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872
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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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冷藏
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
BTN101202型3M乙酸*溶液(pH5.2)优惠促销由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于生化科研试验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多3M乙酸*溶液(pH5.2)等生化试剂产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:BTN101202型3M乙酸*溶液(pH5.2)优惠促销
品牌:百奥莱博
编号:BTN101202
规格:250mL
关于BTN101202型3M乙酸*溶液(pH5.2)优惠促销的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·极高热稳定单链结合蛋白
编号:BTN130664
英文名称:ET SSB
规格:50μg
极高热稳定性单链结合蛋白(ET SSB)是从极度耐热的微生物中分离得到的单链DNA结合蛋白质,在95℃温育60分钟后,依然具有全部活性。因为具有极高的热稳定性,ET SSB可用于需要高温反应条件的实验中,如核酸扩增反应和测序反应。
产品特点:
1.提高DNA聚合酶的延伸能力;
2.稳定和标记ssDNA结构;
3.增加PCR反应的产量和特异性;
4.增加RT-PCR中,反转录的产量和延伸能力;
5.改善强二级结构区域的DNA测序;
6.通过ssDNA结合和链置换,增强RecA蛋白的活性。
储存条件:低温运输、-20℃保存、有效期一年。
·96孔板血液DNA提取试剂盒(真空法)
编号:BTN131194
英文名称:96 Microwell Plate Blood DNA Extraction Kit
规格:1次
极高热稳定性单链结合蛋白(ET SSB)是从极度耐热的微生物中分离得到的单链DNA结合蛋白质,在95℃温育60分钟后,依然具有全部活性。因为具有极高的热稳定性,ET SSB可用于需要高温反应条件的实验中,如核酸扩增反应和测序反应。
产品特点:
1.提高DNA聚合酶的延伸能力;
2.稳定和标记ssDNA结构;
3.增加PCR反应的产量和特异性;
4.增加RT-PCR中,反转录的产量和延伸能力;
5.改善强二级结构区域的DNA测序;
6.通过ssDNA结合和链置换,增强RecA蛋白的活性。
储存条件:低温运输、-20℃保存、有效期一年。
·酪蛋白溶液(PBS)
编号:BTN131105B
英文名称:Casein Blocking Solution(PBS)
规格:250mL
即用型酪蛋白(1%)用于封闭非特异性位点。
A型:溶于TBS的Hammarsten级酪蛋白,Kathon防腐剂,pH7.4。
B型:溶于PBS的Hammarsten级酪蛋白,Kathon防腐剂,pH7.4。可用于在使用牛奶封闭背景高时作为替代品使用。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
BTN101202型3M乙酸*溶液(pH5.2)优惠促销关键词:百奥莱博,pH5.2,3M乙酸*溶液,3M乙酸*溶液(pH5.2),BTN101202
·Phusion DNA聚合酶
编号:BTN130429
英文名称:Phusion DNA Polymerase
规格:100U
本产品是Phusion DNA Polymerase基因经过原核表达,并经多次纯化分离得到。该酶是由高保真Pfu DNA聚合酶和独特的双链DNA结合蛋白Sso7d融合而成,其结构示意图如下:

产品特点:
1.极强的DNA 持续合成能力,合成DNA 能力分别是Pfu DNA聚合酶和Taq DNA聚合酶的10倍和2倍。
2.快速,相比常用的DNA聚合酶,合成时间大大缩短,延伸速率为15-30s/kb。
3.可以短时间内高效、高保真扩增长片段DNA,最长可以扩增20Kb。
4.具有 5´-3´和3´-5´核酸外切酶活性,是目前保真度最高的热稳定性聚合酶,保真性是Taq DNA聚合酶的50倍,Pfu DNA聚合酶的6倍。
5.Phusion DNA聚合酶扩增的PCR产物为钝端双链DNA,不能直接用于AT克隆。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| Phusion DNA Polymerase,2U/μL | 50μl |
| 5×Phusion HF Buffer | 2×1.5ml |
| 5×Phusion GC Buffer | 1.5ml |
| 50mM MgCl2 Solution | 1.5ml |
| 5×PCR Enhancer | 500μl |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
自备试剂:DNA 模板、引物、dNTP、超纯水等。
使用方法:(以50μL的PCR反应体系为例)
1.设置PCR反应,在一干净的PCR管中,依次加入下列成分:
| 5×Phusion HF Buffer | 10μL |
| DNA 模板(自备) | <250ng |
| dNTP(2mM each)(自备) | 5μL |
| PCR引物(自备) | 10pmol each |
| 5×PCR Enhancer(选择添加) | 1.5μL |
| Phusion DNA Polymerase | 0.5μL |
| 补超纯水到 | 50μL |
注:
⑴ 如果反应体系不是50μL,各成分需按等比例增加或减少,也可根据PCR特点自行调节Phusion DNA Polymerase、模板和引物的用量,进行体系优化。
⑵ 对于扩增困难或序列较长的模板(如富含GC的或具有复制二级结构的),可用5×Phusion GC Buffer 代替5×Phusion HF Buffer来进行PCR反应。
⑶ 请最后将Phusion DNA Polymerase 加入到反应体系内,防止该酶具有的外切酶活性降解引物。
⑷ 5×Phusion HF Buffer中已含有1.5mM MgCl2。如有需要,可根据PCR反应特点额外添加MgCl2。
⑸ 对于GC含量较高的模板,可选择性加入5×PCR Enhancer。
2.PCR反应参数:
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 98℃ | 30s-3min |
| PCR反应(25-35个循环) | 98℃ | 5-10s |
| 45-72℃ | 10-30s | |
| 72℃ | 15-30s/kb | |
| 最后延伸 | 72℃ | 5-10min |
3.反应结束后取5-10μL反应产物,琼脂糖凝胶电泳分析。
BTN101202型3M乙酸*溶液(pH5.2)优惠促销关键词:百奥莱博,pH5.2,3M乙酸*溶液,3M乙酸*溶液(pH5.2),BTN101202
3M乙酸*溶液(pH5.2)如何储存?
化学试剂的变质,大多数情况是因为受外界条件的影响,如空气中的氧气、二氧化碳、水蒸气、空气中的酸碱性物质以及环境 温度、光照等,都可使化学试剂发生氧化、还原、潮解、风化、析晶、稀释、锈蚀、分解、挥发、升华、聚合、发霉、变色以及燃爆等变化。经常检查储存中的化学 试剂的存放状况发现实际起过的储存期或变质应及时报告,并按规定妥善处理 ( 降级使用或报废) 和销帐。在正常储存条件下,一般化学试剂贮有不宜超过2年,基准试剂不超1年。为了避免环境和其他因素的干扰,所有化学试剂一经取出不得放回贮有容器: 属于必须回收的试剂或指定、退库、的试剂,必须另设专用容器回收或贮存,具有吸潮性或易氧化,易变质的化学试试剂必须密封保存,避免吸湿解,氧化或变质。 定期盘点,核对出现差错应及时检查原因,并报主管领导或部门处理。
·印迹膜抗体稀释液
编号:BTN81208
英文名称:Antibody Dilution Buffer
规格:250mL
本产品用于稀释Western Blot抗体,即开即用,方便快捷。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 抗体稀释液成分一 | 100ml |
| 抗体稀释液成分二 | 0.5g |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
一、转膜(湿法电转移,本产品不含相关试剂)
1.制备湿法电转液:将湿法电转液干粉全部溶解在1L去离子水中得20×湿法电转液,用时用去离子水稀释20倍预冷待用。
2.根据PAGE胶的大小剪切同样大小的滤纸和各边都大1mm的硝酸纤维素膜(以下简称膜)。避免手直接接触膜。
3.将切好的膜浸泡在新鲜稀释的1×湿法电转液(下简称转移液)中15-20分钟。
注意:最好用镊子夹住膜的一边轻轻置于转移液上,只让膜下层不转移液接触,通过毛细管作用使整个膜浸湿。避免让膜沉入转移液中,否则膜不转移液之间形成的气泡会阻止膜的湿润。
4.在容器中将两块海绵垫、六层滤纸用转移液浸湿。
5.在转移夹上依次放上一张浸湿的海绵垫、三层浸湿的滤纸、一块PAGE胶(只要分离胶部分)、一张浸湿的膜、三层浸湿的滤纸、一张浸湿的海绵垫。
注意:每叠加层一定要用玻棒来回擀几遍以擀走里面的气泡。膜两边的滤纸绝对不能相互接触,否则电转移时会发生短路,烧坏装置。
6.合起转移夹幵放入转移槽中(一定要注意方向,转印带负电荷的蛋白质时电极方向是膜正胶负;转印带正电荷的蛋白质时,电极方向是膜负胶正),然后用预冷的转移液灌满转移槽。
7.插上电极,一般在冷却条件下用100V恒压转移30-60分钟或冷室中14V转移过夜。
注意:一定要检查电流的大小,电流一般在0.1-0.4A。应根据蛋白分子量的大小确定转膜时间,对于小分子量的蛋白,转膜时最好垫2张或更多张膜(最多可10 张),即使白质已经转过了第一张膜,还会在其它膜上检测到;对于大分子量的蛋白,转膜时电压要高一点,时间也要延长一点,开始最好也用两块或多张膜。转移时间长的时候特别要注意加强降温措施。如果目的蛋白转移效率低,可以在转移液中加终浓度为20%的甲醇或0.1%的SDS。
8.终止转移后,取出膜,幵在膜上剪去一个小角以标记方向。如有必要可用自备的各种染液对胶或膜进行染色以确定蛋白质转移效率。
二、封膜(本产品不含相关试剂)
1.将膜转移至杂交袋中,加5-10mL Western封膜液后热密封杂交袋开口。
2.室温下用脱色摇床摇动杂交袋30-60分钟。
三、与一抗二抗结合
1.用5mL Western抗体稀释液(配制方法:将抗体稀释液成分二干粉到入成分一溶液中,溶解后即可。未用完的抗体稀释液需-20℃保存)将自备的一抗稀释至适当的倍数(一般需要稀释10-100000倍使用,最佳稀释倍数跟一抗效价相关,需摸索)。
2.剪开杂交袋的一角,倒去封膜液,加入5mL新鲜稀释的一抗溶液,加热密封杂交袋开口。
3.室温下在脱色摇床上摇动杂交袋30-60分钟。
4.用抗体稀释液将自备的HRP或AP标记的二抗稀释至适当浓度(一般需要稀释500-4000倍。最佳稀释倍数跟二抗效价相关,需摸索)。
5.剪开杂交袋的一角,倒去一抗溶液(可留存),加入5mL新鲜稀释的二抗溶液,加热密封杂交袋开口。
6.室温下在脱色摇床上摇动杂交袋30-60分钟,也可过夜孵育。
7.剪开杂交袋的一角,倒去二抗溶液(可留存)。
8.剪开杂交袋,用镊子取出膜,用Western洗膜液在器皿中洗3次,每次10分钟。
9.根据二抗的标记酶选择下面两种显色方法之一。
四、HRP显色检测(对HRP标记的二抗,本产品A型,本产品不含相关试剂)
1.将膜平放,在吸附了抗原抗体的一面加入100-500μL TMB溶液A和100-500μL TMB溶液B,铺满整个膜表面(具体用量可按膜的大小增减)。
2.置于平式摇荡仪上,在室温下孵育2至5分钟,直至深蓝色条带出现。
3.用镊子夹起膜,放入去离子水中洗膜3次终止反应,每次30分钟。
4.空气中晾干后照相保存。
注意:膜显色后的颜色在数小时后将会褪色,不能永久存在,故需要及时照相。
五、AP显色检测(对AP标记的二抗,本产品B型,本产品不含相关试剂)
1.用新鲜配制的1×AP缓冲液洗涤硝酸纤维素膜5分钟。
2.将膜转移到新配制的BCIP-NBT法AP显色液中,每cm2膜需要0.1mL显色液。新鲜配制BCIP-NBT法AP显色液(以10mL为例)的方法:将9mL去离子水、1mL 10×AP缓冲液、50μl BCIP溶液和50μl NBT溶液混匀。此溶液必须在1小时内使用。
3.室温摇晃5-30分钟显色(37℃可加速反应)。
4.显色到合适程度后用自备去离子水洗膜3次终止反应,每次30分钟。
5.用吸水纸吸干膜上的水分,避光干燥保存或在一周内照相。
六、Western抗体清除剂(说明:此处理可能会使蛋白质失去某些表位,本产品不含相关试剂)
1.将膜浸泡在Western抗体清除剂中,70℃摇晃孵育30分钟,去除一抗和二抗。用Western洗膜液洗膜两次,每次10分钟。
2.膜即可用于下一次Western检测的膜封堵步骤。
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10 min)取上清液。 (6) 加入0.2倍体积的乙酸钠溶液(10 mol/L)和两倍体积的无水乙醇,-20℃放置2 h使DNA充分沉淀。 (7) 离心(12 000 r/min 10 min ),弃上清液,沉淀用70%乙醇(4℃)洗涤两次。 (8) 沉淀晾干(尽可能除去乙醇)后,将DNA重悬浮于TE缓冲液(pH8.0 ),于37℃中轻轻摇动有利于DNA重悬浮,使DNA充分溶解。 (9) 加入Rnase至终浓度为1 μg/mL,37℃保温1 h。 (10
2 B 4 O 7 ·10H 2 O) 19克,用蒸馏水溶解并定容至1000ml 。 乙液:0.2mol/L氢氧化钠溶液 配制pH10硼砂氢氧化钠溶液:吸取甲液50ml,再加入乙液21ml,用蒸馏水定容至200ml。 (4)标准酪氨酸溶液:精确称取酪氨酸50mg,加入1ml 1mol/L盐酸溶解后用蒸馏水定容至50ml,即得1mg/ml酪氨酸标准溶液。 (5)0.4mol/L碳酸钠溶液
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