凋亡DNA提取试剂盒 DNA纯化

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百奥莱博专业生产销*(代"售")凋亡DNA提取试剂盒 DNA纯化，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：凋亡DNA提取试剂盒 DNA纯化
规格：24次
编号：BTN130812
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
细胞凋亡是生命个体中的调控基因为了维持个体生命，调控细胞进行新陈代谢，促使不需要的细胞或者具有危险性的细胞自我凋亡(自杀)的现象，与细胞的发生、分化、生理现象(特别在免疫方面)有着密切关系。细胞凋亡时，染色体DNA以核小体为单位(185bp)进行DNA片断化产生DNA Ladder，这些被片断化了的DNA片段，可以使用电泳的方法进行检出。本试剂盒能够从培养细胞中选择性地提取片断化DNA，能够最大限度地抑制起妨碍作用的完整的染色体DNA的混入，并可以通过电泳法进行高效检出。

产品特点：
1.操作简便：使用Ready-to-Use型试剂。
2.高灵敏度：能够高灵敏度地检出凋亡细胞的片断化DNA。
3.高特异性：抑制完整的染色体DNA的混入，选择性地提取片段化DNA。
4.快速操作：整体操作约需2.5小时。
5.定量性：与荧光色素组合可以对片断化DNA进行定量。
6.安全性：不使用*酚*仿等。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	120ml
溶液B	1ml
溶液C	120μl
RNase A溶液(2mg/mL)	60μl
Proteinase K溶液(10mg/mL)	30μl
微量核酸沉淀剂	3ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.冰上操作，将细胞样品(106-107)重悬于0.5mL Hanks平衡盐溶液(自备)或其他常用细胞缓冲液中。
2.将细胞重悬液与5mL溶液A混合，轻柔颠倒混匀后冰上放置4小时。如果暂时不用，可在-20℃最长保存四周。
3.800g离心5分钟，彻底移弃上清。
4.在细胞沉淀中加入40μL溶液B重悬细胞沉淀，室温放置至少30分钟，期间摇动数次。为方便离心，可将细胞重悬液转移至新的0.5mL或1.5mL Eppendorf离心管中，
5.800g离心5分钟，将上清移入到新的Eppendorf管中，并在SpeedVac上真空离心浓缩15分钟。
6.向浓缩物中加入5μL溶液C和2.5μl RNase A溶液(2mg/mL)，混匀后37℃保温30分钟。
7.再加入1μl Proteinase K溶液(10mg/mL)溶液，37℃保温30分钟。
8.加5μl电泳上样缓冲液(自备)，常规0.8%琼脂糖电泳分离、EB染色并观察电泳条带。
9.如果所得凋亡DNA溶液需要纯化(溶液中有proteinase K等)，需要继续纯化，则加入50μL酚*仿混合液(自备)，震荡3分钟混匀，13000g离心3分钟后转移上清到新离心管中，再加入2倍体积(约100μL)微量核酸沉淀剂，混匀后13000g离心15分钟，弃上清，再用1mL 75%的乙醇洗涤一次，空气放干后加入适当体积的水或TE溶解沉淀，所得溶解即凋亡片段DNA溶液。

使用效果：

使用本产品提取细胞DNA效果图。M为DNA Marker，最大条带1.3Kb。
1为正常非凋亡细胞DNA。2为凋亡细胞DNA。

更多有关凋亡DNA提取试剂盒 DNA纯化的价格及使用说明等，请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：
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*酚水溶液  5% 100ml
ARB13049 小鼠表皮生长因子(EGF)含量检测 Mouse epidermal growth factor，egf ELISA KIT
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·酪蛋白溶液(PBS)
编号：BTN131105B
英文名称：Casein Blocking Solution(PBS)
规格：250mL
即用型酪蛋白(1%)用于封闭非特异性位点。
A型：溶于TBS的Hammarsten级酪蛋白，Kathon防腐剂，pH7.4。
B型：溶于PBS的Hammarsten级酪蛋白，Kathon防腐剂，pH7.4。可用于在使用牛奶封闭背景高时作为替代品使用。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·菌落PCR试剂盒2.0
编号：BTN50901
英文名称：Colony PCR Kit 2.0
规格：50次
菌落PCR是筛选重组子的有效方法，可以使质粒鉴定过程从两天缩短到几小时。但由于它直接以E.coli菌落为PCR而菌落中常常含有未进入细菌的、来源于连接反应的载体DNA和插入片段，所以十分容易产生假阳性。本产品针对此缺点进行了改良。

产品特点：
1. 无假阳性率，特殊的溶菌方式能有效降低菌落中未转化DNA 对PCR的干扰，使假阳性率低于5%，远低于绝大部分同类产品。
2. 简单快速，用户只需要提供PCR引物和E.coli菌落，不需要细菌培养和质粒提取,整个筛选过程从一天缩短到2-3小时，节约时间和成本。本产品与常用E.coli菌株和载体兼容。既可小规模筛选，也适用于大规模筛查。
3.高灵敏度，既可用于高拷贝质粒，也适合于低拷贝质粒。
4. PCR反应体系中含有惰性电泳染料，反映完成后可直接上样电泳，不需另加上样液。
5.处理过的菌落样品低温长期保存后仍能用于PCR 筛查。
6. 性价比高，价格跟质粒提取试剂盒相当，但节约一天时间。
 

成分	规格
溶菌液A	0.5ml
溶菌液B	0.1ml
PCR 2.0	0.75ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 标记1.5mL塑料离心管，除样品管外，还必须加上阳性和阴性对照管。
在每个管中加入下列成份配制100μL 溶菌液：

H2O(自备)	88μl
溶菌液A	10μl
溶菌液B	2μl
合计	100μl

2. 用无菌牙签或无菌移液枪头从培养皿上挑取一个菌落或部分菌落，放入溶菌液中，充分震荡直到菌落彻底分散混匀。为方便回查，最好在培养皿上给已取样的菌落做好标记。
3. 重复第2 步直到待筛查菌落全部转移到相应的离心管中。
4.在阳性对照管中，加入已知含有待筛选质粒的菌落；如果没有此菌落，直接进入第6 步，用连接反应液直接作PCR的阳性对照。
5.在阴性对照管中，加入已知的不含有待筛选质粒的任何E.coli菌落(如常见的宿主细菌)，其他处理同第2 步。
6. 将所有离心管置于37℃保温30分钟，然后转入100℃水浴处理10分钟。振荡混匀溶液数秒后10,000 g离心1分钟，转移上清到一新的离心管中待用。此溶液为样品DNA溶液。
7. 标记与第1 步数量相同的PCR 管，每个管中分别加入下列成份并充分混匀：

样品DNA溶液	1-5μl
PCR MagicMix	15μl
引物1(10 pmol/μL)	1μl(自备)
引物2(10 pmol/μL)	1μl(自备)
Taq物DNA聚合酶(5U/μL)	0.2-0.4μL(1-2U)
补水到	30μl

 注意:引物选择有三种情况，
 一是选用商品化的能与多克隆位点两边顺序结合的通用引物(如T7、T3、SP6等)；
 二是使用用户自己合成的能与插入片段结合的引物(如果插入片段是PCR产物，引物是现成的)；
 三是组合第一种情况和第二种情况的引物。选择前两种引物在筛查到重组子后还必须用其他方法(如质粒制备后酶切或使用载体引物/插入片段引物PCR)进一步确定插入方向。选择第三种引物则可以同时完成重组子筛选和DNA 插入方向确定两项工作。用户可以根据自己的具体情况选择。
8. 将PCR 管放入PCR 仪器中进行扩增，PCR 温度参数根据引物和模板情况由客户自己预先确定。
9. PCR结束后取10μl电泳直接进行琼脂糖电泳分析。(注：本试剂盒提供的PCR buffer中已经含有电泳染料和甘油，故可以直接上样)


凋亡DNA提取试剂盒 DNA纯化关键词：BTN130812,Apoptotic DNA extraction kit,凋亡DNA提取试剂盒

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