中等RIPA裂解液特价促销

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北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应中等RIPA裂解液特价促销，产品信息：

类别：蛋白质研究

英文名：RIPA Lysis Buffer(Medium)

产品名	产品编号	包装规格
中等RIPA裂解液	BTN131007	250mL

品牌：百奥莱博

编号：BTN131007

产地：国产|进口

规格：250mL

英文名：RIPA Lysis Buffer(Medium)

RIPA裂解液是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等实验。本产品裂解强度较强，对膜蛋白、胞浆蛋白、核蛋白、胞浆磷酸化蛋白和各种转录因子均有很好的效果，本产品含有各种蛋白酶和磷酸蛋白酶抑制剂，能有效防止各种蛋白酶对目的蛋白的降解。我公司各种RIPA裂解液产品特点见下表：

 

产品名称	RIPA裂解液(强)	RIPA裂解液(中)	RIPA裂解液(弱)
有效裂解成分	1% Triton X-100,1% deoxycholate,0.1% SDS	1% NP-40，0.5% deoxycholate,0.1% SDS	1% NP-40，0.25% deoxycholate
裂解强度	强	中	温和
对膜蛋白的提取	很好	较好	一般
对胞浆蛋白的提取	很好	很好	很好
对核蛋白的提取	很好	较好	较好
胞浆磷酸化蛋白提取	很好	很好	很好
细胞核转录因子提取	很好	很好	很好
含蛋白酶抑制剂	是	是	是
含磷酸酯酶抑制剂	是	是	是
主要用途	WB,IP	WB,IP	WB,IP,co-IP

 

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期一年。

 

使用方法：

 

对于培养细胞样品：

1. 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。

2. 裂解细胞

2.1 对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。

2.2 对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。

3. 充分裂解后，10000-14000g离心3～5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。

注意：通常6孔板每孔细胞加入150微升裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200微升或250微升。

 

对于组织样品：

1. 把组织剪切成细小的碎片。

2. 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。

3. 按照每20毫克组织加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)

4. 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。

5. 充分裂解后，10000-14000g离心3～5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。

6. 如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。

注意：RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下，可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子，例如NF-kappaB、p53等时，通常不必进行超声处理，就可以检测到这些转录因子。

 

备注：

1.为取得最佳的使用效果，尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。

2.裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。

3.用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品，建议使用BCA蛋白浓度测定试剂盒，不建议使用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。

中等RIPA裂解液特价促销专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司

关键词：RIPA Lysis Buffer(Medium),BTN131007,中等RIPA裂解液

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编号	类别	名称
BTN130971	RNA纯化	柱式病毒RNA-DNA共提试剂盒
BTN130977	RNA纯化	生物素化的Oligo(dT)
BTN101102	蛋白质研究	改良Lowry法蛋白定量试剂盒
BTN51207	工具酶	Pfu DNA聚合酶
BTN70703	DNA纯化	柱式分枝杆菌DNA提取试剂盒
BTN100930	蛋白质研究	硝酸纤维素膜
BTN130912	核酸扩增(PCR)	dATP溶液(2.5mM)
BTN131180	工具酶	通用酶缓冲液
BTN130970	RNA纯化	柱式革兰氏阳性菌RNA提取试剂盒
BTN130846	RNA纯化	白色念球菌RNA提取试剂盒
BTN131006	蛋白质研究	强RIPA裂解液
BTN130641	工具酶	T4核酸内切酶V
BTN130848B	一次性新鲜培养基	即用型LB平板培养基(含Amp)
BTN100890	其他生化试剂	10%Sarkosyl溶液(不含RNase)
BTN131079	蛋白质研究	重组蛋白A
BTN130888	蛋白质研究	石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒
BTN100881	蛋白质研究	电泳级SDS溶液(10%)
BTN131042	核酸扩增(PCR)	miRNA荧光定量RT-PCR检测试剂盒
BTN131182	工具酶	Sulfolobus DNA聚合酶IV
BTN100941	核酸扩增(PCR)	通用型全基因组扩增试剂盒
BTN81221	克隆与表达	大肠杆菌HB101化学感受态细胞
BTN90602F	核酸电泳和回收	DNA marker(λ/EcoRI+HindIII)
BTN120630	探针标记及检测	荧光素-12-dUTP溶液
BTN61203	核酸扩增(PCR)	PCR级高GC的DNA清除剂
BTN60801	DNA纯化	柱式腐殖酸清除剂

 

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