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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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阴凉干燥
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
BTN101107型20%CTAB溶液(DNA级)现货促销的品牌:百奥莱博,是优质的生化试剂产品,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多20%CTAB溶液(DNA级)等生化试剂产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:BTN101107型20%CTAB溶液(DNA级)现货促销
品牌:百奥莱博
编号:BTN101107
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BTN70902 甜菜碱溶液,5M,PCR级 Betaine Solution, PCR Grade
DP338 N96 植物基因组DNA提取试剂盒
BL1314 Pfu DNA Polymerase
BTN120406 柱式植物叶绿体DNAOUT Column Plant Chloroplast DNAOUT
乙基橙指示剂 100ml
草酸亚铁二水合物 Linoleic acid 6047-25-2
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去离子水
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BTN101107型20%CTAB溶液(DNA级)现货促销关键词:DNA级,百奥莱博,20%CTAB溶液,20%CTAB溶液(DNA级),BTN101107
·ROX内参染料(25μM)
编号:BTN100931
英文名称:ROX Reference Dye,25μM
规格:200μl
·柱式酵母质粒DNA提取试剂盒
编号:BTN70202
英文名称:Yeast plasmid DNA column extraction kit
规格:50次
本试剂盒是专门用于提取酵母质粒DNA的产品(不适用于酵母dsRNA质粒)。本产品根据酵母细胞壁十分坚硬的特点,在细菌质粒碱裂解法的基础上,增加了高效裂解酵母细胞壁的预处理步骤,可在1小时左右得到可以用于PCR或转化酵母质粒DNA。
试剂盒特点:
1.快速,整个过程只需要一个小时左右,可同时处理多个样品。
2. 得到的酵母质粒DNA 纯度高,可直接用于转化和PCR等实验。
3.可以从平板上的菌斑或液体培养的酵母中抽提质粒DNA。
4. 安全,不需使用玻璃珠、酚、*仿等试剂。
5. 每5-10mL 酵母培养液一般可以提取到1μg左右的高拷贝酵母质粒DNA。
6. 即开即用,经济实惠,客户自己不需要准备额外的试剂。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 30ml |
| 溶液B | 13ml |
| 溶液C | 13ml |
| 溶液D | 18ml |
| 破壁酶 | 50mg |
| RNase A溶液10mg/mL) | 0.15ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脱液2.0 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存(RNase A溶液4℃保存),有效期一年。
使用方法:
1. 将5-10mL 酵母过夜液体培养物分多次转移到1.5mL塑料离心管中。每转移一次后,需要12000~15000×g室温离心1分钟,然后吸弃液体培养基。注意:不要使用培养时间超过16小时的酵母液体培养物,否则质粒DNA产量偏低;也不要使用超过10mL的酵母液体培养物,否则破壁不充分,降低质粒DNA产量。
2. 加入1mL自备的无菌水,充分震荡混匀,12000~15000×g室温离心1分钟,吸弃上清。
3. 加入600μl溶液A,充分震荡细胞沉淀重悬,95℃保温10分钟。
4. 12000~15000×g室温离心1分钟,弃上清液。
5. 加入250μl含破壁酶的溶液B(配制方法是将本试剂盒提供的50mg 粉末状的破壁酶和0.15mL RNase A溶液全部加入到装有13mL溶液B的塑料瓶中,轻柔摇晃混匀后使用。未用完的部分需要分装成小份然后放-20℃保存,否则破壁酶很容易失去活性),吹打混匀。
6. 37℃保温30分钟,延长保温时间到60分钟有利于细胞壁的裂解。注意:放置较长时间后,溶液B中的裂壁酶会逐渐失活,额外再加入一些裂壁酶(如蜗牛酶、Lyticase、Zymolyase、Lywallzyme等,总浓度为1mg/mL)可以极大提高产量。
7. 将离心管放冰浴冷却后,加入250μl溶液C,轻轻颠倒混匀直至裂解液变得澄清,然后室温放置5-10分钟。注意:不要剧烈震荡,否则基因组DNA 将断裂并污染质粒DNA。
8. 加入350μl溶液D,轻轻颠倒混匀几次,管内将出现白色沉淀物,然后冰浴放置10-30分钟(如果质粒较长,最好放置30分钟)。
9. 12000~15000×g室温离心6-10分钟,将上清液转移到离心吸附柱中。
注意:不要将漂浮在液面的沉淀物(如果有的话)转移到离心吸附柱中。上清液可以分多次转移。
10.室温下放置至少2分钟以让质粒DNA 充分结合到离心吸附柱上。
11.12000~15000×g室温离心1分钟,弃穿透液。
12. 将500μl 通用洗柱液加入离心吸附柱中,12000~15000×g室温离心1分钟,弃穿透液。
13. 重复上步操作一次。
14.12000~15000×g室温离心1分钟去除离心吸附柱中残留液体。不要此步省略,否则残留洗液将影响后续的电泳、PCR和转化实验。
15. 将离心吸附柱套在一干净的1.5mL塑料离心管中,加入30-100μl DNA 洗脱液2.0(加入的量取决于预期的DNA浓度)至离心吸附柱的膜的中央。
16.室温下放置至少2分钟。
17.12000~15000×g室温离心1分钟以洗脱DNA。
18. 如有必要,可以再加入适量DNA 洗脱液2.0洗出残留的DNA。第二次洗脱得到的DNA的产量约为第一次的30-50%。不要将已经洗脱的、含DNA的溶液再加上去。
BTN101107型20%CTAB溶液(DNA级)现货促销关键词:DNA级,百奥莱博,20%CTAB溶液,20%CTAB溶液(DNA级),BTN101107
我公司是一家生物高新技术企业,主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发、销*(代"售")。致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供一流的科研试剂和完善的技术服务,满足生物化学、分子生物学 、20%CTAB溶液(DNA级)、细胞生物学、免疫学ELISA试剂盒等生物科技实验需求。我们诚以100%的热情换您100%的满意!
·dITP溶液(2.5mM)
编号:BTN130918
英文名称:dITP Solution(2.5mM)
规格:2mL
dITP(脱氧三磷酸次黄嘌呤核苷),分子式为C10H12N4O13P3Na3,分子量是558.1,消光系数为12.2×103 M-1×cm-1(pH7.0),λmax为249nm。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
·随机引物法DNA探针标记试剂盒
编号:BTN90603A
英文名称:Random Primer DNA Labeling Kit
规格:5次
本试剂盒是基于Feinberg和Vogelstein发明的随机引物标记法而开发出来的即用型DNA探针标记试剂盒,标记过程由双链DNA热变性、随机引物与单链DNA结合、在Klenow DNA聚合酶催化下,引物的延伸合成DNA探针并掺入标记的核苷酸三步组成,可用下面的示意图表示:
本产品对Feinberg和Vogelstein经典方法进行了改良。
产品特点:
1. 提供的标记反应液整合了除酶和模板外的所有成分,简化了反应加样步骤,提高了标记反应的可重复性。
2. 使用无外切活性的Klenow exo- DNA聚合酶,已标记DNA探针不会被酶降解。
3.快速,最快1小时即可完成标记反应。
4. 得到的DNA探针比活性高(如果是同位素,可以达到109cpm/μg DNA),检测灵敏度高。
5. 所需模版DNA量少(只需要10ng以上即可),DNA可以是各种形状(线状和环状)的、也可以是单链或双链的,长度在100bp以上均可。
6. 得到的探针长度在200-400nt之间,可以用于Southern杂交、Northern杂交、原位杂交、菌落和斑点印迹杂交等。
7. 提供三种标记选择,其中BTN90603A可用于各种同位素标记和其他任何非同位素标记,但需自备标记底物;BTN90603B和BTN90603C可分别用于生物素和地高*(代"辛")标记,不需自备标记底物。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 2×A型标记反应液(自备标记物型) | 50μl(仅A型有) |
| 2×B型标记反应液(生物素型) | 50μl(仅B型有) |
| 2×C型标记反应液(DIG型) | 50μl(仅C型有) |
| dATP,2mM | 10μL(仅A型有) |
| dTTP,2mM | 10μL(仅A型有) |
| dGTP,2mM | 10μL(仅A型有) |
| dCTP,2mM | 10μL(仅A型有) |
| Klenow exo-聚合酶(2U/μL) | 5μl |
| 超纯水 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.在一干净的硅化的塑料离心管中加入下列成分:
| 成分 | 用量 |
| 模板DNA | 50-150ng |
| 2×标记反应液(ABC三种之一) | 10μl |
| 超纯水 | 补水到15μl |
注意:非同位素标记物由于疏水性强,容易与常用的塑料离心管表面非特异性结合,所以一定要使用硅化的塑料离心管。模板DNA并非越多越好,因为模板会在杂交反应中跟标记的探针杂交,竞争性地抑制探针跟靶分子的杂交。
2. 沸水浴5-10分钟,或在PCR仪上100℃加热5-10分钟使DNA模版充分变性,立即放冰上待用。注意:如果PCR仪器不能设置到100℃,99℃加热5分钟也可。
3.高速离心数秒使所有液体集中在管底,根据试剂盒类型加入下列成份:
| 试剂盒类型 | 成分及用量 |
| BTN90603A型 | dATP、dGTP、dCTP各1μl(共3μL,浓度均为2mM) 自备的2mM dTTP/标记dUTP混合物(见注)1μL 1μl Klenow exo聚合酶 |
| BTN90603B型 | 1μl Klenow exo聚合酶 4μl超纯水 |
| BTN90603C型 | 1μl Klenow exo聚合酶 4μl超纯水 |
注:上表中的dTTP/标记dUTP混合物中dTTP和标记的dUTP的总浓度为2mM(在20μL体系中混合液的终浓度为0.1mM,dTTP与生物素或DIG标记的dUTP的比例最好为65:35)。由于空间阻碍,并非标记生物素或DIG标记的dUTP越多灵敏度越高,一般dTTP与标记dUTP的比例在65:35为最佳。但如果使用自备的其他标记核苷酸,如fluorescein、hydroxycoumarin、resorufin和aminoallyl标记的dUTP,则用户需要自己摸索其与dTTP之间的最佳比例,如果使用32P标记的dUTP,则比活最好为3000Ci/mmol,浓度为好为10uCi/μL,并且不需要加入dTTP。
4. 轻柔吹打混匀。如有液滴沾在管壁上,高速离心数秒使所有液体集中在管底。
5. 37℃保温1-20小时。标记效率跟模版量和保温时间相关,具体见下表:
| 模版DNA用量 | 1小时后探针合成量 | 20小时后探针合成量 |
| 10ng | 80ng | 900ng |
| 30ng | 150ng | 1.35μg |
| 100ng | 350ng | 1.65μg |
| 300ng | 750ng | 2.2μg |
| 1μg | 1.3μg | 2.6μg |
| 3μg | 1.6μng | 2.6μg |
6. 加1μl自备的0.5M EDTA(pH8.0)终止反应,立即放冰上待用或放-20℃保存一年。用前需要加热100℃ 5分钟使DNA探针变性成单链,然后直接加入到杂交反应液中即可。如果电泳检测,标记产物将是弥散状态。
注意:本方法标记核苷酸掺入率极高,因此可以不经纯化直接使用。如果需要纯化,注意不要用酚抽提法纯化非同位素(生物素、DIG和其他等)标记的DNA探针,因为这些标记分子疏水性强,能使标记的DNA进入疏水的有机相而丢失,但可以用乙醇沉淀和Sephadex G50回收(可另购非同位素探针柱式纯化试剂盒)。对比活高的同位素探针,由于其极其不稳定,因此应该立即使用,不要长久放置。
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、生物薄膜、植物组织等样品一起被提取出来的有机抑制因子会影响波长260测量DNA得率读数的准确性(也抑制 PCR扩增)。如果采用CTAB法或苯酚氯仿法提取,降解的小分子RNA也会影响读数。没有使用抑制因子去除技术的硅胶离心柱型试剂盒、使用强力绑定盐溶 液无差别地绑定吸附DNA和RNA等因素同样影响得率检测数据。 好消息是,一旦这些影响因素被去除,最新的读数才代表真正的得率 下 面来看一下在实验室常规检测手段(分光光度法和琼脂凝胶电泳)下DNA的情况是如何被展示的。从分光
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