北京现货RNase A干粉哪里卖

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货RNase A干粉哪里卖，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京现货RNase A干粉哪里卖
规格：100mg
编号：BTN90205
产地：国产|进口
英文名：RNase A Powder
本产品是牛胰RNase A的冻干粉，可以配制成RNase A溶液用于各种分子生物学实验。

储存条件：低温运输，4℃或-20℃保存，有效期两年。

注意：RNase A非常容易吸附到玻璃表面，所以应避免与玻璃接触。

更多有关北京现货RNase A干粉哪里卖的价格及使用说明等，请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·柱式酱油DNA提取试剂盒
编号：BTN130956
英文名称：Soy sauce DNA column extraction kit
规格：10次

·ONPG干粉
编号：BTN131108
英文名称：o-nitrophenyl-β-Dgalactopyranoside
规格：1g
ONPG是在包含β-半乳糖苷酶(β-Gal)报告酶的ELISA 应用中最经常使用的化学显色底物。该酶-底物反应生成黄色产物，在420nm 有最大吸收，且405nm处强度也很高(与常用的酶标仪滤镜设置匹配)。其反应原理如下：


储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·核酸内切酶III(Nth)
编号：BTN130639
英文名称：Endonuclease III(Nth)
规格：1000U
核酸内切酶III(Nth)既有N-糖基化酶活性也有AP-裂解酶活性，占E.coli AP酶总活性的90%。N-糖基化酶活性可释放双链DNA上受损的嘧啶碱基，产生一个脱嘧啶

(AP)位点。AP-裂解酶活性则切割AP位点的3´端，产生一个5´磷酸和一个3´磷酸-α,β不饱和醛。被核酸内切酶III识别并切除的受损碱基包括：尿素、5,6二羟基

胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羟基-5-甲内酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羟基-5,6-二羟基胸腺嘧啶和甲基羟丙二酰脲。

产品用途：
➤ 单细胞凝胶电泳(彗星试验)，彗星试验的推荐稀释倍数1:10⁴～1:10⁵；
➤ 碱性析出；
➤ 碱解旋。

产品组成：

 

成分	规格
核酸内切酶III(Nth)(10000 U/mL)	100μL
10×Buffer	1ml
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

热失活：65℃20分钟。

活性定义：1单位指在10μl缓冲液体系中，37℃条件下，1小时内能够切割1pmol含一个AP位点的34bp寡核苷酸双链所需要的酶量。

AP位点的创建方法如下：37℃条件下，用1单位尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)处理10pmol含单一尿嘧啶碱基的34bp寡核苷酸双链2分钟。



北京现货RNase A干粉哪里卖关键词：RNase A Powder,RNase A干粉,BTN90205


·T3体外转录试剂盒
编号：BTN91108
英文名称：T3 in vitro Transcription Kit
规格：50次
本试剂盒是基于沙门氏噬菌体T3 RNA聚合酶的RNA体外转录试剂盒，它利用含有T3启动子的模版DNA，以NTP为底物，从T3启动子下游开始合成与模板DNA中一条链互补的RNA，简单快速获得大量的RNA分子。

产品特点：
1. 即开即用，用户只需提供含T3启动子的DNA模板即可以进行体外转录实验，不需耍单独准备每一个成份。
2. 单溶液预配液，减少加样次数，避免了操作误差，增加了可重复性。
3. 模板DNA可以是线性化的质粒DNA，也可以是PCR扩增产物。
4.可以合成的RNA的最佳长度在20nt到5000nt之问。
5.产品配方经过精心优化，每μg DNA模板可以合成2-6μg RNA。
6. 得到的RNA可以用于RNA结构研究、核解生物化学、体外翻译、RNA-蛋白质相互作用、反义技术、SELEX技术和RNA干扰(RNAi)等实验。

试剂盒组成：

成分	规格
转录预配液(2×)	0.5mL
阳性对照DNA(1.3 Kb片段)	20μL(10ng/μL)
T3 RNA聚合酶混合液	50μL
RNase-free水	1mL
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一、制备DNA模板
PCR片段和质粒DNA都可以用作体外转录的模板，但是必须注意以下几点：
1)必须使用线性化的DNA。如果是质粒DNA，则必须先用适当的限制性内切酶切成线状。
2)是需要转录的DNA序列的上游必须有T3启动子。如果模板是PCR产物，则可以在设计引物时将T3启动子序列(5´AATTAACCCTCACTAAAGG 3´)加上。如果是将DNA片段克隆到载体上，则需要选择有T3启动子的载体，并且克隆位点必须位于T3启动子下游。
3)是需要转录的DNA序列的下游端最好不要是3´突出。如果是3´突出(如选择了Pst I来线性化质粒)，则最好用T4 DNA聚合酶修平。
4)是必须保证DNA模板中没有RNase。由于提取质粒DNA的过程中一般要使用大量的RNase A，因此质粒DNA一般都有严重的RNase A污染，所以在用作模板前，最好采取胶回收得方法回收质粒DNA。并且加入少量总RNA一起保温，然后电泳检测RNA是否被降解，以此判断纯化的DNA模板是否有残留RNase A。

二、体外转录反应
1.在一个RNase-free的塑料离心管中，在室温下(不是在4℃下)按次序加入下列成分：

成分	加入量	备注
DNA模板	xμl	总量在50 ng-1μg(如果模板是PCR片段，建议用50ng左右；如果模板是质粒DNA，建议用1μg左右；如果用本产品提供的阳性对照，建议用4μL)
转录预配液，2×	10μl	需室温时使用
T3 RNA聚合酶混合液	1μl	本成分还含其他促进剂，所以是混合物
RNase-free水	补水到20μL

注：此为20μL反应体系的用量，对其他体积的反应体系，各成分的用量可以按比例增减。如果需要标记RNA探针，则需要定做NTP分开而不是NTP预先混合的试剂盒。如果需要得到加帽RNA，则需要加入自备的加帽修饰核苷酸(本公司有各种加帽修饰核苷酸)。
2. 37℃保温1-2小时。注意：延长保温时间并不能提高产量。
3. 70℃加热10分钟灭活T3 RNA聚合酶。
4. 取1-3μL电泳检测转录效果。一般1μg DNA可以合成 5-10μg的RNA。
5. 得到的RNA可以放-80℃保存。

若需进一步去除DNA模板，可参考下列操作步骤，但所用试剂需另行购买，本试剂盒不提供。
1.在体外转录结束后，在反应体系中加入3-5U自备的RNase-free DNase(BTN90903；3-5U/μL)。
2. 37℃保温15-30分钟。
3. 补水到100μL，
4. 用自备的等体积(100μL)的Tris饱和酚-*仿抽提一次去除残留的DNase和RNA聚合酶。
5.在上清中加200μL自备的微量核酸沉淀剂(BTN50903；用前需要摇晃混匀)，振荡后15000rpm离心3～5分钟，弃上清。
6. 加入1mL 75%乙醇，震荡10秒后15000rpm离心3～5分钟，弃上清。
7. 短暂离心数秒，用枪头吸弃上清。
8. 晾干半分钟，所得沉淀即去除DNA模板后的RNA。可溶于RNase-free水中后立即使用或放-80℃长期保存。

疑难解答：
1、没有RNA产物。最常见原因是DNA模板有RNase污染，测试方法是用纯化的RNA跟模板DNA一起保温，再检测RNA是否降解。本试剂盒缓冲液和酶混合液中有RNase inhibitor，如果模板RNase污染严重，可能需要用户补加RNase inhibitor。
2、RNA产量低。最常见的原因是DNA模板序列。在转录序列的第一个和第二个碱基最好都是G，在前14个碱基内避免有U存在。
3、RNA长度比预期的短。可能是模板序列中有T3 RNA聚合酶的终止序列。可以改用SP6或T7体外转录试剂盒(启动子也必须改成SP6或T7启动子)。
4、RNA长度比预计的长。T3 RNA聚合酶跟Taq DNA聚合酶一样，有不依赖于模板的加尾功能，最多有一半的RNA可以带一个或两个碱基的尾巴。如果RNA长度比预计的长很多，使用的模板又是质粒DNA，则可能是质粒DNA线性化不彻底。
5、5´单磷酸还是三磷酸。如果使用GTP，则得到的RNA是三磷酸，体外转录时如果保温时间太长(如12小时)，则有50%的三磷酸会变成单磷酸。如果在转录体系中加入GMP，则T3 RNA聚合酶将优先使用GMP，所得RNA产物中5´端是单磷酸的比例将大大增加。


北京现货RNase A干粉哪里卖关键词：RNase A Powder,RNase A干粉,BTN90205

BL1349 超低分子量蛋白MARKER
低聚木糖 VB1
ARB12553 大鼠胱天蛋白酶3(CAsp-3)酶联免疫定量检测 Rat caspase 3,casp-3 ELISA KIT
BTN131143 AMPPD AMPPD
PL1101 质粒大量提取试剂盒(离心柱型)
ARB13108 小鼠骨保护素配体(OPGL)含量检测 Mouse osteoprotegerin ligand,opgl ELISA KIT
27025-41-8 L-Glutathione,Oxidized　氧化型谷胱甘肽
ARB13596 兔子免疫球蛋白A(IgA)含量测试 Rabbit immunoglobulin a,IgA ELISA KIT
BL0955 胶体金标记兔抗山羊IgG抗体
SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒   50T|100T
5×Tris-甘*酸电泳缓冲液 500ml
F030804 BIOTIN标记小鼠抗猴IgG抗体 Monoclonal Mouse Anti-Monkey IgG*BIOTIN
SJ0197 DEAE Sepharose CL-6B
尿素溶液(9.5mol/L)   100ml
3-[N-(1,1-二甲基-2-羟yi基)]*基-2-羟丙*(代"烷")磺酸 N-Cbz-Hydroxy-L-proline 68399-79-1
CYB166012-D 兔抗大鼠IgG-GOLD
芥子酸 GSH-Px 530-59-6
137-16-6 Sodlum Lauroylsarcosine 十二烷基肌*酸*
ARB12066 大鼠巨噬细胞炎症蛋白5(MIP-5)代做ELISA实验 Rat macrophage inflammatory protein 5,mip-5 ELISA KIT
ARB13119 小鼠钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH)尿液中含量检测 Mouse keyhole limpet hemocyanin,klh ELISA KIT
9001-12-1 胶原酶Ⅴ CollagenaseⅤ
改良Weigert弹力纤维染色液   5×50ml

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