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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
540
- 英文名:
RNase A Solution(2mg/mL)
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京RNase A溶液(2mg/mL)品牌,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京RNase A溶液(2mg/mL)品牌
规格:1.5mL
品牌:百奥莱博
编号:BTN60309
英文名:RNase A Solution(2mg/mL)
本产品是浓度为2mg/mL的RNase A溶液,不含DNase和蛋白酶活性,可以用于DNA提取(包括质粒DNA提取)时和蛋白质纯化时去除RNA污染。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
更多有关北京RNase A溶液(2mg/mL)品牌的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·大肠杆菌Rosetta(DE3)plysS感受态细胞
编号:BTN130558
英文名称:E.coli Rosetta(DE3)plysS Rosetta Competent Cell
规格:0.1mL*10
Rosetta(DE3)pLysS是Rosetta(DE3)的衍生菌株,为高度严紧表达宿主菌,一般用于毒性含真核蛋白靶蛋白表达,lac透性酶突变,可以控制表达水平,提供稀有密码子tRNAs。抗性为*霉素(34μg/ml)。
基因型:F-ompT hsdSB(rB- mB-)gal dcm lacY1(DE3)plysS pRARE(CmR)。
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
·DNA快速连接试剂盒
编号:BTN70602
英文名称:Rapid DNA Ligation Kit
规格:100次
DNA连接反应通过T4连接酶催化双链DNA的3´-OH和5´-P形成磷酸二脂键而将DNA共价连接在一起。被连接的DNA末端可以是粘末端(例如限制性切割EcoR I产生的末端),也可以是平末端(限制性切割Sma I产生的末端)。Pheiffer等人发现PEG可以促进T4 DNA连接酶催化的连接反应[NAR,11,7853-7871,1983],连接反应只需十分钟即可完成。
产品特点:
1.超快,整个连接反应只需要室温5分钟左右,反应液可以直接用于转化实验。
2.高效,溶液配方经过优化,每ug 插入DNA连接转化得到的重组子可达107左右。
3. 既可用于平末端连接,也可用于粘末端连接,包括PCR产物与T载体的连接。
4. 简单,客户只需要提供载体和插入片段即可。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 500μl |
| 溶液B | 100μl |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一:连接反应
1.在无菌的离心管中严格按下表顺序加入列各成分(以10μl 体系为例):
| 成分 | 阴性对照管 | 样品管 |
| 溶液A | 5μl | 5μl |
| 插入片段(自备) | - | 0.2-0.5μg(注) |
| 载体(自备) | 50ng | 50ng |
| 无菌水 | 补水到9μL | 补水到9μL |
注:插入DNA片段的摩尔数最好是载体的3-10倍,如果载体长度为3000bp,则所需插入DNA片段折合成重量(ng)=(插入DNA片段bp 数×50 ng×N)÷3000bp。N就是自己选定的插入DNA片段与载体的摩尔比。
2. 最后在每管中加入1μl溶液B,轻柔吹打混合均匀后用微量离心机将液体全部甩到管底。
3.室温放置至少5分钟,最长可以放置过夜。
4. 70℃保温10分钟。此步可以灭活有关的酶,否则转化效率有所降低。
5. 根据使用的转化方法,每管各取适量用于转化实验,余下的放置在-20℃保存。
二:细菌转化及筛选(仅供参考,本产品不提供相关试剂)
6. 将100μl转化效率在1×108 cfu/μg以上的感受态细胞于冰上解冻。
7. 取5-10μl连接产物加入到感受态细胞中,轻轻旋转几次以混匀。
8.在冰上放置30分钟。
9. 将离心管放42℃热休克90秒,然后快速将其转移到冰浴中放置1~2分钟。
10. 每管中加900μl LB培养基,37℃振荡培养1小时复苏细胞。
11. 将100μl 复苏涂布到含Amp的LB 琼脂平板上(根据载体情况也可能需要加上X-gal和IPTG)。
12.室温4,000rpm离心剩余的900μl 复苏细胞5分钟,弃去800μL上清,用剩余100μl培养基重悬细胞并涂布到含Amp的LB 琼脂平板上(可加X-gal、IPTG)。
13. 将平板置于室温直至液体被吸收。此步非常重要,否则培养板将在37℃排除水分,细菌将随水在培养基上到处游动,不能形成单个菌落。
14. 倒置平皿,于37℃培养,12~16小时后可出现菌落。一般情况下阳性对照组会有上千个菌落(100μl转化液产生的菌落数×10),自联对照只有少数几个菌落,样品组的菌落数取决于PCR 回收片段的质量。
15. 按常规方法筛选重组子。
北京RNase A溶液(2mg/mL)品牌关键词:RNase A Solution(2mg/mL),RNase A溶液(2mg/mL),BTN60309
·MALDI蛋白样品处理试剂盒
编号:BTN111007
英文名称:MS Sample Preparation Kit
规格:500次
本产品用于基质辅助激光解吸离子化(Matrix Assisted Laser Desorption Ionization)分析,所含的基质液是MALDI分析的必不可少的关键成分,其主要作用一是起到分子溶剂的作用,使样品分子分开,但又不会使蛋白质发生共价修饰;而是能从激光脉冲中吸收能量,使蛋白质发生瞬间相变,用于质谱分析。
产品特点:
1.即开即用,用户不需要单独准备各种成分。
2.经过优化,可用于各种样品的MALDI分析。可以选择CCA(羟基*丙*(代"烯")酸)、DHB(2,5-二羟基*甲*(代"酸"))和SA(芥子酸)三种不同的基质。
CCA适用于分子量在5Kd一下的蛋白质和多肽分析(肽指纹图谱);
DHB适合于一般蛋白质、多肽、低聚糖、脂和合成多聚物的分析;
SA适合分子量在3Kd-150Kd的蛋白质分析。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| MS专用溶解液 | 50ml |
| 基质液成份一 | 50mg |
| 基质液成份二 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
使用方法:
一、样品准备
1.将蛋白样品真空冻干后加入MS专用溶解液100μL,溶解半小时(期间可以按下步配制基质液)。蛋白质的终浓度最好在1-10 pmol/μL之间。如果是Reverse-Phase-HPLC制备的样品,则可以不加MS专用溶解液而直接使用。注意:一定要在蛋白质样品真空冻干前将其中的缓冲液、盐、去污剂和变性剂等去除,否则它们会严重影响蛋白质晶体的形成,没有蛋白晶体的形成就不能进行MALDI分析。
2.称量1mg左右的基质干粉到一干净的EP管中,按每mg CCA加100μL基质液成份二的比例加入基质液成份二,混匀后离心。注意:此是用于结晶用的饱和溶液,可能有沉淀,故需要离心。注意:基质液最好新鲜配制。本试剂盒提供50mg,足够配50次 200μL的基质液。
3.选用下面两种上样法之一上样。也可以自选其他的上样方法。
二、Dried-Droplet法上样
1.将1μL蛋白质样品与1μL新配的饱和基质液混匀。注意:可以多做几个不同的蛋白质样品和基质液的比例,在1:1-10:1均可。
2.用移液器将1μL混合液点到MS仪器的样品靶上,让液体在室温下挥发干净。注意:不要有气泡,枪头也不要触及靶面,也不能搅动上样后的混合液,在未结晶之前不要摇晃。样品靶必须充分清洗干净,以免上次试验的残留样品的干扰。
3.如果样品中含有非挥发性杂质,在此步可以用自备的MilliQ水洗涤晶体一次。
4.将样品靶插入质谱仪内,后续操作按MALDI-TOF仪器使用手册进行。
5.同样方法处理自备对照样品(一般仪器厂家提供)。
三、Thin-Layer法上样
1.用移液器将1μL基质液点到MS仪器的样品靶上,在基质液挥发前迅速进入下一步操作。
2.迅速用移液器将1μL样品点到MS仪器的样品靶上,让液体在室温下挥发干净,一般需要5分钟。
3.将样品靶插入质谱仪内,后续操作按仪器使用手册进行。
4.同样方法处理自备对照样品(一般仪器厂家提供)。
5.同样方法处理标准品(仪器厂商提供)。
北京RNase A溶液(2mg/mL)品牌关键词:RNase A Solution(2mg/mL),RNase A溶液(2mg/mL),BTN60309
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