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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
634
- 英文名:
Protein Gel Midi-Extraction Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温运输,4℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")蛋白胶中量回收试剂盒哪里卖,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:蛋白胶中量回收试剂盒哪里卖
编号:BTN90403
英文名:Protein Gel Midi-Extraction Kit
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
十二烷基硫*(代"酸")*-聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)不仅可用于检测蛋白质的相对分子质量,而且也是分离纯化蛋白质的重要工具之一,随着蛋白质技术的微量化,有必要从凝胶中回收蛋白质以用于制备抗体、免疫印迹、*基酸组分分析或末端序列测定等。本产品就是专门为此用途开发的中量蛋白胶回收法。
产品特点:
1.简单,不需要复杂而昂贵的仪器(如电洗脱仪)。
2.适用于变性胶(SDS-PAGE)和非变性胶。
3.每次可以处理1g的PAGE胶(具体多少蛋白质取决于上样的浓度)。
4.回收率一般在50-90%之间(跟蛋白质大小,洗脱时间相关)。
5.跟后续的实验兼容,包括2-D电泳、质谱测序等。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 5ml |
| 溶液B | 50ml |
| 20mL塑料注射器 | 5只 |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.按常规方法进行变性(SDS-PAGE)或非变性蛋白电泳。
2.切取含目的蛋白的胶(尽可能地把多余的胶切除,否则会影响回收效率)。
注意:固定和染色后蛋白回收效果很差,所以建议把样品分多孔上样,电泳后只切其中一个样孔的胶条进行固定和染色,然后将此胶条放回到在整体胶中原来的位置,通过显色胶条上的蛋白条带找到在未染色胶上对应区域,并切下此区域的胶进行回收。
3.将切下的、重量不超过1 克的胶块转移到30mL塑料注射器中。
4.用塑料注射器推杆将胶块从端口挤压出去,使之变成细小的碎片,用自备的15mL塑料离心管收集这些破碎的凝胶颗粒。
5.加入1mL溶液A,4℃摇晃洗脱至少2-16小时(过夜)。此时最好将将要使用的溶液B放在冰箱预冷。
6.10000g离心10分钟,转移上清到新的10-15mL的塑料离心管中,注意不要吸取碎胶。
7.加入5倍体积的预冷的溶液B,摇晃混匀。
8.-20℃放置至少10-30分钟。
9.室温12000g(注意:一定要检查使用的离心管是否能够耐受次离心力,如果不能建议将溶液分到1.5mL的塑料离心管中再进行离心处理)离心5-20分钟,弃上清。
10.室温充分晾干,得到的沉淀即为回收的蛋白质。回收的蛋白质可溶解在适当的缓冲液中,可用于后续实验(2-D电泳、质谱测序等)。
想要了解更多关于蛋白胶中量回收试剂盒哪里卖的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
·盐*(代"酸")万古霉素溶液
编号:BTN120703
英文名称:Vancomycin Hydrochloride Solution
规格:10mL
本产品为浓度为50mg/mL的盐*(代"酸")万古霉素溶液。盐*(代"酸")万古霉素(万古霉素盐*(代"酸")盐;Lyphocin;Vancor),分子式:C66H76Cl3N9O24,分子量:1485.67,CAS号:1404-93-9。
作用机制:盐*(代"酸")万古霉素为窄谱抗生素,仅对革兰阳性菌有效。其作用机制是抑制细菌细胞壁的合成,它主要和细菌细胞壁结合,而使某些*基酸不能进入细胞壁的糖肽中。多用于在万古霉素-肽络合物中键强度的研究和植物细胞培养试验。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期6个月。
·DNA marker(λ/EcoRI+HindIII)
编号:BTN90602F
英文名称:DNA ladder(λ/EcoRI+HindIII)
规格:50次
本系列产品为传统的酶切分子量标准,由单一的质粒DNA或噬菌体DNA经单个限制性内切酶完成消化后,加热灭活而成。每次上样总DNA含量已知,每条带的含量可根据其摩尔数的比值计算出来。本系列产品成分中已经含有上样缓冲液,所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确,明亮清晰,背景较低,稳定性很好。
每次加样量为5μL,可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
使用方法:直接上样电泳,每次加样量为5uL。
使用效果:
疑难解答:
a)如对带型要求较高,建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液,电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液,电压为80V),同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖,同时要经常更换电泳缓冲液。
蛋白胶中量回收试剂盒哪里卖关键词:蛋白胶中量回收试剂盒,Protein Gel Midi-Extraction Kit,BTN90403
赤藓糖醇 Bind-Silane 149-32-6
ARB12538 大鼠胰岛素自身抗体(IAA)elisa测定使用说明书 Rat insulin autoantibodies,iaa ELISA KIT
PY02-027 G-N增菌培养基 250克
单硬脂酸甘油酯 Actin from rabbit muscle 123-94-4
FMOC-L-色*酸 D-Pyroglutamic acid 35737-15-6
BL1197 结晶紫染色液(2.5%)
DNA中和缓冲液Ⅰ 100ml
ARB13348 牛三碘甲状腺原*酸(T3)elisa检测说明书
NF-259 冻干抗人B因子血清
SJ0830 乙酸纤维素
F030212 HRP标记山羊抗兔IgG抗体 Goat Anti-Rabbit IgG*HRP
ARB11621 人粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)Elisa方法检测 Human mucin-5 subtype ac,muc5ac ELISA KIT
DL-酒石酸 Ammonium ferric oxalate 133-37-9
蛋白胶中量回收试剂盒哪里卖关键词:蛋白胶中量回收试剂盒,Protein Gel Midi-Extraction Kit,BTN90403
·Tris饱和酚-*仿-异戊醇混合液(DNA提取用)
编号:BTN100805B
英文名称:Phenol-Chloroform-Isoamylol
规格:250mL
本产品是Tris饱和酚和*仿和异戊醇的25:24:1的预混液,可以替代Tris饱和酚,用于抽提核酸,去除其中的蛋白质和脂溶性物质。跟Tris饱和酚相比,它不再需要*仿抽提。同时使用本产品不容易产生倒相现象(就是*酚相在上层,水相在下层)。A型pH<5.0,为RNA提取专用;B型pH>7.8,为DNA提取专用。
储存条件:常温运输和保存、避光。有效期一年。
相关知识:
Q:*酚提取法的局限在哪里?
A:酚提取法的局限是不能去除核酸以外的其他水溶性的多糖和糖蛋白(Howe曾经用酚提取法来提取糖蛋白,文献见Meth. Enzymol. 28,236,1972),所以在用酚提取+醇沉淀法从富含多糖的样品(如植物)和富含糖蛋白的样品(如血液、软骨)中提取DNA或RNA时,很容易产生多糖污染。
Q:离心后为何*酚相消失?
A:酚跟水互溶,互溶比例跟温度、离子强度、去污剂浓度相关有时(如65℃时)可以达到彻底互溶。酚相消失可能就是上述原因造成,由于液体成本一般不能随意改动,所以解决办法一是用冷冻离心机、二是增加酚的用量、三是直接使用酚-*仿-异戊醇混合液,将酚抽提和*仿抽提合二为一。
Q:饱和酚为何呈淡黄色或棕色?
A:*酚本身是无色,但为了防止其氧化,一般加入了一定比例的抗氧化剂8-羟基喹*(代"啉"),后者是淡黄色或棕色(取决于浓度),所以酚也呈淡黄色或棕色。
·柱式细菌DNA提取试剂盒
编号:BTN60802A
英文名称:Bacteria DNA column extraction kit
规格:50次
本试剂盒可以用于绝大多数革氏阳性和阴性细菌基因组DNA的快速提取。
试剂盒特点:
1. 操作简单,整个过程不到20分钟。
2.产率一般在5-20μg/mL过液培养的饱和菌液(108-109个细胞)。
3. OD260/280一般在1.8以上,可直接用于PCR、酶切、杂交等实验。
4. DNA片段长度一般在40-50 Kb左右。
5. 每次提取可以处理0.1-1.5mL的细菌,也可以使用菌落。
6. 价廉物美,与国外同类产品相比质量相当,但价格便宜。
7. 安全无毒,本试剂盒对人体无害,无腐蚀性和刺激性气味。
8. 本产品分A型(无溶菌酶,适用于革氏阴性细菌)和B型(含溶菌酶,适用于革氏阳性细菌)。
试剂盒组成:
| 成分 | A型 | B型 |
| 溶菌酶干粉 | 无 | 600mg |
| 溶液A | 15ml | 15ml |
| 溶液B | 7.5ml | 7.5ml |
| 溶液C | 30ml | 30ml |
| 离心吸附柱 | 50套 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml | 50ml |
| DNA洗脱液2.0 | 10ml | 10ml |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存(溶菌酶需要-20℃保存),有效期一年。
使用方法:
注意:溶液A和溶液B容易产生沉淀,溶液B十分粘稠,均需要放置在65℃预热使沉淀溶解、粘稠度降低,用前充分摇匀。
一: 对革氏阴性细菌样品,只需用A型
1. 将0.1-1.5mL过夜培养的菌液转移到1.5mL离心管中,12000rpm室温离心1min沉淀细菌,弃上清。
2. 加入300μL预热的溶液A到细菌沉淀中,充分吹打均匀。
3. 再加入150μL预热的溶液B到离心管中,颠倒数次混匀。此时溶液中可能有白色丝状悬浮物产生。由于溶液B比较粘稠,可以采取称量方法取用,150μL约等于150-160mg。也可以将1mL枪头剪去一截再吸取。
4. 65℃放置3~5分钟。如果室温放置,DNA产量会降低10-20%。
5. 加入200μl自备*仿,震荡混匀10-30秒,此时溶液将呈乳白色。
6. 12000rpm室温离心2分钟。此时上清液将变得透明,中间层有白膜。小心转移上清液到一个新的1.5mL塑料离心管中,避免触及中间层的白膜。
7. 加入1.5倍体积(约0.7mL)的溶液C,颠倒混匀后全部转移到离心吸附柱中,室温放置至少2分钟。
8. 12000rpm室温离心1分钟,DNA将吸附在离心吸附柱的膜上,倒弃收集管中的穿透液。
9. 将0.5mL通用洗柱液加入离心柱中,12000rpm室温离心1分钟,弃穿透液。
10. 重复上步操作一次。
11. 空甩半分钟去除残留液体,将离心吸附柱转移到新的1.5mL离心管中。
12. 加50-100μL通用洗脱液,室温放置3~5分钟。
13. 12000rpm室温离心1分钟即得DNA溶液。
14. 由于本产品使用的离心吸附柱吸附DNA的能力较强,可以重复上步操作一次以便得到更多的DNA。
15. 直接取5-10μL电泳检测DNA,其余放冰箱备用。
二: 对革氏阳性细菌样品,需用B型(含溶菌酶)
1. 将0.1-1.5mL过夜培养的革氏阳性细菌12000rpm室温离心1分钟后,重悬于0.6mL溶菌液中(溶菌液配制:30mL无菌水+600mg溶菌酶,配制后最好分装成小管并放-20℃长期保存,每次只用一小管),颠倒混匀5-10次后放37℃保温至少30分钟(有的革氏阳性菌种可能需更长时间,自己摸索)。
2. 12000rpm室温离心10分钟,小心弃上清。
3.后续处理接上面的革氏阴性细菌提取步骤中的第2步。
三:其他注意事项
1.可以直接使用细菌菌落提取DNA,操作时直接将细菌菌落挑入到溶液A中,后续操作同上。
2.从单个菌落中提取到的DNA较少,所以只用30μL通用洗脱液洗脱。
使用效果:
图注:用本产品提取1.0mL过夜培养的E.coli Tg1细菌,DNA最后溶于100μL TE中,取20μL上样。M表示全长的λDNA,其余均为提取的样品DNA。
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文献和实验简单,可以购买一个凝胶PCR产物回收试剂盒,国产的就很好、价格也合理,比如TIANGEN的产品(用过)。把切下来的胶按说明书操作即可。 几个细节: 1:PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,要使用新配的电泳液。凝胶浓度1%-2%均可。 2:凝胶DNA回收时在300nm紫外灯下观察条带位置,切取目的片断所在位置的凝胶,尽量小,保证特异性。 3:紫外照射时间不能过长,否则对DNA有损伤。 4:回收后的DNA如不马上用就储存于-20度,在数月内是很稳定的。 第六部分 PCR产物与T载体的连接
简单,可以购买一个凝胶PCR产物回收试剂盒,国产的就很好、价格也合理,比如TIANGEN的产品(用过)。把切下来的胶按说明书操作即可。 几个细节: 1:PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,要使用新配的电泳液。凝胶浓度1%-2%均可。 2:凝胶DNA回收时在300nm紫外灯下观察条带位置,切取目的片断所在位置的凝胶,尽量小,保证特异性。 3:紫外照射时间不能过长,否则对DNA有损伤。 4:回收后的DNA如不马上用就储存于-20度,在数月内是很稳定的。 第六部分 PCR产物与T载体的连接
的仪器“脾气”也不一样,但EP管必要和仪器内的插孔紧密结合方好,留有空隙,我认为会影响温度的传递。 五、PCR产物的凝胶回收 这一步比较简单,可以购买一个凝胶PCR产物回收试剂盒,国产的就很好、价格也合理,比如TIANGEN的产品(用过)。把切下来的胶按说明书操作即可。 细节: 1. PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,要使用新配的电泳液。凝胶浓度1%-2%均可。 2. 凝胶DNA回收时在300nm紫外灯下观察条带位置,切取目的片断所在位置
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