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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
847
- 英文名:
Biotin-Protein A
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输,-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")生物素化的蛋白A北京价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:生物素化的蛋白A北京价格
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
规格:1mg
编号:BTN131099
英文名:Biotin-Protein A
本产品为生物素标记的蛋白A,可用于生物素化二抗的替代物。可以检测或定位位于细胞表面或组织中免疫球蛋白。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
我公司的生物素化的蛋白A北京价格,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·10nt随机引物(0.5μg/uL)
编号:BTN131227
英文名称:Octomer
规格:250
本产品为长度为10nt的随机引物,序列为5´-(NNNNNNNNNN)-3´,主要用于cDNA的合成和DNA探针标计。
储存条件:低温运输和-20℃保存,有效期一年。
疑难解答:
Q: 随机引物的长度对cDNA合成有何影响?
A: 文献报道,长度为10个nt的随机引物合成cDNA的效果好于6nt长的随机引物。
·通用型RT-LAMP恒温扩增试剂盒
编号:BTN101114
英文名称:Universal Reverse Transcription Loop-Mediated Isothermal Amplification Kit
规格:50次
本试剂盒可以用于RT-LAMP等温扩增,RT-LAMP即逆转录和Loop-Mediated Isothermal Amplification(环介导等温扩增)的结合,专门用于快速扩增RNA。LAMP是2000年才出现的一种新颖的等温核酸扩增方法。它利用4或6条模板专一的特异引物和具有链置换能力的DNA聚合酶,在等温条件下(63℃左右)30-60分钟完成扩增。该技术在灵敏度、特异性和检测范围等指标上能媲美甚至优于RT-PCR技术,同时还不需要模板的热变性、温度循环、电泳及紫外观察等过程,不依赖任何专门的仪器设备。目前已成功应用于人类及动植物、细菌、病毒、寄生虫、真菌等病原体的快速检测。
产品特点:
1.高特异性,由于同时使用4-6条特异引物,所以特异性比RT-PCR更高。
2.高扩增效率,扩增效率可达到10E9-10E10,比PCR灵敏一个数量级,可检测到单拷贝的RNA分子
3. 65℃左右完成RT和LAMP扩增,不需要贵重的热循环仪。
4. 即开即用,包含了除引物和模板RNA外的所有成份,十分方便。
5. 肉眼检测扩增结果,不需要昂贵的电泳、荧光PCR等仪器。
6. 提供扩增对照,便于在遇到困难时分析原因。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| RT-LAMP Mix(2×) | 0.5ml |
| AMV-Bst混合液 | 75μl |
| 对照引物混合物 | 40μl |
| 对照模板 | 5μl |
| MgCl2(25mM) | 0.2ml |
| RNase-free水 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
注:RT-LAMP Mix(2×)稀释到1×时,已经有8mM Mg2+,本试剂盒提供的MgCl2(25mM)用于用户优化条件用。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.在冰上溶解除酶外的各种组份,混匀,稍离心。在反应管中加入以下组份:
| 成份 | 样品管 | 阴性对照 |
| RT-LAMP Mix(2×) | 10μl | 10μl |
| 自备FIP引物终浓度 | 0.8μM | 0.8μM |
| 自备BIP引物终浓度 | 0.8μM | 0.8μM |
| 自备F3引物终浓度 | 0.2μM | 0.2μM |
| 自备B3引物终浓度 | 0.2μM | 0.2μM |
| 自备Loop F引物终浓度(可选项) | 0.4μM | 0.4μM |
| 自备Loop B引物终浓度(可选项) | 0.4μM | 0.4μM |
| 自备模板 RNA | 1-100ng | 不加 |
| AMV-Bst 混合液 | 1.5μl | 1.5μl |
| 补水到 | 20μl | 20μl |
注:如在反应管中加入本公司PCR级绿如蓝染料1μL(水则少加1μL),则可直接在荧光定量PCR仪中进行荧光定量检测。
2. 混匀,置于60-65℃保温30-120分钟。注意:如果不使用Loop引物,则最好保温120分钟;如果使用Loop引物,则最好保温30分钟。
3. 80℃10分钟灭活Bst DNA聚合酶。此酶有外切酶活性,所以必须灭活。
4.产物置于-20℃备用或立即用于下游检测。扩增产物可选下列方法之一检测:
a)琼脂糖凝胶电泳。取扩增产物5μL,1-2%的琼脂糖凝胶电泳,可见LAMP特征性电泳图谱;
b)向扩增产物中直接加入本公司PCR级绿如蓝染料(另售)1μL,混匀,稍离心。将反应管置于紫外透射仪或凝胶成像系统中,紫外灯下可见绿色荧光产生;
c)荧光定量检测。
5. 结果分析:
a)如果没有扩增,则需要用本试剂提供的阳性对照进行扩增。本试剂盒提供阳性对照,反应按下表设置:
| 成份 | 阳性对照管 |
| RT-LAMP Mix(2×) | 10μl |
| 对照引物混合物 | 4.0μl |
| 对照模板 | 1μl |
| AMV-Bst 混合液 | 1.5μl |
| 水 | 3.5μl |
混匀后,置于60℃保温120分钟,其余操作同上。注意:本对照引物中没有Loop引物,所以最好保温120分钟。
b)如果阳性对照能够扩增出,则说明试剂盒没有问题,可能是模板或引物的问题。如果阳性对照没有扩增出条带,则是试剂盒的问题,请跟厂家联*(代"系")。
注意事项:
1.引物设计对成功扩增十分关键。除用于SNP分型外,尽量以保守区设计引物。
2.引物至少包括F3/B3和FIP/BIP,加入环状引物F loop/B loop可以使反应速度大大提高。
3. 应优化引物序列、GC含量和尽量避免二级结构。
4.反应中各个引物的浓度及比例对扩增效果有一定的影响。
5. 建议先将所有引物混合在一起,配制成10.浓度以方便使用。
6. LAMP扩增具有特异性好、灵敏度高、时间快、不需要特殊仪器设备等优点。但太高的灵敏度使得其比普通PCR扩增更加容易污染导致假阳性。因此,必须高度重视扩增产物的污染。常规措施包括严格的实验分区、添加UNG和dUTP(可能导致反应效率下降)、使用荧光定量等不开盖检测方法。实验室一旦遭到污染,所有相关试剂必须全部更换,必要时还得更换实验室。
7. 要确证扩增的为目标基因,可以使用特定的限制性酶切和/或Southern杂交。
8. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床治疗、食品等用途。
生物素化的蛋白A北京价格关键词:Biotin-Protein A,BTN131099,生物素化的蛋白A
·大肠杆菌BL21 Star(DE3)化学感受态细胞
编号:BTN150801
英文名称:E.coli BL21 Star(DE3) Chemical Competent Cell
规格:10*100μL
BL21 Star(DE3)感受态细胞来源于BL21(DE3)菌株,由特殊工艺制作,使用pUC19质粒检测本产品,转化效率可达10⁷cfu/μg。
BL21 Star(DE3)菌株的特点是含有rne131基因突变体。rne131突变基因能够增强菌株细胞内mRNA的稳定性,从而有效提高蛋白表达能力。本产品主要适用于T7启动子表达载体(如pET 系列)的高水平蛋白表达。
菌株基因型为:F-ompT hsdSB(rB-mB-)gal dcm rne131(DE3)。
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、LB培养基等。
使用方法:
1.从-80℃冰箱中取出感受态细胞,置于冰上解冻。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,可以根据实际情况分装使用。以下实验以100μL感受态细胞为例。
2. 取 100μL冰上融化的BL21 Star(DE3)感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。
3. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
4. 向离心管中加入700μL不含抗生素的无菌培养基(LB),混匀后37℃,200rpm 复苏60分钟。
5. 取100μL左右菌液涂布于含相应抗生素的LB培养基上。如果转化高浓度的质粒,可以减少涂布的量。
6. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
生物素化的蛋白A北京价格关键词:Biotin-Protein A,BTN131099,生物素化的蛋白A
·烷基腺嘌呤DNA糖基化酶(AAG)
编号:BTN130643
英文名称:Alkyladenine DNA Glycosylase
规格:500U
人类烷基腺嘌呤DNA糖基化酶(hAAG)作用于烷基化和氧化了的DNA 损伤位点,包括3-甲基腺嘌呤、7-甲基鸟嘌呤、1,N6-乙*(代"烯")基腺嘌呤和次黄嘌呤。hAAG催化 N-糖苷键的水解断裂,释放受损碱基。其反应示意图如下:
产品特点:
1.单细胞凝胶电泳(彗星试验);
2.碱洗脱;
3.碱解旋。
产品组成:
| 组份 | 规格 |
| hAAG(10000U/mL) | 50μL |
| 10×Buffer | 1mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位是指在10μl反应体系中,37℃条件下,1小时从1pmol含有单一脱氧次黄嘌呤核苷位点的34bp寡核苷酸双链产生一个AP位点所需的酶量。
热失活:65℃,20分钟。
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文献和实验分子,再用电泳来表明实验结果。免疫-PCR的关键之处就在于用一个连接分子将一段特定的DNA连接到抗体上,在抗原和DNA之间建立相对应关系,从而将对蛋白质的检测转变为对核酸的检测。最初Sano等人建立的免疫-PCR实验流程如下:(1)再包被缓冲液稀释抗原BSSA,并固定在微滴定板上。(2)微滴定板上加入相应的已稀释的单克隆抗体,并洗去未结合的抗体分子。(3)加入稀释的已与生物素化PUC19的结合的链亲和素-蛋白A嵌合体(蛋白A能与抗体结合,而链亲和素可与生物素化PUC19中的生物素结合),并洗去未
主要程序(1) 抗原+生物素化抗体→抗原-生物素化抗体复合物;(2) 加亲合素→抗原-生物素化抗体-亲合素复合物;(3) 加生物素化DNA→抗原-生物素化抗体-亲合素-生物素化DNA;(4) PCR扩增生物素化DNA部分。实验步骤(1)制备生物素化DNA将噬粒 BLuescript skt,用生物素标记的M13引物进行PCR扩增制备出含T3和T7引物序列的280bp DNa段,即为生物素化DNA。(2)免疫PCR模式1. 试剂包被缓冲液:20mmol/L Tris-HCI(pH9.5),含
一、免疫PCR要点 (1)连接分子 免疫PCR需要适当的连接分子连接报告分子和抗原抗体复合物。1 992年Sano用重组的链亲和素-蛋白A嵌合体作为连接分子,创立了免疫PCR技术。该融合蛋白的蛋白A可结合抗体的Fc段,链亲和素可结合DNA分子上的生物素,Sano利用此连接分子把一段生物素化的DNA(PUC19质粒DNA)连接到固定在酶标板上的抗原
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