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- 百奥莱博
- BTN80205-WOP
- 北京
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
391
- 英文名：
DMSO，PCR Grade
- 保质期：
一年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
常温
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")DMSO，PCR级品牌，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。
名称：DMSO，PCR级品牌
产地：国产|进口
英文名：DMSO，PCR Grade
规格：1.5mL
大量实验显示5-10%的DMSO能够促进PCR反应，尤其是高GC模板的PCR反应，本产品就是专门用于PCR或RT-PCR的高纯度DMSO。
储存条件：常温运输及保存，有效期一年。
除DMSO，PCR级品牌外，我公司正在打折促销以下产品：
·痰液采集器
编号：BTN130938
英文名称：Sputum collector
规格：1个
·柱式Oligo回收试剂盒
编号：BTN80401
英文名称：Oligo column recovery kit
规格：50次
·糖原干粉(分子生物学级)
编号：BTN131189
英文名称：Glycogen Powder
规格：1g
本产品为分子生物学级糖原干粉。不含DNase，RNase，可以用作沉淀DNA或RNA的辅助沉淀剂。
储存条件：室温运输和保存，有效期一年。
·即用型热启动PCR试剂盒
编号：BTN130986
英文名称：Instant Hotstart PCR MasterMix
规格：1.5mL
本产品是即用型的2×高保真PCR预配反应液，含有除引物、模板以外的所有PCR 试剂，包括Pfu DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 增强剂、上样染料等，特别适合于高保真PCR反应。
产品特点：
1. Pfu DNA聚合酶是使用最广泛的高保真酶，其保真度为普通Taq酶的10倍。
2. 使用时只需在加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应，非常方便，简化了PCR的准备工作。
3. PCR反应所必需试剂全集于一管之中，数分钟即可完成反应体系配置。由于加样过程少，有利于减少污染，降低实验误差。
4. 本产品A型含电泳染料，PCR反应液可直接上样电泳，进一步简化了操作。
5. 由于各成分的浓度和比例都经过精心优化，反应的灵敏度高，特异性强。
6.适用于基因的高保真扩增和基因定点突变等实验，得到的PCR产物可用于平末端克隆。
储存条件：低温运输，-20℃保存，保存期限为12个月。
使用方法：
将本产品与用户自备的模板，引物混合液按下列推荐使用量(30μL反应体系)加入PCR 管中即可进行PCR，反应结束后直接取5-15μL电泳检查扩增结果。如果反应体系不是30μL，各成分需要按比例增加或减少。
| 试剂 | 加入量 | |
| Hotstart PCR Mix | 25μL | |
| DNA模板(自备) | 哺乳动物基因组DNA | 0.5-1μg |
| 酵母基因组DNA | 5-500ng | |
| 细菌基因组DNA | 0.5-50ng | |
| 质粒DNA | 5-500pg | |
| PCR回收片段 | 1-100pg | |
| PCR引物(自备) | 10pmol each | |
| 补水到 | 30μL | |
放入PCR 仪中，根据用户确定的参数进行PCR，扩增结束后取5-10μL上样电泳。
注：用户可按照每1.5mL Hotstart PCR Mix中加入60μl 专用染料的比例将60μl 专用染料加入到1.5mL PCR MagicMix 3.0中，本染料对PCR扩增效率没有任何影响。扩增结束后，可直接取PCR反应液上样电泳，不需要额外再加DNA上样液。
注意事项：
1．如果反应体系不是30μl，各成分需要等按比例增加或减少。
2．如果DNA 模板中有PCR 不明抑制物(植物、土壤和血液等DNA样品常含此类抑制物)，可以在PCR 体系中加入1/10的PCR 抑制物清除剂(BTN60804，30μl 体系中加3μl)，可能会对PCR 有帮助。
DMSO，PCR级品牌关键词：DMSO，PCR Grade,DMSO，PCR级,BTN80205
ARB11622 人粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)免费代测 Human mucin-5 subtype b,muc5b ELISA KIT
2′-脱氧腺苷-5′-二磷酸二*盐 Orcein 72003-83-9
PY01-187 鸡肉浸粉 250克|1公斤
ARB14085 犬血管活性肽(VIP)elisa测定使用说明书
BTN61202 一步式广谱DNAOUT Magic DNAOUT
核酸沉淀溶液(TCA法) 100ml
4578-31-8 5-单磷酸腺苷 AMPNa2
BL1318 dNTPs Mix(10mM each)
ARB13166 小鼠热休克蛋白60(Hsp-60)代做ELISA实验 Mouse heat shock protein 60,hsp-60 ELISA KIT
ARB10671 人血管紧张素Ⅱ受体IA型(AgtrIA)含量测试 Human angiotensin Ⅱ receptor type ia,agtria ELISA KIT
ARB11837 人凝血因子Ⅲ(FⅢ)免费代测 Human coagulation factor Ⅲ,fⅢ ELISA KIT
I型核酸染色剂 β-Naphthol Violet
ARB13912 猪纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)酶免分析 Porcine plasminogen activator inhibitor 1,pai-1 ELISA KIT
DMSO，PCR级品牌关键词：DMSO，PCR Grade,DMSO，PCR级,BTN80205
·3´RACE试剂盒
编号：BTN101104
英文名称：3´-RACE Kit
规格：10次
研究真核基因的最基础的工作之一就是确定其转录终止位点，目前最通用的方法是3´-RACE法，RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)是Frohman发明的、通过PCR快速克隆cDNA末端的技术，它在不建立cDNA文库的前提下，利用已知cDNA序列设计引物，通过往两端延伸和扩增获得其3´-端序列。本试剂盒就是根据3´-RACE原理而开发。RACE的原理如下图：
产品特点：
1. 即开即用，客户不需要单独准备各种材料。
2.反应条件经过精心优化，包括使用无RNase H活性的MMLV和优化的引物。
试剂盒组成：
| 成分 | 规格 |
| MMLV逆转录酶-RI混合物(RNase H-，200U/μL) | 10μl |
| MMLV Buffer(含dNTP) | 50μl |
| PCR MagicMix 2.0(含酶和染料) | 1.5ml |
| 3´-RACE引物A(10μM) | 10μl |
| 3´-RACE引物B(10μM) | 100μl |
| 3´-RACE引物C(10μM) | 100μl |
| RNase-Free水 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件：低温运输、-20℃保存、有效期一年。
使用方法：
一、利用含Oligo(dT)的3´-RACE引物A进行逆转录
注意：MMLV酶使用前必须短暂离心，因为它含50%甘油，及其粘稠，否则将取不到所需体积。
1.在一个PCR管中，加入以下组分：
| 成分 | 用量 |
| Poly(A)RNA(或总RNA) | 0.2-2μg(5μg) |
| 3´-RACE引物A(10μM) | 1μL |
| MMLV Buffer(含dNTP溶液) | 5μL |
| RNase-Free水 | 补至19μL |
| 合计 | 19μL |
注意：如果可能，最好使用Poly(A)RNA作为模板。
65℃保温5分钟，展开RNA的二级结构，立即冰浴待用。
2. 再在上述PCR管中加入1μl MMLV逆转录酶-RI混合物(200U/μL)。
3. 37℃保温60分钟，42℃保温30分钟进行逆转录反应；然后50℃保温10分钟终止反应。
4. 加入0.5mL RNase-free水稀释上步得到的cDNA，冰浴待用。长期放置需要放-20℃保存。
二、利用基因专一性引物A和3´RACE引物B进行第一轮PCR
5. 用不同量的RT反应液(稀释后的cDNA)设置PCR(样品组最好设置用量梯度，单位：μL)。
| 成分 | 梯度1 | 梯度2 | 梯度3 | 梯度4 |
| 稀释后的cDNA | 1 | 5 | 10 | 15 |
| 基因专一性引物A(10μM) | 2.5 | 2.5 | 2.5 | 2.5 |
| 3´RACE引物B(10μM) | 2.5 | 2.5 | 2.5 | 2.5 |
| 98℃ 5分变性RNA-cDNA杂交链，短暂离心后再加入下列成分 | ||||
| PCR MagicMix 2.0 | 25 | 25 | 25 | 25 |
| RNase-free水 | 19 | 15 | 10 | 5 |
| 合计 | 50 | 50 | 50 | 50 |
6. 按下列条件进行PCR(注：应根据实际情况选择适当的退火温度)。
第1次循环：52-60℃ 2分，72℃ 40分(此步的目地是合成第二链的cDNA，复性温度需要根据自备基因专一性引物A的Tm值进行优化，一般可以从55℃开始)。
第2-30次循环：94℃ 1分钟，52-60℃ 1分，72℃ 3分(此步为PCR扩增，复性温度需要根据自备基因专一性引物A的Tm值进行优化，一般可以从55℃开始)。
最后延伸：72℃ 15分
7. 取5μl的PCR反应液进行琼脂糖凝胶电泳以确认PCR扩增产物。若得到目的扩增产物需要用于后续实验，请于-20℃保存；若没有得到目的扩增产物，可按下列步骤进行巢式PCR反应。
三、利用基因专一性引物B和3´RACE引物C进行巢式PCR反应
8. 将上轮PCR产物(4管)均用水稀释稀释20倍，然后每管均用巢式PCR进行扩增。巢式PCR反应设置如下：
| 成分 | 用量 |
| PCR MagicMix 2.0 | 25μl |
| 上步得到的PCR反应液(稀释20倍后) | 1μl |
| 基因专一性引物B(10μm) | 2.5μl |
| 3´RACE引物C(10μm) | 2.5μl |
| 超纯水 | 补至50μL |
9. PCR反应。按下列条件进行PCR：
第1-30次循环：94℃ 1分钟，52-60℃ 1分，72℃ 3分(复性温度需要根据自备基因专一性引物B的Tm值进行优化，一般可以从55℃开始)最后延伸：72℃ 15分
10.电泳检测。然后根据实验结果进行DNA测序或TA克隆。
注意事项：
1. 如果两轮PCR得到的非特异产物多，可以在RT反应是继续降低3´-RACE引物A的用量。
2.自备的基因专一性引物的GC含量最好跟3´-RACE引物B和引物C的一致，后者长度均为18nt，均含11个G(或C)，7个A(或T)。
北京百莱博科技有限公司是核酸扩增(PCR)产品的专业生产供应销*(代"售")商，恭候您的咨询选购DMSO，PCR级品牌。
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文献和实验，falcon品牌的培养瓶。 i.询问你的代理商或者经销商，接到细胞株后是否需要离心置换出DMSO，因为有些细胞厂家建议不要离心，他们会认为离心而导致的碎片比DMSO产生毒性的害处更大，如果可以离心，转速不要过高，一般都在1000转以下，此处需要注意，因为有的公司会拿这一点来拒绝索赔。 j.培养基的服务，仔细与供应商确认培养基的品牌及份量，以免供应商以些理由来推翻你索赔的理由。 k.在细胞株复苏时，一定要先想好步骤再做，一步一步来做，避免导致操作中的污染，复苏是一个非常重要
的冻存管，而且每一支冻存管上都会有批号，而且每次的批号都不一样。f.在决定购买细胞株之前，必须仔细阅读他们的培养信息，所谓“细胞株未到，培养基先行一步”。g.在接到细胞株后，最好要求供应公司的人员现场参与，从而用于确认责任。h.在培养前，请确认您的二氧化碳培养箱二氧化碳浓度的准确性，国外的细胞株建议用进口的细胞培养瓶，比如：orange，corning, falcon品牌的培养瓶。i.询问你的代理商或者经销商，接到细胞株后是否需要离心置换出DMSO，因为有些细胞厂家建议不要离心，他们会认为离心而导致
确认您的二氧化碳培养箱二氧化碳浓度的准确性，国外的细胞株建议用进口的细胞培养 瓶，比如：orange，corning, falcon品牌的培养瓶。 i.询问你的代理商或者经销商，接到细胞株后是否需要离心置换出DMSO ，因为有些细胞厂家建议不要离心，他们会认为离心而导致的碎片比DMSO产生毒性的害处更大，如果可以离心，转速不要过高，一般都在1000转以下，此处需要注意，因为有的公司会拿这一点来拒绝索赔! j.培养基的服务，仔细与供应商确认培养基的品牌及份量，以免供应商
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