Flemming固定液 细胞生物学试剂

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名称：Flemming固定液 细胞生物学试剂
编号：BTN140410
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
规格：250mL
本产品为铬酸-锇酸-醋酸混合固定液，现配现用。该固定液对脂肪组织既有固定作用，又有染色作用，对有髓神经纤维也有固定兼染髓鞘的作用。该液不适合做HE的染色。应用该液固定的组织，切片不能太大过厚，一般1-2毫米。固定时间1-3天，后经水洗，保存于80%酒精中。可用于各种植物组织的固定。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

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PL2001 BAC/PAC大型质粒提取试剂盒(溶液型，转染级)
PY02-129  4-甲基伞形酮葡萄糖酸苷MUG培养基  100|25克  
ARB10021 人5,10亚甲基四*叶酸还原酶(MTHFR)elisa检测操作说明书 Human5,10methylenetetrahydrafolatereductase(mthfr)ELISA KIT
F030706 BIOTIN标记兔抗牛酪蛋白抗体 Rabbit Anti-casein*BIOTIN
Acr-Bis(40%:2%)   500ml
蜜二糖 L(+)-Tartaric acid 585-99-9
BTN130902 酵母产孢培养基 Sporulation Medium
DNA Ladder plus(100bp～10kb) 
藻类膜蛋白提取试剂盒   50T|100T
BL0899 FITC标记羊抗兔IgG抗体
ARB11454 人氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)酶标法分析 Human oxidized lowdensity lipoprotein antibody,olab ELISA KIT
A8015-18 小鼠血清 100ml|500ml
L-酪*酸二*盐 Norfloxacin 69847-45-6
ARB11768 人腺相关病毒载体(AAV)酶免分析 Human adeno-associated virus,aav ELISA KIT
HC0121 尼龙膜(0.45um)
PY04-024  1%亚碲酸*(*)溶液  2mg/支×10支  每支添加于00ml亚碲酸*(*)肉汤培养基基础，用于金黄色葡萄球菌增菌培养
固红TR半*化锌盐 Ruthenium(III) chloride 89453-69-0
BTN130835 低熔点琼脂糖 Low Melting Agarose
F030821 BIOTIN标记兔抗山羊IgG抗体 Rabbit Anti-Goat IgG*BIOTIN
尿乙酰乙酸定性检测试剂盒   50T
Flemming固定液 细胞生物学试剂关键词：BTN140410,Flemming固定液,Flemming Fixative Solution


·一步法无内毒素质粒DNA提取试剂盒
编号：BTN80201
英文名称：One-step Endotoxin-free plasmid DNA extraction kit
规格：50次
本试剂盒是在一步式质粒DNA提取试剂盒2.0(BTN70903)和液相内毒素清除剂(BTN60607)两产品的基础上开发出来的无内毒素质粒DNA提取试剂。用本产品提取的质粒DNA，内毒素的污染浓度低，适合于转染等对内毒素的污染敏感的实验。

试剂盒特点：
1.在提取质粒前去除内毒素(存在于细菌表面)，从源头上避免料内毒素和质粒DNA 接触，从根本上防止了内毒素对质粒DNA的污染。
2. 独创的一步法质粒DNA提取技术，操作快捷，只需要5-10分钟。
3.质粒回收率高，一次处理后90%的质粒DNA可以回收回来。
4. 得到的质粒DNA可以直接用于转染等实验。

试剂盒组成：

 

成分	规格
菌体内毒素清除剂	200ml
溶液A	50ml
吸附柱活化液	25ml
离心吸附柱(小提)	50只
离心吸附柱(小提)套管	50只
通用预洗液	50ml
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液2.0	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存(溶液A最好4℃保存)，有效期一年。

使用方法：

一:菌体内毒素的清除
1. 收集1.5-3mL E.coli 饱和菌液，12000rpm离心1分钟，弃上清，得到细菌沉淀。
2.在沉淀中加入1mL菌体内毒素清除剂，温和混匀后10000-12000rpm离心1分钟，弃上清(含内毒素)。
3. 再重复上述操作3次，得到的菌体沉淀可以直接进入下面的一步法质粒DNA提取操作。

二：一步法质粒DNA提取
4.在菌体沉淀中加入0.6mL溶液A(用前需摇匀)，充分吹打或振荡30秒裂解细菌，直到裂解液变澄清(一般需要半分钟左右)。注:此方法丌同于碱裂解法，故可以充分吹打或振荡。
5.活化离心吸附柱：在离心吸附柱中加入0.5mL 吸附柱活化液，套上收集管后室温放置2分钟，然后12000rpm离心2分钟，倒弃穿透液，再将吸附柱套上收集管后待用。活化后的离心吸附柱必须立即使用。如果丌活化，质粒得率将低20-40%左右。
6. 将第4 步得到的裂解液全部转移到离心吸附柱中，室温静置2分钟使质粒DNA 不膜结合。注意：必须静止2分钟，否则质粒DNA 丌容易吸附上。
7.室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。
8.在离心吸附柱中加入0.6mL的通用预洗液(注意:是通用预洗液，丌是通用洗柱液，丌要用错。通用预洗液非常容易产生沉淀，用前需要加热到60℃左右使之融化，混匀后再用)，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。
9.在离心吸附柱中加入0.6mL的通用洗柱液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。
10.在离心吸附柱中加入0.4mL的通用洗柱液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。
11.室温12000～15000g离心半分钟，甩干残留液体。
12. 将离心柱置于一个新的1.5mL自备塑料离心管中，加入30-100μL DNA洗脱液2.0，室温放置2分钟。
13. 12000～15000g离心半分钟，离心管底溶液即无内毒素质粒DNA。


Flemming固定液 细胞生物学试剂关键词：BTN140410,Flemming固定液,Flemming Fixative Solution


·Oligo(dT)再生溶液
编号：BTN130976
英文名称：Oligo(dT) Recharger
规格：250mL
本产品是针对Oligo(dT)纤维素再生的溶液，可有效去除亲和基质中的残留RNA和其他杂质，恢复Oligo(dT)纤维素基质的结合能力。

储存条件：常温运输和保存、避光。有效期一年。

·牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)
编号：BTN120404
英文名称：Alkaline Phosphatase,Calf Intestinal
规格：500U
牛小肠碱性磷酸酶与E.coli来源的碱性磷酸酶相同，催化所有磷酸单酯的水解，不能催化磷酸二酯以及磷酸三酯的水解，对ATP等的焦磷酸键水解速度较慢。由于CIAP处理后的DNA片段缺少连接酶所要求的5´磷酸末端，因此它们不能进行自连接。这个特性可以在克隆时降低载体DNA的背景。

产品用途：
1．去除载体DNA片段的5´-末端的磷酸基；
2．防止克隆载体的自连接；
3．蛋白质丝*酸、苏*酸和酪*酸的去磷酸化；
4．为5´末端标记准备模板。

产品组成：

成份	规格
CIAP(10～30U/μl)	500U
10×CIAP Buffer	0.5mL
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：在37℃、pH9.8的条件下，1分钟内水解对硝基*(代"*")磷酸盐生成1μmol的对硝基*(代"*")酚所需要的酶量定义为1个活性单位。

纯度：
1．30 U的本酶和1μg的λDNA-Hind III片段在37℃下反应16小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
2．30 U的本酶和1μg的Closed circular(RFI)pBR322 DNA在37℃下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
3．18 U的本酶和1μg的16S，23S rRNA在37℃下反应16小时，RNA的电泳谱带不发生变化。

使用举例：
1．在微量离心管中配制50μL反应体系：

成分	加入量
DNA Fragment in TE Buffer	1～20pmol
10×CIAP Buffer	5μl
CIAP(10～30units/μl)	1-2μl
补水到	50μl

2．37℃或50℃反应30分钟。或者先37℃反应15分钟，再50℃反应15分钟。注意：单链DNA和具有5´突出末端的DNA在较低温度下(如37℃)即可去磷酸化，而具有3´突出末端的DNA或平末端DNA需要较高温度(如50℃)才能去磷酸化。
3．*酚/*仿/异戊醇(25:24:1)抽提2次。注意：如果早在*酚抽提之前，用自备的蛋白酶K降解CIAP酶，则效果更好。具体做法是：加入EDTA和SDS使其终浓度为5mM EDTA和0.5% SDS，最后加入蛋白酶K溶液，使其终浓度为50μg/mL，然后56℃处理30分钟，再75℃孵育10分钟。然后用于*酚/*仿/异戊醇抽提。
4．*仿/异戊醇(24:1)抽提1次。
5．添加2.5μl的3M NaCl(终浓度150mM)。
6．添加125μl的(2.5倍量)冷乙醇，在-20℃下放置30～60分钟。
7．13000g离心20分钟后，小心去上清。
8．用1mL 75%乙醇洗涤一次。
9．干甩数秒，小心吸弃上清。
10．用20μl以下的TE Buffer溶解DNA沉淀待用或放-20℃长期放置。

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