北京促销中等RIPA裂解液价格

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北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应北京促销中等RIPA裂解液价格，产品信息：

类别：蛋白质研究

英文名：RIPA Lysis Buffer(Medium)

产品名	产品编号	包装规格
中等RIPA裂解液	BTN131007	250mL

规格：250mL

英文名：RIPA Lysis Buffer(Medium)

品牌：百奥莱博

编号：BTN131007

RIPA裂解液是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等实验。本产品裂解强度较强，对膜蛋白、胞浆蛋白、核蛋白、胞浆磷酸化蛋白和各种转录因子均有很好的效果，本产品含有各种蛋白酶和磷酸蛋白酶抑制剂，能有效防止各种蛋白酶对目的蛋白的降解。我公司各种RIPA裂解液产品特点见下表：

 

产品名称	RIPA裂解液(强)	RIPA裂解液(中)	RIPA裂解液(弱)
有效裂解成分	1% Triton X-100,1% deoxycholate,0.1% SDS	1% NP-40，0.5% deoxycholate,0.1% SDS	1% NP-40，0.25% deoxycholate
裂解强度	强	中	温和
对膜蛋白的提取	很好	较好	一般
对胞浆蛋白的提取	很好	很好	很好
对核蛋白的提取	很好	较好	较好
胞浆磷酸化蛋白提取	很好	很好	很好
细胞核转录因子提取	很好	很好	很好
含蛋白酶抑制剂	是	是	是
含磷酸酯酶抑制剂	是	是	是
主要用途	WB,IP	WB,IP	WB,IP,co-IP

 

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期一年。

 

使用方法：

 

对于培养细胞样品：

1. 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。

2. 裂解细胞

2.1 对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。

2.2 对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。

3. 充分裂解后，10000-14000g离心3～5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。

注意：通常6孔板每孔细胞加入150微升裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200微升或250微升。

 

对于组织样品：

1. 把组织剪切成细小的碎片。

2. 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。

3. 按照每20毫克组织加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)

4. 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。

5. 充分裂解后，10000-14000g离心3～5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。

6. 如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。

注意：RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下，可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子，例如NF-kappaB、p53等时，通常不必进行超声处理，就可以检测到这些转录因子。

 

备注：

1.为取得最佳的使用效果，尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。

2.裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。

3.用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品，建议使用BCA蛋白浓度测定试剂盒，不建议使用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。

北京促销中等RIPA裂解液价格专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司

关键词：中等RIPA裂解液,BTN131007,RIPA Lysis Buffer(Medium)

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编号	类别	名称
BTN130666	工具酶	尿嘧啶切刻酶
BTN120601	DNA纯化	革兰氏阳性菌质粒DNA提取试剂盒
BTN100203	核酸扩增(PCR)	通用型LAMP试剂盒
BTN51208B	核酸扩增(PCR)	dNTP溶液(10mM)
BTN131031	基因结构和功能	人基因组DNA(男性)
BTN130643	工具酶	烷基腺嘌呤DNA糖基化酶(AAG)
BTN3092	核酸电泳和回收	*化乙锭清除剂(EB清除剂)
BTN130429	工具酶	Phusion DNA聚合酶
BTN131090	蛋白质研究	中性亲和素蛋白
BTN100604	探针标记及检测	鲑鱼精DNA溶液
BTN70601	DNA纯化	粪便DNA提取试剂盒
BTN130907	探针标记及检测	脱脂奶粉
BTN60209	克隆与表达	盐*(代"酸")四环素溶液
BTN140405	DNA纯化	细菌内毒素标准品(10EU/支)
BTN91202	核酸扩增(PCR)	双酶一管式RT-PCR试剂盒(MMLV-Taq)
BTN130622	工具酶	T4 RNA连接酶1
BTN120420	工具酶	核酸外切酶III
BTN131278	其他细胞生物学试剂	戊二醛磷酸缓冲固定液
BTN81101	DNA纯化	柱式昆虫DNA提取试剂盒
BTN140587	其他细胞生物学试剂	B-5固定液
BTN121105	细胞及免疫学	茜素红S染色试剂盒
BTN100905	其他生化试剂	8M盐*(代"酸")胍溶液(RNase-Free)
BTN130672	工具酶	核糖核酸酶RNase If

 

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