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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
611
- 英文名:
RNApp RNA precipitation aid
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输,-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应微量RNA助沉剂打折促销,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:微量RNA助沉剂打折促销
规格:0.5mL
英文名:RNApp RNA precipitation aid
编号:BTN3120
品牌:百奥莱博
本品是一种经去RNase处理的,能有效地促进微量RNA沉淀回收的大分子聚合物,适用于提取样品中的微量RNA。
产品特点:
1.促进微量RNA的沉淀,其沉淀条件跟常规乙醇或异丙醇RNA沉淀相同,故可直接加入到样品中促进微量RNA的沉淀和回收。
2.使用多样,可以在核酸提取的任何步骤中加入,既可以加到提取液中,也可以加到稀释的RNA样品中。
3.化学惰性,不影响核酸的A260/280光吸收,不影响后续的反应过程(如cDNA 合成RT-PCR和体外转录等)。
4.不含RNase,产品溶解在液相RNase Scavenger中,检测不到残留的RNase。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一:用于提取微量组织样品中的RNA(推荐用法)
加入裂解液中使用:按10-20μL RNApp/mL 裂解液的比例将RNApp加入常用RNA提取液(如TRIzol,动物RNA提取试剂盒)中,然后按相应的操作规程直接提取RNA。如果裂解液中含有CTAB,则需要在最后醇沉淀时加入,后续处理不变。
二:用于沉淀回收反应体系中的微量RNA
直接将5-10μL RNApp 加入待沉淀的RNA溶液中,然后按盐/乙醇或盐/异丙醇沉淀RNA的经典操作规程沉淀RNA。
疑难解答:
Q:本产品与DNApp 有何区别?
A:两者化学成分完全相同,只是本产品经过去RNase处理。
想要了解更多关于微量RNA助沉剂打折促销的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
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微量RNA助沉剂打折促销关键词:RNApp RNA precipitation aid,微量RNA助沉剂,BTN3120
·即用型易错PCR试剂盒
编号:BTN101005
英文名称:Instant Error-Prone PCR Kit
规格:100次
本产品就是专门为广大的研究工作者进行易错PCR而开发。易错PCR是利用Taq DNA多聚酶不具有3´→5´校对功能的特性,在一定条件下(如不同的dNTP浓度、Mg浓度和MnCl2存在)能够按较高的机率引入随机引入突变。如果有适当的选择方法,则可从构建的突变库选出所需突变体。
产品特点:
1. 即开即用,十分简单方便,尤其在生物制药和酶学研究领域显示出了它的优越性。
2. 配方经过精心优化,突变率稳定,突变没有趋向性。易错PCR的突变率为0.66%(±0.13%),详见使用手册疑难解答。
3. 比体内基因突变更快捷简单,但如果在PCR引物中设计位点,则可使产物克隆到表达载体,也可以用于体内蛋白活性的筛选。
4.可用于连续易错PCR,只需把上一次易错PCR的产物用作下一次易错PCR的模板即可,使每一次获得的小突变累积而产生重要的有益突变。
5. 只适用于扩增1kb以下的产物,对于1kb以上的产物,建议分段扩增。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| Taq DNA聚合酶(5U/μL) | 100μl |
| 易错PCR Mix,10× | 300μl |
| 易错PCR专用dNTP,10× | 300μl |
| MnCl2,5mM | 300μl |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期为一年。
使用方法:
1.以30μL的标准PCR反应体系为例,如果反应体系不是30μL,各成分需要等按比例增加或减少。在一干净的PCR管中,加入下列成分:
| 易错PCR Mix,10× | 3μl |
| 易错PCR 专用dNTP,10× | 3μl |
| MnCl2,5mM | 3μl |
| 自备DNA模板(10ng/μL) | 1μl |
| PCR引物(自备,10μm each) | 10pmol each |
| Taq DNA聚合酶(5U/μL) | 1-5U |
| 补水到 | 30μl |
2. 按已经优化的PCR条件进行一定循环数的PCR(循环数与突变率的关系见下表),然后取5μL电泳检查。如果没有优化的PCR条件,一般可以先尝试下面的PCR条件:
| PCR前变性 | 94℃ 3分钟 | |
| 易错PCR | 94℃ 1分钟 | 循环30次(见注) |
| 45℃ 1分钟 | ||
| 72℃ 1分钟 |
注:易错PCR一般不需要热启动,也不需要在PCR结束后做延伸处理。
循环次数与突变几率的关系
易错PCR循环次数决定每个核苷酸位置的突变几率,进而决定每个PCR产物可能得突变位点数,所以所需循环数由客户根据需要改动。
| PCR循环数 | 每个碱基突变几率 | PCR终产物中的突变位点数 | ||||
| 100bp | 200bp | 400bp | 800bp | 1600bp | ||
| 5 | 0.0033 | 0.00 | 0.66 | 1.3 | 2.6 | 5.3 |
| 10 | 0.0066 | 0.66 | 1.3 | 2.6 | 5.3 | 11 |
| 20 | 0.013 | 1.3 | 2.6 | 5.3 | 11 | 21 |
| 30 | 0.020 | 2.0 | 4.0 | 7.9 | 16 | 32 |
| 50 | 0.033 | 3.3 | 6.6 | 13 | 26 | 53 |
3.电泳检测是否得到预计长度的PCR产物。
疑难解答:
Q:易错PCR与定点突变PCR有什么区别?
A:定点突变是指通过聚合酶链式反应(PCR)等方法向目的DNA片段(可以是基因组,也可以是质粒)中引入所需变化(通常是表征有利方向的变化),包括碱基的添加、删除、点突变等。它需要预先知道靶基因的序列。易错PCR是一种随机突变,它不需要预先知道靶基因的序列(引物结合部分除外),但需要后续的筛选方法筛选自己所需要的突变。
Q:易错PCR的错误率是多少?
A:易错PCR的突变率为0.66%(±0.13%),对500bp的PCR产物,相当于有4%的PCR片段为野生型,12%的含一个突变,20%的含两个突变,22%的含三个突变,18%的含四个突变,12%的含五个突变,12%的含六个或更多突变。
Q:如果需要每个核苷酸有高于0.66%的突变率,如何办?
A:可以使用连续多次易错PCR来提高突变率。但最好先用胶纯化回收PCR片段,再用于下一轮PCR。此外不能用少于千分之一的第一次PCR产物作为第二轮易错PCR的模板,否则多样性将受到影响。第三轮易错PCR最好使用所有第二轮的PCR产物作为模板,但需要在10mL体系中完成(可以分成很多100μL体系进行)。
微量RNA助沉剂打折促销关键词:RNApp RNA precipitation aid,微量RNA助沉剂,BTN3120
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北京百莱博科技有限公司专业生产核酸电泳和回收产品,欢迎来电咨询选购微量RNA助沉剂打折促销。
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文献和实验,trizaol也就是混一混,但是优点在于质量保证,使用方便,效率高,根据不同组织用trizol一般可以提到全部RNA的50%(别小看,这已经很高了)以上,有些可以到达80%。mRNA用Qiagen的柱子,别去自己做Oligo(dT)柱,太麻烦。是否用DNAseI根据基因的特点和引物的设计,能够跨内含子的就不需要处理,处理还是很危险的哦。像这样的微量和也用不了多少次的实验,并且如果牵涉到样品是无价之宝的时候,因该选好的进口试剂。废话几句,在另一个论坛上看到一贴谈到RNA的贮存,因为没有登陆在那里也不能说,可能
光度计进行核酸定量的时候,260吸收峰外的读数值可指示污染情况。260/280的比率应该在1.8 至2.1的范围内。同样非常关键的,是要保证实验所用的RNA质量(全长、完整性)不打折扣,因此,我们通常利用Agilent 2100 Bioanalyzer检查RNA的完整性,并根据rRNA峰值的完整性判断RNA样本的情况,选择下一步实验适合的方法。假如有证据显示重要样品有降解,我们会同时检测一个在该样品中已知稳定的管家基因,来观察是否出现由于转录产物不完整而导致管家基因在这个样本中的表达改变。当探针并非处
果还好,trizaol也就是混一混,但是优点在于质量保证,使用方便,效率高,根据不同组织用trizol一般可以提到全部RNA的50%(别小看,这已经很高了)以上,有些可以到达80%。mRNA用Qiagen的柱子,别去自己做Oligo(dT)柱,太麻烦。是否用DNA seI根据基因的特点和引物的设计,能够跨内含子的就不需要处理,处理还是很危险的哦。像这样的微量和也用不了多少次的实验,并且如果牵涉到样品是无价之宝的时候,因该选好的进口试剂。谈到RNA的贮存实际上主要是温度,至于放在TRIZOL中是不可
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