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细胞共培养

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    细胞共培养技术是将2种或2种以上的细胞共同培养于同一环境中,由于其具有更好地反映体内环境的优点,所以这种方法被广泛应用于现代细胞研究中。目前,细胞共培养技术最多应用于骨细胞和神经细胞。细胞共培养体系主要通过两种方法建立: 直接共培养体系,即将2种或2种以上的细胞同时或分别接种于同一孔中,不同种类的细胞之间直接接触; 间接共培养体系,即将2种或2种以上的细胞分别接种于不同的载体上,然后将这两种载体置于同一培养环境之中,使不同种类的细胞共用同一种培养体系而不直接接触。共培养体系主要用于诱导细胞向另一种细胞分化,诱导细胞自身分化,维持细胞功能和活力,对细胞增殖进行调控,促进早期胚胎的发育和提高代谢产物的产量.
    Transwell共培养可实现非接触性共培养,主要是运用一种特殊的共培养工具进行细胞共培养研究,探讨两种细胞的相互作用情况。transwell小室放入培养板中,小室内称为上室,培养板内称为下室,上下层有一张有通透性的聚碳酸酯膜,这层膜带有微孔,孔径最大为12.0 μm,最小为0.1 μm,小于3.0 μm孔径条件下,细胞不会迁徙通过,使得培养的两细胞不能相互接触。
    操作步骤
    直接共培养:
    1. 制备细胞悬液:消化细胞,终止消化后离心弃去培养液,用PBS洗1-2遍,用含BSA的无血清培养基重悬,调整细胞密度。
    2. 将两种细胞按照一定比例在同一培养皿同培养。
    3. 显微镜下观察细胞形态变化和增殖情况。
    4. 结果统计分析。
    非接触性共培养:
    1. 制备细胞悬液:消化细胞,终止消化后离心弃去培养液,用PBS洗1-2遍,用含BSA的无血清培养基重悬,调整细胞密度。
    2. 接种细胞:Transwell上下室分别接种细胞A和细胞B悬液。
    3. 显微镜下观察上下室细胞形态变化,必要时可进行相关的染色鉴定。
    4. 结果统计分析。
    实验周期:2-3周左右,具体需要根据细胞生长情况及实验内容而定。
     

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