养液,以避免吸走细胞。加入约1ml 4℃预冷的PBS,重悬细胞,再次离心沉淀细胞,小心吸除上清。再次加入1ml 4℃预冷的PBS,重悬细胞,再次离心沉淀细胞。
b.对于悬浮细胞:1000×g左右离心3-5分钟,沉淀细胞。对于特定的细胞,如果细胞沉淀不充分,可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清,可以残留约50微升左右的培养液,以避免吸走细胞。加入约1ml 4℃预冷的PBS,重悬细胞,并转移到1.5毫升离心管内。再次离心沉淀细胞,小心吸除上清,可以残留约50μl左右的PBS,以避免吸走细胞。再次加入1ml 4℃预冷的PBS,重悬细胞,再次离心沉淀细胞。
2、用去离子水按1:3稀释Binding Buffer(4ml Binding Buffer +12ml 去离子水)。
3、用 250μl Binding Buffer重新悬浮细胞,调节其浓度为 1×106/ml。
4、取 100μl的细胞悬液于 5ml 流式管中,加入 5μl Annexin V-Alexa Fluor 488 和10μl 20μg/ml的PI溶液。
5、混匀后于室温避光孵育 15 分钟。
6、在反应管中加 400μl PBS,流式细胞仪(FACS)分析。
实验图例:
Jurkat细胞用顺铂诱导凋亡后用Annexin V-Alexa Fluor 488/PI双染流式分析图谱
储存条件:2~8℃,避光保存
WE0303型显影粉特价促销关键词:显影粉,WE0303,Developing Powder
·HRP标记驴抗山羊IgG(H+L)
编号:WE0372
英文名称:Donkey Anti-Goat IgG, Peroxidase Conjugated
规格:100μl
本产品为过氧化物酶标记的经亲和纯化的驴抗体,特异识别山羊IgG,检测灵敏度高,本底低,可用于Western Blot、ELISA 和免疫组化检测。酶标记抗体,是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学各个分支学科中的免疫化学制剂,具有特异、敏感和安全的特点。
免疫原:山羊IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:无(叠氮*是HRP抑制剂,抗体稀释液中请避免使用叠氮*作为防腐剂)
应用范围:
WB ECL发光检测(1:10000-200000)
WB 显色检测(1:5000-100000)
ELISA(1:5000-100000)
Immunohisto/Cytochemistry(1:500-5000)
·抗Flag标签单克隆抗体
编号:WE0337
英文名称:Anti Flag-Tag Mouse Monoclonal Antibody
规格:100μl
该抗体高度特异识别重组蛋白C末端或N末端的Flag标签(DYKDDDDK),而不受邻近*基酸组成的影响,可用于检测各种表达载体表达的Flag-Tag融合蛋白。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG
免疫原:人工合成多肽(DYKDDDDK)
应用范围:
WB(1:500-5000)
IP(1:50-200)
IF/ICC、ELISA(需摸索最佳稀释度)
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