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865
- 英文名:
β-galactosidase Assay Kit
- 保质期:
半年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输,4℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
β-半乳糖苷酶活性检测试剂盒现货价格由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于生化科研试验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多β-半乳糖苷酶活性检测试剂盒等细胞及免疫学产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:β-半乳糖苷酶活性检测试剂盒现货价格
产地:国产|进口
英文名:β-galactosidase Assay Kit
品牌:百奥莱博
本产品是分光光度法测定β-GAL活力的,测定原理为β-GAL分解对-硝基*(代"*")-β-D-吡喃半乳糖苷生成对-硝基*(代"*")酚,后者在400nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算β-GAL活性。
β-半乳糖苷酶广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,能够催化β半乳糖苷化合物中的β半乳糖苷键水解,此外还具有转半乳糖苷的作用。β-GAL不仅可为植物的快速生长释放储存的能量,还能在正常的多糖代谢、细胞壁组分代谢以及衰老时细胞壁降解过程中催化多糖、糖蛋白以及半乳糖脂末端半乳糖残基的水解,释放自由的半乳糖。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 酶提取液 | 50ml |
| 溶液A | 粉剂1瓶 |
| 溶液B | 15ml |
| 溶液C | 50ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,4℃保存,其中试剂A需-20℃保存,有效期半年。
使用方法:
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
一、酶液提取
1.细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):酶提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL酶提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200 W,超声3秒,间隔10秒,重复30次);15000g 4℃离心10分钟,取上清,置冰上待测。
2.组织:按照组织质量(g):酶提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1 g组织,加入1mL酶提取液),进行冰浴匀浆。15000g 4℃离心10分钟,取上清,置冰上待测。
二、 测定操作步骤
1.分光光度计预热30分钟以上,调节波长至400nm,蒸馏水调零。
2.取出试剂A,临用前向试剂瓶中加入5mL蒸馏水,充分溶解备用,制备成溶液A工作液(用不完的溶液A仍需-20℃保存)。
3.样本测定(在EP管中依次加入下列试剂):
| 试剂名称 | 对照管(μl) | 测定管(μl) |
| 样本 | 50 | 50 |
| 蒸馏水 | 200 | 0 |
| 溶液A工作液 | 0 | 200 |
| 溶液B | 250 | 250 |
| 迅速混匀,放入37℃准确水浴30分钟 | ||
| 溶液C | 1000 | 1000 |
| 充分混匀,400nm处测定吸光值A,计算ΔA=A测定-A对照。每个测定管需设一个对照管。 | ||
三、酶活性计算公式
标准条件下测定的回归方程为y=0.00543x -0.0027;x为标准品浓度(nmol/mL),y为吸光值。
注:V反总:反应总体积,0.5mL;V样:反应中样本体积,0.05mL;V样总:加入酶提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万;T:反应时间,30分钟。
1.按照样本蛋白浓度计算:
酶活性定义:每mg 组织蛋白每分钟产生1nmol对-硝基*(代"*")酚定义为一个酶活力单位。
β-GAL活力(nmol/min/mg prot)=[(ΔA+0.0027)÷0.00543×V反总]÷(V样×Cpr)÷T=61.39×(ΔA+0.0027)÷Cpr
如果需要另外测定,建议使用本公司BCA蛋白质含量测定试剂盒。
2.按照样本鲜重计算:
酶活性定义:每g组织每分钟产生1nmol对-硝基*(代"*")酚定义为一个酶活力单位。
β-GAL活力(nmol/min/g鲜重)=[(ΔA+0.0027)÷0.00543×V反总]÷(W×V样÷V样总)÷T=61.39×(ΔA+0.0027)÷W
3.按细菌或细胞密度计算:
酶活性定义:每1万个细菌或细胞每分钟产生1nmol 对-硝基*(代"*")酚定义为一个酶活力单位。
β-GAL活力(nmol/min/104cell)=[(ΔA+0.0027)÷0.00543×V反总]÷(500×V样÷V样总)÷T=0.123×(ΔA +0.0027)
除β-半乳糖苷酶活性检测试剂盒现货价格外,我公司正在打折促销以下产品:
·一站式miRNA柱式提取试剂盒
编号:BTN80104
英文名称:One-stop miRNA column extraction kit
规格:50次
本试剂盒是目前国内外市场上最快速最简单的小RNA分离纯化产品。
试剂盒特点:
1.一步法直接分离纯化小RNA,比两步法(先分离总RNA和再纯化其中的小RNA)和PAGE电泳回收法更简单。得到的小RNA长度大部分在200nt以下,包括5S RNA、tRNA、miRNA、Pre-miRNA、pri-miRNA、siRNA、shRNA和snRNA等。
2. 柱式操作,比miRNA提取试剂盒更加简单快捷,整个过程只需要十多分钟。
3.适用范围广,可以用于动物组织、血液及部分植物组织等实验材料。
4.小RNA 纯净,OD260/280一般都在1.9以上。
5.产率一般为20-40μg/100mg动物组织。
6. 无基因组DNA的污染。
7.可用于RT-PCR、miRNA 标记、microarray等后续实验。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 25ml |
| 溶液B | 25ml |
| 溶液C | 50ml |
| 离心吸附柱 | 100套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| RNA洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
由于离心吸附柱的吸附量限制,本产品每次提取只能处理100mg左右的各种组织,可以在1.5mL塑料离心管中。如果处理样品量大,请分成很多相当于微量提取的量进行,最后再收集在一起。
1. 新鲜配制裂解液。将溶液A和溶液B按1:1的比例混合,然后根据组织细胞类型的不同分为下面及种情况使用。注意:溶液A和溶液B混合后必须立即使用,不要放置,否则会产生沉淀。
a)对贴壁细胞:吸尽培养液,在每10平方厘米细胞中加入1mL新鲜配制的裂解液,用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解。
b)对悬浮细胞:离心收集细胞,吸尽液体,在每1-5×106 悬浮细胞中加入1mL新鲜配制的裂解液,用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解。如果是fibroblasts或carcinoma cell,1mL 新鲜配制的裂解液的细胞使用量不要超过1×106个细胞。
c)对新鲜的动物组织:先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入10mL或15mL塑料离心管中,每50-100mg 组织加1mL 新鲜配制的裂解液,用匀浆器匀浆30秒左右。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA),建议组织的使用量不要超过50mg/mL裂解液,否则十分容易产生DNA污染。
d)对新鲜的植物组织:先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入10mL或15mL塑料离心管中,每50-100mg 组织加1mL 新鲜配制的裂解液,用匀浆器匀浆30秒左右。
e)对 RNAhold 保存动物或植物组织:先用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块,放入10mL或15mL塑料离心管中,每50-100mg组织加1mL新鲜配制的裂解液,用匀浆器匀浆30秒左右。
2. 将裂解物转移至一个干净的1.5mL塑料离心管中,然后加入0.2倍体积的自备*仿(1mL裂解物需0.2mL *仿),振荡器上充分振荡混均30秒。
3. 12000~15000g室温离心3~5分钟。
4. 将上清液(约0.6-0.8mL)转移到一根离心吸附柱中以去除大RNA(最好标记以跟后面要用的专门吸附小RNA的另一离心吸附柱区别开来,本试剂盒提供的离心吸附柱之间没任何区别,可以随机选一个做大RNA 吸附,另一个做小RNA 吸附)。注意:离心后下层有机相和中间层含有DNA和蛋白质,避免触及,否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见,可以留下100μL上清液不取。同时吸取上清时最好缓慢进行,否则容易吸出交界面的不可见的丝状DNA。
5. 12000~15000g室温离心半分钟,收集管中的穿透液。大RNA 及DNA将与离心吸附柱的膜结合,小RNA 将存在于穿透液中。但由于离心吸附柱的最大吸附能力为40μg动物RNA,20μg植物RNA,如果样品中的大RNA含量高于上面数值,则穿透液中将同时含有大RNA和小RNA,在此情况下,穿透液需要再次重复上柱以去除大RNA。由于此时离心吸附柱已经吸附了大RNA,所以需要预处理(具体步骤见本手册最后的附录)。
6.在最后得到的不含大RNA的穿透液中加等体积的溶液C,混匀。此时溶液的总体积约1.5mL。
7. 先转移约0.75mL 到一新的离心吸附柱中。注意:不要使用已经使用过的、用来吸附大RNA的离心吸附柱。12000~15000g室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。
8. 将上步上柱剩余的样品转移到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。
9. 加 0.7mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
10. 加 0.3mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。此步一般可以省略。
11. 12000~15000g室温离心半分钟以甩出残联液体。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响miRNA的使用。
12. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 收集管中,加入50-100μLRNA 洗脱液。
13. 12000~15000g室温离心半分钟,离心管中溶液即为miRNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
附录:
1. 将结合有大RNA和DNA的离心吸附柱中加入0.1mL自备的超纯水,12000~15000g室温离心半分钟,弃收集液。
2. 再加 0.1mL自备的超纯水,重复上步一次。
3. 将第5 步的得到、需要进一步去除其中大RNA和DNA污染的穿透液直接上柱,12000~15000g室温离心半分钟,收集穿透液(此穿透液含小RNA)。
4. 如果大 RNA 已经去干净,可以直接进入第6 步;如果大RNA 没有去除干净,则用本附录1-2的方法处理离心吸附柱,然后再将此穿透液加入(接本附录第3 步)。一般样品只需要额外处理一次就可以去除全部的大RNA污染。
β-半乳糖苷酶活性检测试剂盒现货价格关键词:β-galactosidase Assay Kit,BTN130599,β-半乳糖苷酶活性检测试剂盒
18656-96-7 X-Gluc
BL1137 BL21(DE3)感受态细胞
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中性树胶 10ml|50ml|100ml
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β-半乳糖苷酶活性检测试剂盒现货价格关键词:β-galactosidase Assay Kit,BTN130599,β-半乳糖苷酶活性检测试剂盒
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文献和实验joo 如题,要做衰老,没有决定定哪家的SA-bata-gal的检测试剂,请教大家都用什么呀?另外看到碧云天很便宜,谁用过他家这个产品吗? joo 求助! joo 自己顶! zmz_1 I am using this in Boston, works very well. check the data sheet. applied
【求助】核转录因子活性检测试剂盒TransAM p65: 是不是一定要做标准曲线啊
tasthma 请问有没有那位战友用过activ motif 公司的核转录因子活性检测试剂盒TransAM p65啊?我想请教一下,是不是一定要做标准曲线啊? zhujoker 这种试剂盒一般都是需要做标准曲线的。 tasthma 谢谢版主!那我还得买他们的标准蛋白才行啊 zhuqueleee 没有必要的。 我当时用的就是这个试剂盒,因为到最后数值
时间通常为10秒,根据情况也可以测定更长或更短时间,但是同一批样品最好使用相同的测定时间。 为避免由于质粒 转细胞时效率的差异而带来的误差,可以同时转入Renilla荧光素酶的报告基因质粒作为内参,采用双荧光素酶报告基因检测 试剂盒进行检测;也可以同时转入β-半乳糖甘酶报告基因质粒作为内参,然后采用β-半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒进行检测。采用荧光素酶报告基因检测试剂盒中的报告基因 细胞 裂解液裂解获得的样品,可以直接用于β-半乳糖苷酶报告基因 检测试剂盒中的测定。
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