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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
Pfu DNA Polymerase
- 库存:
963
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括高保真DNA聚合酶 核酸扩增(PCR)在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:高保真DNA聚合酶 核酸扩增(PCR)
编号:SY0036
品牌:百奥莱博
英文名:Pfu DNA Polymerase
Pfu DNA Polymerase是经过基因工程改造的,新一代超保真DNA聚合酶,具有极高的扩增效率和广泛的模板适应性,可用于几乎所有PCR反应。其行进性 (processivity)得到了大幅度提升,即使是非常复杂的模板,也能准确快速的完成反应。
本产品中附带的5×Phanta SF反应缓冲液对于简单或复杂模板、短片段或长片段PCR扩增都具有良好的适应性。缓冲液中已经含有10 mM Mg2+ (1×终浓度为2 mM),可以使用产品中提供的DMSO或MgSO4对反应体系进行优化。另外,产品中附带的PCR Enhancer可有助于高GC含量片段的扩增。
产品特点:
• 保真度是Taq DNA Polymerase的52倍
• 扩增速度是常规聚合酶的4-150倍
• 广泛的模板适应性
• 优化的缓冲体系广泛适用于各种类型模板,便于快速得到理想的扩增结果
• 提供PCR Enhancer以帮助扩增高GC含量的模板
• 提供即用型的预混液,最大程度地减少实验步骤
产品组份:
5×SF Buffer(with 10mM MgSO4):1.25 ml
25 mM MgSO4:1 ml
dNTP Mix(10 mM each):100 μl
Pfu DNA Polymerase(1 U/μl):100 μl
5×PCR Enhancer:500 μl
DMSO:100 μl
10×Loading buffer:1.25 ml
活性定义:用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,74℃ 30分钟内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位(U)。
储存条件:-20℃。
质量控制
核酸外切酶残留检测:10 U本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在74 ºC下孵育1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。核酸内切酶残留检测:10 U本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74 ºC下孵育1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留DNA检测: 50 μl体系中,加入2U本品,以ddH2O为模板,扩增E.coil 16s rDNA基因。35个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。
功能检测1:50 μl PCR体系中加入1U本品,以100 ng人基因组DNA为模板扩增α-1-antitrypsin基因。30个循环后取10% PCR产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,观察到单一的8.2 kb条带。
功能检测2:50 μl PCR体系中加入1U本品,以10 ng人基因组DNA为模板扩增30个循环,取10% PCR产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,观察到单一的15 kb条带。
引物设计注意事项
1)引物3’端最后一个碱基最好为G或者C;
2)引物3’端最后8个碱基应避免出现连续错配;
3)引物3’端尽量避免发夹结构出现;
4)引物的Tm值调整至55℃-65℃之间。
5)引物额外附加序列,即与模板非配对序列,不应参与引物Tm值计算;
6)引物的GC含量控制在40%-60%之间;
7)正向引物和反向引物Tm值以及GC含量尽可能一致。
欲了解更多高保真DNA聚合酶 核酸扩增(PCR)的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
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高保真DNA聚合酶 核酸扩增(PCR)关键词:SY0036,高保真DNA聚合酶,Pfu DNA Polymerase
·一步法快速支原体检测试剂盒
编号:SY0551
英文名称:One-Step Mycoplasma Detection Kit
规格:25T
本品是利用独特的等温扩增技术,专门针对细胞培养液中支原体污染的快速检测产品。较以往支原体检测产品,本试剂盒使用更为简便,只需吸取1μl疑似支原体污染的细胞培养上清加入反应体系中,61℃孵育45分钟即可,其主要原理是若细胞培养物被支原体污染,支原体DNA的保守序列会被大量、快速地扩增,使反应液由蓝紫色变成天蓝色,结果肉眼可辨,无需电泳。
本试剂盒可以检测多种支原体,包括细胞培养过程中常见的8种支原体。传统巢式PCR支原体法检测法易受细胞培养上清中抑制物的影响,产生假阴性结果;反应后需开盖电泳检测,增加污染导致的假阳性风险。一步法支原体检测试剂盒完全没有上述缺点,且其检测灵敏度、准确性远远高于PCR法。
储存条件:-20℃避光,保质期18个月
·Cy3标记兔抗绵羊IgG(H+L)
编号:SY0717
英文名称:Cy3-AffiniPure Rabbit Anti-Sheep IgG (H+L)
规格:100μl
本品是由Cy3标记的兔抗绵羊IgG(H+L),使用抗原偶联的琼脂糖微珠从兔抗血清内亲和色谱纯化所得。免疫电泳和/或ELISA法检测显示本品特异性结合完整的绵羊IgG分子,也会与其他绵羊免疫球蛋白的轻链结合。可能会与其他物种免疫球蛋白发生交叉反应,但不会识别非免疫球蛋白类的血清蛋白。
Cy3最大激发波长(Amax)为550nm,最大发射波长(Emax)为570nm。本品适合做单标实验,广泛应用于多种免疫学实验如免疫细胞化学(ICC),流式细胞术(FC)以及免疫组化(IHC)等。要做多标(multiple-labeling)实验,建议使用与相近物种血清蛋白或者免疫球蛋白预先经过亲和吸附处理的二抗。
浓度:0.75mg/ml
缓冲液:0.005M 磷酸*,0.125M *化*, pH 7.6
稳定剂:7.5mg/ml BSA(无IgG,蛋白酶),50% 甘油
防腐剂:0.025% 叠氮化*
推荐稀释比例:1:50~400(适合多数实验)
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期一年。
高保真DNA聚合酶 核酸扩增(PCR)关键词:SY0036,高保真DNA聚合酶,Pfu DNA Polymerase
·STAT3-GFP报告基因质粒
编号:SY0155
英文名称:STAT3 GFP Reporter Plasmid
规格:1μg
STAT3报告基因是用于检测STAT3二聚体和STAT1/STAT3异质二聚体的转录活性水平为目的的报告基因。激活STAT3后形成STAT3二聚体和STAT1/STAT3异质二聚体,它们与SIS-inducible element(SIE)反应元件进行相互作用调控细胞的生长和凋亡。STAT3(signal transducers and activators of transduction-3)报告基因与多种恶性肿瘤的发生、发展和侵袭转移关系密切。
STAT3报告基因主要用于监控细胞STAT3信号通路中的STAT3转录活性、肿瘤治疗药物的研发以及基因过表达和RNAi的表型分析等。
pGMSTAT3-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个STAT3结合位点,可以高效地检测STAT3的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因,更便于后续的检测。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。另外,由于质粒体积减小,使得STAT3-GFP报告基因更易于转染。
质粒图谱

pGMSTAT3 -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’
使用说明
pGMSTAT3-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。
注意事项
1)本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
储存条件:-20℃。
我公司强烈推荐核酸扩增(PCR)系列产品,热情期待您的咨询选购高保真DNA聚合酶 核酸扩增(PCR)。
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文献和实验Expand High Fidelity PCR--高保真PCR
for reduced activity of the polymerase. Hold at 4 degrees when finished. -------------------------------------------------------------------------------- If adding a sequence to a PCR product such as a His tag, etc it is sometimes a good idea
PCR(Polymerase Chain Reaction) 即聚合酶链式反应,对于常年狂奔在实验室的实验狗来说并不陌生。那么,对于 PCR 反应的核心成份,DNA 聚合酶,你选对了吗? 常见的 DNA 聚合酶如 Taq、Phanta、Pfu、KOD、Primerstar、Klenow、Bst、Phi29 等等。根据耐热性来分可分为耐热酶和常温酶。耐热聚合酶如 Taq、Pfu、KOD、Primerstar 等,常温聚合酶包括 Klenow、Bst、Phi29 等。根据保真度来分,高保真聚合
的组分。Taq DNA 聚合酶是用于 PCR 扩增最广为人知的聚合酶,它的发现变革了 PCR 的应用。Taq DNA 聚合酶有相对较高的热稳定性,在95 ℃有约 40 min 的半衰期。其合成速度约 60 s/kb,可扩增约 5 kb 的片段。所以 Taq 酶适用于一般的常规 PCR。如今,新一代的DNA聚合酶经研发可获得更好的PCR性能,如 SuperFi DNA 聚合酶、Phusion 高保真 DNA 聚合酶等。 在 50 μL 体系中,一般 1-2 units 的DNA聚合酶已经足够
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