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- 文献和实验
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510
- 英文名:
Inorganic Pyrophosphatase,Thermostable
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京热稳定无机焦磷酸酶(PPase)品牌,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京热稳定无机焦磷酸酶(PPase)品牌
编号:BTN130657
规格:250U
英文名:Inorganic Pyrophosphatase,Thermostable
无机焦磷酸酶催化无机焦磷酸盐水解生成正磷*(代"酸")盐,其反应示意图如下:

产品特点:
1.增强DNA复制。
2.100℃加热4小时,该酶仍具有100%活性。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位指标准反应条件下[0.5mL反应体系,50mM Tricine(pH8.5),1mM MgCl2和0.32mM PPi,75℃反应,10分钟],每分钟催化无机焦磷酸盐生成1μmol磷酸盐的酶量。
来源:重组E.coli菌株,携带从极度耐热的Thermococus litoralis中克隆的无机焦磷酸酶基因。
更多有关北京热稳定无机焦磷酸酶(PPase)品牌的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·DNA marker(100-2000bp)
编号:BTN70503R
英文名称:DNA ladder(100-2000bp)
规格:50次
本系列产品用作凝胶电泳中双链线状DNA的分子量大小参照。它们是由一系列大小不同的单一DNA片段混合组成。成分中已经含有上样缓冲液,所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确,明亮清晰,背景较低,稳定性很好。每次加样量为5μL,可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
使用方法:直接上样电泳,每次加样量为5μL。
使用效果:

注:750bp条带为20ng/uL,其余每条带为10ng/uL
疑难解答:
a)如对带型要求较高,建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液,电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液,电压为80V),同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖,同时要经常更换电泳缓冲液。
c)本产品条带均匀,亮度相当,但在EB胶中长时间电泳有可能会出现250bp以下的条带变淡。可以通过先电泳再染色,加大EB浓度等方法解决。
·大提柱式Ti质粒DNA提取试剂盒
编号:BTN130955
英文名称:Mass-Ti plasmid DNA column extraction kit
规格:5次
本系列产品用作凝胶电泳中双链线状DNA的分子量大小参照。它们是由一系列大小不同的单一DNA片段混合组成。成分中已经含有上样缓冲液,所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确,明亮清晰,背景较低,稳定性很好。每次加样量为5μL,可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
使用方法:直接上样电泳,每次加样量为5μL。
使用效果:

注:750bp条带为20ng/uL,其余每条带为10ng/uL
疑难解答:
a)如对带型要求较高,建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液,电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液,电压为80V),同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖,同时要经常更换电泳缓冲液。
c)本产品条带均匀,亮度相当,但在EB胶中长时间电泳有可能会出现250bp以下的条带变淡。可以通过先电泳再染色,加大EB浓度等方法解决。
北京热稳定无机焦磷酸酶(PPase)品牌关键词:BTN130657,PPase,Inorganic Pyrophosphatase,Thermostable,热稳定无机焦磷酸酶,热稳定无机焦磷酸酶(PPase)
·EDTA溶液
编号:BTN131181
英文名称:EDTA Solution
规格:1mL
本产品是0.2M EDTA溶液,专用于终止各种需要*离子的酶反应。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
·AFLP试剂盒(EcoRI-MseI)
编号:BTN100903
英文名称:AFLP Kit(EcoRI-MseI)
规格:1600次
本产品在传统AFLP-PCR的基础上经过精心优化而开发。AFLP(amplified fragment length polymorphism)原理是一种结合RFLP和PCR技术特点的、迄今为止最有效分子标记分型技术,其原理如下:

产品特点:
1.一站式,足够50次酶切-连接反应、50次预扩反应和1600次AFLP PCR(PCR按30μL体系计算),但不包括DNA 纯化和带型分析试剂(如PAGE电泳试剂和银染试剂)。
2.本系列产品提供EcoRI-MseI 组合,适用于GC含量在50%以上的基因组。对GC含量在50%以下的基因组,需从本公司采购AFLP(EcoRI-TaqI)组合。
3.各种参数都经过优化,一次PCR所得AFLP片段数一般在10-100之间,可重复性好,误差小于0.6%。
4.本产品适用于基因组在500 Mb-6000Mb的材料(如动物和植物),对于基因组在50-500Mb的材料(如细菌和真菌)或50Mb以下的材料(如质粒,cosmid,BAC,YAC和PAC等),需要分别另购专门的+1型预扩引物混合液和+3型EcoRI引物(8 种)AFLP引物对。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 酶切-连接Buffer,10× | 100μl |
| EcoRI-MseI酶混合液 | 100μl |
| EcoRI-MseI 接头混合物 | 1ml |
| T4 DNA连接酶(1U/μL) | 50μl |
| +0型预扩引物混合液 | 750μl |
| PCR Mix 3.0 | 9ml×3 |
| 对照DNA(50ng/μL) | 20μl |
| +2型EcoRI引物(8条) | 1ml每种 |
| +3型MseI引物(8条) | 1ml每种 |
| TE溶液,pH8.0 | 10ml |
| 超纯水 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
+2型EcoRI引物和+3型MseI引物最后碱基的序列
| 引物名称 | 8条引物3´最后碱基 |
| +2型EcoRI引物 | -AA,-AT,-AG,-AC,-TA,-TT,-TG,-TC |
| +3型MseI引物 | -CAA,-CAC,-CAG,-CAT,-CTA,-CTC,-CTG,-CTT |
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
自备试剂:Southern级DNA纯化试剂,尿素-PAGE电泳套装,银染试剂盒。
使用方法:
一、DNA提取(本试剂盒不提供相关试剂)
用户需要自备50-500ng Southern级别的基因组DNA,用前最好预实验以确保DNA能够被EcoRI和MseI内切酶彻底切开。
二、限制性酶切和接头连接反应(本试剂盒足够50次本反应)
1.在0.2mL离心管中加入设置20μL的限制性内切酶酶切体系:
| 成分 | 用量 |
| 酶切-连接Buffer,10× | 2μl |
| 样品DNA | 50ng(对小基因组材料) 500ng(对大基因组材料) 如果用对照,则用5μL |
| EcoR I-Mse I酶混合液 | 2μl |
| 超纯水 | 加水到20μl |
2.轻柔混匀并短暂离心后,37℃保温2小时酶切(若PCR 仪器不带热盖,则必须加50μL自备石蜡油,否则水分会蒸发影响反应。下同),70℃保温15分钟灭活内切酶。
3.在上述酶反应体系中加入20μl EcoRI-MseI 接头混合物和1μl T4 DNA连接酶,轻柔混匀并短暂离心后,20℃保温2小时让接头跟DNA片段相连。
4.在一个离心管中加入10μl上步得到的连接反应液和90μL TE缓冲液,pH8,充分混匀,得到酶切-连接反应10倍稀释液,未用完的酶切-连接反应原液(30μL)可放-20℃保存。
三、预扩增(本试剂盒足够50次本反应)
5.在0.2mL离心管中设置30μl的PCR 体系:
| 成分 | 体积 |
| 酶切-连接反应液10倍稀释液 | 5μl |
| +0型预扩引物混合液 | 10μl |
| PCR Mix 3.0 | 15μl |
6.离心数秒,按下列参数进行PCR预扩增:
| 温度 | 时间 | |
| PCR(20次) | 94℃ | 30s |
| 56℃ | 60s | |
| 72℃ | 60s |
7.可以取10μl PCR产物在1.5%琼脂糖胶上电泳检测,产物为100-1500bp 模糊条带。
8.将剩下的预扩反应液用TE 稀释50倍,直接用于下步反应或放-20℃保存待用。
四、选择性PCR扩增(本试剂盒足够至少1600次本反应)
9.在0.2mL PCR 管中,加入下列成分(如果用户已经知道哪个一种或几种引物组合适合自己的材料,则直接使用;如果不知道,则需要预先测试所有64 种组合,设置64个PCR反应),下面只是一种组合:
| 成分 | 体积 |
| 预扩反应液50倍稀释液 | 5μl |
| +2型EcoR I引物之一(八种之一) | 5μl |
| +3型Mse I引物之一(八种之一) | 5μl |
| PCR Mix 3.0 | 15μl |
10.轻柔混匀后离心数秒,按下列参数进行PCR:
| 温度 | 时间 | |
| PCR(13次) | 94℃ | 30s |
| 65℃ | 30s(每次循环递减0.7℃) | |
| 72℃ | 60s | |
| PCR(13次) | 94℃ | 30s |
| 55℃ | 30s | |
| 72℃ | 60s | |
| 延伸 | 72℃ | 5min |
五、尿素-PAGE电泳和银染(需另购试剂并按相关说明书进行)
北京热稳定无机焦磷酸酶(PPase)品牌关键词:BTN130657,PPase,Inorganic Pyrophosphatase,Thermostable,热稳定无机焦磷酸酶,热稳定无机焦磷酸酶(PPase)
环磷酸腺苷*盐 EEDQ 37839-81-9
F030635 FITC标记山羊抗鸡IgY IgG抗体 Polyclonal Goat Anti-Chicken IgY(IgG)*FITC
F050318 牛IgG抗体 Bovine IgG
氧化型辅酶Ⅰ Hecogenin 53-84-9
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2×ligation solution MasterMix 150ul
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文献和实验显示无疑为各家超纯水器厂家做了一个很好的示范。 在过去的很多年里,纯水的选择仅局限于去离子水和蒸馏水。但是现在,随着科技的不断发展,多种纯化技术和纯水器品牌也应运而生。到目前为止,在中国市场占有量最大的是来自美国的Millipore,在中高端市场(科研单位、高校、研究所、分析行业等)的装机量占市场份额的60-70%。其次,中国国内也有很多本土的品牌,所以在选择纯水器之前我们要针对自己的实验需要和经费预算等各种因素来综合考虑,也要考虑设备的稳定性,售后服务,以及自己的特殊要求(比如是否需要做3Q
。 2、 结合原水状况 为了保证超纯水机的长期稳定运行,需针对不同的原水采用不同的预处理,如粗过滤、软化、二级除盐等。预处理的寿命主要取决于原水状况及用水量。及时更换预处理可保护反渗透膜。 3、 选用高质量的关键部件 超纯水机的关键部件即是反渗透膜和超纯化柱。 3.1、反渗透膜 反渗透是外加压力对高浓度溶液提供比渗透压差大的压力,水分子将被迫通过半透膜到低浓度的一边反渗透可以滤除90%-99%的包括无机离子在内的绝大多数污染物,反渗透膜的质量直接决定
。 2、 结合原水状况 为了保证超纯水机的长期稳定运行,需针对不同的原水采用不同的预处理,如粗过滤、软化、二级除盐等。预处理的寿命主要取决于原水状况及用水量。及时更换预处理可保护反渗透膜。 3、 选用高质量的关键部件 超纯水机的关键部件即是反渗透膜和超纯化柱。 3.1、反渗透膜 反渗透是外加压力对高浓度溶液提供比渗透压差大的压力,水分子将被迫通过半透膜到低浓度的一边反渗透可以滤除90%-99%的包括无机离子在内的绝大多数污染物,反渗透膜的质量直接决定
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