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370
- 英文名:
Western Blot Blocking Buffer
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温运输、4℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货Western印迹膜封膜液(尼龙膜)打折促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货Western印迹膜封膜液(尼龙膜)打折促销
品牌:百奥莱博
编号:BTN100878
产地:国产|进口
英文名:Western Blot Blocking Buffer
Western Blot实验中,为防止印迹膜与检测系统中的蛋白成分(如抗体IgG等)发生非特异性吸附,导致实验结果不清晰,在进行一抗孵育前需预先对印迹膜上的非特异结合位点进行封闭。无蛋白封闭液可最大限度减少交叉反应引起的非特异性背景。本产品可快速高效地封闭膜上多余的结合部位,减少非特异结合情况的产生,降低背景,适用于各种转印膜的封闭。
储存条件:常温运输、4℃保存,有效期一年。
北京现货Western印迹膜封膜液(尼龙膜)打折促销正在火爆热销,除此之外,为您推荐下别热销产品:
·对*醌固定液
编号:BTN131293
英文名称:p-Benzoquinone Fixative Solution
规格:250mL
本固定液为0.4%对*醌PBS溶液。该固定液对抗原具有较好的保护作用,但是对超微结构的保存有一定的影响,因此,常常与醛类固定剂混合使用。
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期半年。
·NP40裂解液
编号:BTN131009
英文名称:NP40 Lysis Buffer
规格:250mL
NP-40裂解液是一种比较温和的细胞组织裂解液。NP-40解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP和co-IP等。
产品特点:
1.本产品裂解能力强度温和,对膜蛋白的处理能力一般;对核蛋白的提取能力较好;对胞浆蛋白、胞浆磷酸化蛋白和各种转录因子处理效果很好。
2.本产品含有各种蛋白酶和磷酸蛋白酶抑制剂,能有效防止各种蛋白酶对目的蛋白的降解。
3.本产品的主要成分为50mM Tris(pH7.4),150mM NaCl,1% NP-40以及sodiu*(代"m") pyrophosphate,β-glycerophosphate,sodiu*(代"m") orthovanadate,sodiu*(代"m") fluoride,EDTA,leupeptin等多种抑制剂,可以有效抑制蛋白降解。
4.用NP-40裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA法蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
对于培养细胞样品:
1.融解NP-40 裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
2.对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150~250μl裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-~250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。
3.充分裂解后,10000-14000g离心3~5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入150微升裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。
对于组织样品:
1.把组织剪切成细小的碎片。
2.融解NP-40裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
3.按照每20mg组织加入150~250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
4.用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5.充分裂解后,10000~14000g离心3~5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6.如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
备注:
1.为取得最佳的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
2.裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
北京现货Western印迹膜封膜液(尼龙膜)打折促销关键词:BTN100878,Western印迹膜封膜液(尼龙膜),Western Blot Blocking Buffer
邻*二甲醛 Monoacetone glucose 643-79-8
L-脯*酸苄酯盐*(代"酸")盐 C12E10 16652-71-4
聚对丙*(代"烯")基茴香醚* Deoxycholic acid sodiu*(代"m") salt 27206-35-5
BL0800 人血清IgA抗原(液体)70-80%纯度
ARB12261 大鼠肌肝(Cr)Elisa分析 Rat creatinine,cr ELISA KIT
H0401 小牛血浆(去红细胞、无菌过滤)
ARB13061 小鼠肾损伤分子1(Kim-1)ELISA检测服务 Mouse kidney injury molecule 1,kim-1 ELISA KIT
BL1100 30%丙*(代"烯")酰胺(29:1)
90-05-1 α-甲氧基酚(愈创木酚)
BTN100204 一站式PCR-SSCP套装 One-Stop PCR-SSCP Pack
PY01-121 酸性蛋白酶(1:50000) 250克
BL1291 SDS-PAGE凝胶制备试剂盒
BL0863 羊抗人IgA免疫血清 0.5ml
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ARB10804 人抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)检测服务 Human anti-thyroid-peroxidase antibody,tpo-ab ELISA KIT
ARB11931 大鼠17-羟皮质类固醇(17-OHCS)定量分析 Rat 17-hydroxycorticosteroids,17-ohcs ELISA KIT
ARB13483 鸡细胞间粘附分子-1(ICAM-1)ELISA检测服务 Chicken intercellular adhesion molecule 1,icam-1 ELISA KIT
PP1201 RIPA裂解液
ARB13143 小鼠总胆固醇(TC)Elisa方法检测
PY02-278 月桂基硫*(代"酸")盐胰蛋白胨MUG肉汤 100克
1397-89-3 可溶性两性霉素B Amphotericin B solubilized
ARB12642 大鼠游离甲状腺素(FT4)酶标法分析 Rat free thyroxine,ft4 ELISA KIT
10034-99-8 Mangnesinm Sulfte 硫*(代"酸")*七水
HC0346 BRAND 8道整支消毒移液器
抗酒石酸酸性磷酸酶染色液 4×10ml|4×20ml
柠檬酸铋铵 DL-Lactic acid 31886-41-6
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文献和实验实验十二 Western印迹鉴定目标蛋白 【实验目的】 1.了解Western blot的原理及其意义,掌握Western blot的操作方法; 2.应用Western blot 技术分析鉴定经SDS-PAGE分离后转移到尼龙膜上的重组
时间:60-90 min 转膜设备: 北京六一 半干转 建议:转膜缓冲液用新鲜配制的,可先配成2倍的母液,转膜液的多少会影响电转的效率,一般将吸水纸润湿即可,不要和膜一起浸泡,这样效果很好。 蛋白来源:人肝癌肿瘤细胞 蛋白名称(可保密):notch 蛋白分子量:60-120 KDa WB用膜类型、孔径:pall NC膜 0.45 um 转膜方式(恒压、恒流):恒流 0.3 A 转膜时间:-20度冰柜120 min 转
的转移槽中,使液体慢慢没夹,驱出海绵中的气泡。注意:尼龙膜面向正极栅板。 6.3.3转移:电压为1-4V/CM。先用8V(1V/CM)转移1小时,小片段在低电压下转移较好。然后升压至30V(4V/CM),再转移2小时,使大片段转移彻底。通过紫外光可检查转移效果。 6.3.4结束转移,取出尼龙膜,在电泳缓冲液中漂洗可能粘附的凝胶,浸泡膜于2×SSC中至少5分钟(5~30min)。 6.3.5紫外交联,在基因交联仪中进行,设定如下参数: 湿膜:150mj,13秒,C3 干膜:13秒
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