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Degenerate Oligonucleotide Primer PCR Kit
12个月
北京百奥莱博科技有限公司
低温运输、-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")DOP-PCR试剂盒 基因结构和功能,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:DOP-PCR试剂盒 基因结构和功能
英文名:Degenerate Oligonucleotide Primer PCR Kit
规格:50次
编号:BTN111109
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
DOP-PCR即简并寡聚核苷酸引物PCR,是扩增全基因组的方法之一,它利用中间含有6个随机碱基的22nt引物,通过两轮PCR(第一轮低温复性,第二轮高温复性)而将模板DNA扩增。DOP-PCR扩完整基因组的效率不如利用phi 29 DNA聚合酶的MDA,但在扩增高度降解的痕量DNA 方面具有巨大优势,在法医鉴定领域具有重要应用。本产品就是在DOP-PCR基础上进行优化而开发。
产品特点:
1. 专门用于高度降解的DNA,方便,含有除模板DNA和引物以外的所有成份,简化了准备工作。
2. 优化的引物浓度,使自连序列和非模板相关序列的合成。
3. 使用高保真酶,降低突变率。
4. 长度在300-1700bp 之间,平均500bp左右。
5. 模板基因DNA 用量一般为10-100pg。
6. 所得PCR产物可用于STR 多重扩增、比较基因组杂交、单染色体文库构建、基因组图谱研究等。
试剂盒组成:
成分 | 规格 |
DOP-PCR Magic Mix | 750μl |
DOP-PCR引物(20pmol/μL) | 250μL |
超纯水 | 1ml |
说明书 | 1份 |
成分 | 阴性对照 | 样品 |
DOP-PCR MagicMix | 25μL | 25μL |
基因组DNA模板(自备)或单个细胞 | 不加 | 10-100pg(或一个单个细胞) |
DOP-PCR引物(20 pmol/μL) | 5μl | 5μl |
补水到 | 50μl | 50μl |
预变性 | 95℃ | 5min |
第一轮PCR(12个循环) | 94℃ | 1min |
30℃ | 1.5min | |
72℃(30℃升到72℃的时间设定为3分钟) | 3min | |
第二轮PCR(35个循环) | 94℃ | 1min |
62℃ | 1min | |
72℃(每次循环后此步的保温时间延长14秒) | 2min | |
延伸 | 72℃ | 7min |
4℃ | Forever |
产品名称 | RIPA裂解液(强) | RIPA裂解液(中) | RIPA裂解液(弱) |
有效裂解成分 | 1% Triton X-100,1% deoxycholate,0.1% SDS | 1% NP-40,0.5% deoxycholate,0.1% SDS | 1% NP-40,0.25% deoxycholate |
裂解强度 | 强 | 中 | 温和 |
对膜蛋白的提取 | 很好 | 较好 | 一般 |
对胞浆蛋白的提取 | 很好 | 很好 | 很好 |
对核蛋白的提取 | 很好 | 较好 | 较好 |
胞浆磷酸化蛋白提取 | 很好 | 很好 | 很好 |
细胞核转录因子提取 | 很好 | 很好 | 很好 |
含蛋白酶抑制剂 | 是 | 是 | 是 |
含磷酸酯酶抑制剂 | 是 | 是 | 是 |
主要用途 | WB,IP | WB,IP | WB,IP,co-IP |
成分 | 规格 |
MMLV 逆转录酶(含RI) | 100μl |
RT Buffer(含dNTP) | 300μl |
Oligo(dT)18引物(0.5μg/μL) | 50μl |
随机引物(0.2μg/μL) | 50μl |
RNase-free 水 | 10ml |
PCR MagicMix 3.0 | 9ml |
专用染料 | 360μl |
说明书 | 1份 |
RNA模板 | |
总RNA | 100-500ng |
或poly(A)mRNA | 10-500 ng |
或专一的RNA(如体外转录制备的) | 0.01pg-500ng |
引物 | |
Oligo(dT)18(0.5μg/μL) | 1μL |
或随机引物(0.2μg/μL) | 1μL |
或自备模板专一反向引物(10pmol/μL) | 1-2μL |
RNase-free水 | 补水到12μL |
成份 | 加入量 |
PCR MagicMix 3.0(已加染料) | 15μl |
cDNA样品(上步的RT反应液) | 1-5μl |
模板专一性正向引物(10 pmol/μL) | 1-2μl |
模板专一性反向引物(10 pmol/μL) | 1-2μl |
补水到 | 30μl |
过程 | 温度 | 时间 |
预变性 | 94℃ | 5min |
PCR反应(35个循环) | 94℃ | 1min |
55℃ | 1min | |
72℃ | 2min | |
最后延伸 | 72℃ | 10min |
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购DOP-PCR试剂盒 基因结构和功能。
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