BTN100937型phi29 DNA聚合酶报价

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BTN100937型phi29 DNA聚合酶报价由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于生化研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多phi29 DNA聚合酶等工具酶产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：BTN100937型phi29 DNA聚合酶报价
英文名：φ29 DNA Polymerase
编号：BTN100937
产地：国产|进口
从Bacillus subtilis 噬菌体phi29中克隆出的嗜温DNA聚合酶phi29 DNA Polymerase是一种高持续扩增能力的聚合酶(最长达70 kb)，具有很强的链置换和连续合成特性，并具有3´→5´核酸外切酶(校正)活性。本产品的浓度为10U/μL。

产品特点：
1．在所有已知的聚合酶中，具有最高的合成持续性和链置换活性。最长可合成70 kb长度的DNA片段。
2．中温条件下高保真复制。
3．扩增产物可直接用于下游应用，如 PCR、限制酶切、SNP基因分型等。

产品组成：

 

成分	规格
phi29 DNA聚合酶(10U/μL)	25μl
10×phi29 DNA聚合酶 Buffer	250μl
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

失活条件：65℃下10分钟热失活。

存储条件：100mM KCl，50mM Tris-HCl(pH7.5)，1mM DTT，0.1mM EDTA，0.5% NP40，0.5% Tween 20和50%甘油，贮存于-20℃。

10×phi29 DNA聚合酶Buffer的组成：330mM Tris-acetate(pH7.9 @ 37℃)，100mM Mg-acetate，660mM K-acetate,10mM DTT，1%(v/v)Triton X-100。

活性定义：1U指30℃条件下，10分钟内使0.5pmoL的dCTP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。

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TEN缓冲液(1×,pH8.0)   500ml
3-[N,N-双(2-羟yi基)]*基-2-羟基丙磺酸 N-CBZ-L-Proline 68399-80-4
*黄绿素二*盐 4-(4-Nitrophenylazo)-1-naphthol 108750-13-6
NF-210 羊抗人C4血清
CYB165008 生物素化羊抗人IGM
ARB10649 人血管生成素1(ANG-1)含量测试 Human angiopoietin 1,ang-1 ELISA KIT
辛可宁 5"-GDP,2Na 118-10-5
RN3101 EASYspin 石蜡包埋组织microRNA快速提取试剂盒
298-83-*(代"9") NBT *化硝基四氮唑兰
Taq Plus MasterMix 
ARB10533 人鸟*酸脱羧酶(ODC)elisa测定使用说明书 Human ornithine decarboxylase,odc ELISA KIT
PY02-279  嗜冷菌计数琼脂(乳平板计数琼脂)  250克  
胭脂红指示剂   100ml
5-尿苷三磷酸三*盐 CHES 19817-92-6
ARB13707 兔组织因子(TF)ELISA检测服务 Rabbit tissue factor,tf ELISA KIT
氮尿苷 HEPE 54-25-1
ARB12196 大鼠半胱天冬蛋白酶3(CAspAse3/CPP32)Elisa分析 
1132-61-2 MOPS 3-(N-吗*(代"啡")啉)丙磺酸
BTN100937型phi29 DNA聚合酶报价关键词：phi29 DNA聚合酶,φ29 DNA Polymerase,BTN100937


·动物线粒体纯化试剂盒A(粗提)
编号：BTN111207A
英文名称：Animal Mitochondria Purification Kit(A)
规格：5次
线粒体是非常重要的细胞器，它不但跟很多人类疾病相关，而且还是母系遗传研究的重要材料。对线粒体进行遗传研究和生化研究都需要纯化线粒体。本产品可用于纯化动物细胞线粒体的试剂盒。

产品特点：
1．即开即用，用户不需要自己配制各种溶液，优化各种条件。
2．有粗提和精提两个选择，但是精提需要超速离心机。粗提所得线粒体可以直接用于蛋白分析(SDS-PAGE、Western Blot、ELISA等)、蛋白组分析和线粒体DNA纯化。精提线粒体可以用于偶联分析和体外线粒体蛋白合成等实验。
3．本产品一次可以处理约2×108个培养细胞，30mg培养细胞(相当于15瓶150mm培养细胞)可以纯化到到0.5-1.5mg线粒体。
4．本产品适用于各种动物悬浮培养细胞和贴壁培养细胞，不能用于动物实体组织。
5．提供线粒体染液，可以在操作中随时监测纯化过程中线粒体的完整性。

试剂盒组成：

粗提型(BTN111207A)

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	250ml
蔗糖	80g
詹纳斯绿B染色液(0.2%)	1ml

精提型(BTN111207B)

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	250ml×2
蔗糖	100g
詹纳斯绿B染色液(0.2%)	1ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，保存期限一年。

使用方法：
注意：线粒体膜对温度高度敏感，所以整个操作必须在冰上或冷室进行，所要用到的溶液和离心管都必须预先冷却，否则线粒体容易破裂。

一、准备工作(此步骤同柱式动物线粒体DNA提取试剂盒中线粒体提取步骤)。未用完的下列溶液需要-20℃保存，否则容易长菌。下次使用前务必让沉淀溶解并摇晃均匀。
1．将溶液A和溶液B放冰上预冷待用。
2．配制1.7M高比重溶液(仅限BTN111207B精提型试剂盒，BTN111207A粗提型试剂盒不需要配制此溶液)：36克蔗糖用溶液B溶解并定溶到60mL，冰上预冷待用。
3．配制1.0M低比重溶液，BTN111207A粗提型试剂盒需要100mL，配制方法是将34克蔗糖用溶液B溶解并定溶到100mL，冰上预冷待用。111207B粗提型试剂盒需要150mL，配制方法是将51克蔗糖用溶液B溶解并定溶到150mL，冰上预冷待用。
4．配制线粒体重悬液，BTN111207A粗提型试剂盒需要200mL，配制方法是将150mL溶液B和50mL 1.0M低比重溶液混合；BTN111207B精提型试剂盒需要300mL，配制方法是将225mL溶液B和75mL 1.0M低比重溶液混合，即得300mL 线粒体重悬液，冰上预冷待用。

二、线粒体粗提(此步骤同柱式动物线粒体DNA提取试剂盒中线粒体提取步骤)
5．如果提取材料是单层细胞，先用60mL自备的PBS缓冲液洗涤2×108个培养的单层细胞，共洗涤2次。然后用塑料刮匙刮下细胞，重悬在60mL PBS缓冲液中。如果是悬浮细胞，则1000g 4℃离心10分钟收集2×108个细胞，再用60mL PBS缓冲液洗涤2次，最后将细胞重悬在60mL PBS缓冲液中。
6．用平甩转子(swinging-bucket rotor)离心机1000 g 4℃离心10分钟，吸弃上清，保留细胞沉淀。
7．加入5倍体积(以细胞沉淀的体积为基数)的预冷的溶液A，轻柔重悬细胞。
8．冰上放置4-5分钟。注意：冰浴时间不要超过5分钟。
9．如果是成纤维细胞，由于其难以裂解，可将细胞重悬液在-80℃放置20-30分钟后再化冻，然后进入下步操作。如果不是成纤维细胞，则直接进入下步操作。
10．将细胞重悬液体转移到预冷的Dounce玻璃匀浆器中(工作体积为10-15mL，间隙为0.12 mm，最好是玻璃材质，否则线粒体产率会降低)匀浆适当次数。细胞株不同，其最适匀浆次数不同，一般需要40次-60次左右。匀浆是线粒体纯化最关键的步骤，故匀浆前最好先通过预实验确定最适匀浆次数，方法是每匀浆5-10次后，取2-3μl匀浆液到载玻片上，然后在相差显微镜下观察，完整细胞数量降低到20%以下为佳。
11．加入1/3体积的、预冷的1.0 M低比重溶液，轻柔混匀。
12．用平甩转子离心机4℃ 1000 g离心10分钟。沉淀含残留完整细胞、细胞碎片和细胞核，上清液含线粒体。
13．转移上清液到离心管中，冰上放置。在显微镜下检测上清液中线粒体的完整性。具体做法是先滴50μL左右上清液到载玻片上，再滴入50μl詹纳斯染液绿B染色液20分钟，油镜下观察，蓝绿色颗粒状物即为线粒体。
14．用固定角度转子(fixed-angle rotor)离心机4℃ 15000g离心15分钟，弃上清，所得棕黑色沉淀即为粗提线粒体沉淀。
15．用10mL线粒体重悬液重悬线粒体，4℃ 15000g离心15分钟，弃上清。
16．重复上步一次。
17．最后用适量的线粒体重悬液重悬线粒体，可用于各种后续实验(本试剂盒不提供相关试剂)，如果用于下面的精提操作，则用10mL线粒体重悬液重悬。

三、线粒体精提(需要超速离心机)
18．在跟超速离心机匹配的50mL的离心管中，加入10mL预冷的高比重溶液，再在上面加上10mL预冷的低比重溶液，最后再加上10mL线粒体粗提液。
19．70000g 4℃离心40分钟，线粒体将位于高比重溶液和低比重溶液之间区域。
20．小心用广口吸管吸出线粒体到新的离心管中，加入等体积的线粒体重悬液。
21．用平甩转子离心机1000 g 4℃离心10分钟，吸弃上清，保留线粒体沉淀。
22．用10mL线粒体重悬液重悬线粒体，在平甩转子离心机上4℃ 1000g离心10分钟，吸弃上清，保留线粒体沉淀。
23．再重复上步一次。
24．最后用适量线粒体重悬液重悬线粒体，得到线粒体精提液。可以直接用于Lowry法蛋白浓度测定，也可以用于其他后续实验。


BTN100937型phi29 DNA聚合酶报价关键词：phi29 DNA聚合酶,φ29 DNA Polymerase,BTN100937

PY01-122  大豆分离蛋白  250克  
*化*(代"*")-EDTA溶液(0.15mol/L)   100ml
L-甘-酪二肽 N,N-Dimethylglycine hydrochloride 658-79-7
缩二脲 3-O-Methylglucose 108-19-0
*酚蓝蔗糖溶液(0.25%)   10ml
ARB12240 大鼠血管内皮细胞生长因子受体1(VEGFR-1/Flt1)定量分析 Rat vascuoar endothelial cell growth factor receptor 1,vegfr-1/flt1 ELISA KIT
ARB12555 大鼠脂多糖/内毒素(LPS)代做ELISA实验 
十二烯基丁二酸酐 D-a-Aminoadipic acid 25377-73-5
BTN60102 *霉素干粉 Chloramphenicol Powder
L-亮*酸 L-Tyrosine ethyl ester hydrochloride 61-90-5
(*并三氮唑-1-基氧基)二吡*(代"咯")烷碳六*磷酸盐 3,5-Dinitrosalicylic acid 105379-24-6
硫*(代"酸")亚锡 Pepstatin A 7488-55-3
2×GC rich PCR MasterMix 
ARB10523 人白细胞活化黏附因子(ALCAM)含量分析 Human activated leukocyte cell adhesion molecule,alcam ELISA KIT
CYB164008 兔抗猴IgG-HRP
麝香草酚蓝指示剂   100ml
BFD073 H9亚型禽流感抗原快速检测卡
BTN81206 *基黑染膜液 Amido Black 10B BlotStain
黄蓍树胶粉 SB3-10 9000-65-1

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