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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
683
- 英文名:
Mollusc RNA column Extraction Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温运输,4℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京现货软体动物RNA柱式提取试剂盒优惠价,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京现货软体动物RNA柱式提取试剂盒优惠价
编号:BTN101113
产地:国产|进口
英文名:Mollusc RNA column Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒专门从各种软体动物组织样品中快速提取总RNA的试剂盒,它能有效克服传统TRIzol方法提取软体组织RNA时,十分容易产生糖蛋白和酸性多糖污染这一缺点。
试剂盒特点:
1.适用于用常规方法难以提取的、各种富含多糖的软体动物,包括螺类、贝类、乌贼、章鱼和蜗牛等。
2. 能有效去除糖蛋白、粘蛋白污染,OD260/280一般均在1.9以上。
3. RNA产率一般为5-15μg/100mg。
4. 操作简单,整个提取过程一般只需要10 多分钟。
5. 得到的RNA可以直接用于RT-PCR、Northern杂交、mRNA 纯化、Primer Extension、RNA Protection、in vitro translation等研究。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50ml |
| 溶液B | 15ml |
| 溶液C | 50ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| RNA洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 先将50-200mg 新鲜或冷冻的软体组织液氮研磨成粉,加入1mL溶液A溶解(溶液A使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并摇晃混匀),然后将研磨物转移到新的1.5mL离心管中,振荡混合30秒。也可以将软体组织剪碎后与溶液A一起用Polytron 匀浆机(内切式匀浆机)匀浆5-20秒,再转移到1.5mL离心管中。匀浆时会产生泡沫,但不影响提取效果。
2.在离心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自备*仿,在振荡器上振荡30秒混匀,此时溶液呈均匀的乳浊状。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
3.室温12000~15000g离心3~5分钟,两相间将有约5-10 毫米厚的细胞破碎物。
4. 将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中,下层有机相和中间层含有DNA、蛋白质和其他杂质,避免触及或吸取。最好留下100μL上清液不取。
5. 加入等体积的溶液C,充分颠倒混匀。
6. 将一半的溶液转移到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
7. 将剩下的一半溶液转移到同一离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
8. 加0.7mL 通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。
9. 加0.3mL 通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。此步可以省略。
10.室温离心半分钟。此步十分重要,否则残留的乙醇会影响RNA的使用。
11. 将离心吸附柱转移到自备的RNase-free离心管中,加入50-100μL RNA洗脱液,室温放置1-2分钟。
12. 12000~15000g室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
13. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
14. RNA产量产率测定:将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度X 体积)和产率(RNA产量/组织用量)。注意:测定OD时不要稀释过度,否则浓度会在仪器能测的范围之外。本方法提取的RNA 测OD时一般最多只能稀释10-20倍。
15. RNA 纯度测定:无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响RT-PCR等反应。
北京现货软体动物RNA柱式提取试剂盒优惠价极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·SuperTOPO-Amp通用克隆试剂盒
编号:BTN160685-25A
英文名称:SuperTOPO Cloning Kit
规格:25次
·PCR污染清除剂
编号:BTN140648
英文名称:DNA Contamination Scavenger
规格:250mL
微量核酸污染导致的PCR假阳性是广大实验者最头痛的问题之一。为解决此难题,本公司开发了本款PCR污染清除剂,本产品无毒、无腐蚀性,可将裸露的核酸完全降解至无法作为扩增模板的小片段,且无法恢复,从而彻底消除PCR 过程中由于各种环境污染而导致的假阳性扩增。
产品特点:
1.本产品为非酶类试剂,所有组分可生物降解、无毒无害。不含有机溶剂或者挥发性物质,不含无机酸或者碱性物质,不会对金属形成腐蚀。
2.产品中各组分协同作用,快速、非序列特异性的降解核酸污染。
3.使用简单,操作方便。喷洒或浸泡处理15分钟即可完成清除作用。
4.可广泛用于清除实验操作台、仪器、塑料和玻璃器皿、移液器、解剖刀、镊子、手套等各种实验器材表面的DNA污染。
5.与传统的PCR污染清除方法,如:稀酸处理法、紫外照射法、尿嘧啶糖苷酶(UNG)法和酶解变性等相比,本产品具有能彻底破坏DNA分子、有效清除小片段核酸等优点。
储存条件:常温运输和保存,有效期两年。
使用方法:
注意:以下操作均需要戴手套进行。本产品可重复使用5-10次,使用后建议密封保存。
工作平台的清洁:
直接将本产品喷于台面,最少15分钟后用普通吸水纸擦净,最后用吸水纸擦净,晾干。
实验仪器的清洁:
用浸有本品的纸擦拭仪器表面,再用吸水纸擦净,晾干。用本品处理金属器械的时间不能超过15分钟。
玻璃和塑料器皿的清洁:
将器皿浸泡在本产品中,静置处理最少15分钟后取出,再用蒸馏水浸泡二次以上,倒立晾干后备用。
移液枪的清洁:
根据生产厂家的使用手卸下移液枪的前端,留下接口塞和圈套后将其浸放在本产品中最少15分钟,再用蒸馏水彻底冲洗后,晾干,装回移液枪。
塑料离心管和滴头的清洁:
将反应塑料离心管和滴头充分浸泡在本产品中最少15分钟以上(最好不要有气泡),然后蒸馏水充分浸泡两次,试管或离心管可立即使用或干燥后备用。
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·柱式病毒DNA提取试剂盒
编号:BTN70701
英文名称:Virus DNA column extraction kit
规格:50次
本试剂盒是在一管式病毒DNA提取试剂盒的基础上开发的、专门用于从血清(血浆)等液体样品及拭子(咽拭子、鼻拭子、口腔拭子、阴道拭子等)中提取微量病毒DNA的产品。
试剂盒特点:
1. 操作简单,整个过程只需要20分钟左右,不需要额外在洗柱液中补加乙醇。
2. 灵敏度高,通过PCR 检测到的最终灵敏度可以达到30-50拷贝/mL。
3. 安全无毒,不需要使用*酚和*仿等有机溶液。
4. 如果加上病毒离心富集步骤,最多可以处理1.5mL液体病毒样品。
5.与PCR和荧光PCR 兼容。
6. 价廉物美,性价比远高于国外同类产品。
7.适用于各种材料,包括血清、血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞上清液等无细胞材料。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 30ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脱液3.0 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
使用方法:
1. 对于液体病毒样品:在1.5mL离心管中加入0.1-0.2mL液体病毒样品。如果病毒需要富集,可以将1.5mL液体在4℃ 24,000 g 冷冻离心60分钟,移弃1.3mL后剩下的0.2mL 用于第2 步处理。对于拭子样品:将一个拭子放入离心管中,加入1mL自备的生理盐水,振荡器上充分振荡半分钟,然后转移0.2mL 到1.5mL塑料离心管中,用于第2 步处理。
2. 加入0.6mL溶液A到第一步得到的0.2mL样品中,振荡30秒混匀后室温放置10分钟。注意:溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀,使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 短暂离心后将500μl溶液转移到离心吸附柱中,室温放置2分钟。
4. 12000rpm室温离心1分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。
5. 将剩余溶液短暂离心后全部转移到步骤3的离心吸附柱中,室温放置2分钟。
6. 12000rpm室温离心1分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。
7. 加入0.7mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,12000 rmp室温离心1分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。
8. 12000rpm室温离心1分钟(干甩),弃含穿透液的离心管。
9. 将干甩后的离心吸附柱套入到一个自备的RNase-free的1.5mL离心管中,在离心吸附柱的滤膜的中部加入30-100μl DNA 洗脱液3.0,然后室温放置2分钟。
10. 12000rpm室温离心1分钟,离心管中的溶液即为病毒DNA溶液。
11. DNA样品可以直接用于PCR,也可放-20℃长期保存。
疑难解答:
Q:提取液体样品/病毒核酸(RNA或DNA)为何很难?
A:原因一是量少。病毒颗粒中的RNA或DNA是作为遗传物质保存,每个病毒最多只携带几个拷贝(而一个细胞中有上万种RNA分子,每种RNA 有很多拷贝),同时其长度也十分有限(一般不到细胞基因组的万分之一),样品中病毒数往往又不是很多,使得样品中病毒核酸的绝对量往往比一个细胞中核酸的绝对量还少,所以操作中十分容易丢失。另外,由于得到的核酸绝对量很少,不能使用电泳和测OD检测,只能通过PCR或RT-PCR 检测,而PCR或RT-PCR的条件又需要优化,所以要确定提取是否成功十分不容易。
北京现货软体动物RNA柱式提取试剂盒优惠价关键词:Mollusc RNA column Extraction Kit,软体动物RNA柱式提取试剂盒,BTN101113
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