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504
- 英文名:
Thioredoxin
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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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百奥莱博专业生产销*(代"售")BTN130870型硫氧还蛋白打折促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:BTN130870型硫氧还蛋白打折促销
规格:5mg
品牌:百奥莱博
编号:BTN130870
产地:国产|进口
英文名:Thioredoxin
硫氧还蛋白是一类广泛存在的热稳定的作为*载体的蛋白质(约12kDa)。在许多还原反应中作为*供体,特别是核苷二磷酸变成相应的脱氧产物和光依赖性的还原反应中。也以结构域的形式出现于二硫键异构酶中,在蛋白折叠过程中,硫氧还蛋白可以催化二硫键的正确形成。
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BTN130870型硫氧还蛋白打折促销关键词:Thioredoxin,BTN130870,硫氧还蛋白
·植物叶绿体蛋白提取试剂盒
编号:BTN130887
英文名称:Plant Chloroplast Protein Extraction Kit
规格:15次
本试剂盒是结合植物叶绿体纯化试剂盒和细菌蛋白质提取试剂盒而推出的新兴产品,专门用于植物叶绿体蛋白的快速提取。
产品特点:
1. 即用型试剂盒,用户不需要单独配制各种溶液。
2. 本产品足够15次提取,每次可处理30g叶片。
3. 得到的提取物可以直接用于SDS-PAGE、2D电泳、免疫印迹分析、蛋白活性测定和BCA法及Lowry法蛋白定量(不适用于Bradford法)。
4. 已经成功用于菠菜、大豆、莴笋、白菜、烟草和甜菜等植物,还可用于更多植物(可能需要优化条件)。
试剂盒组成:
| 成份 | 规格 |
| 匀浆液成分一 | 250mL×2 |
| 匀浆液成分二(干粉) | 3g |
| Percoll | 60mL |
| 带柄尼龙滤膜 | 1个 |
| 植物叶绿体纯化试剂盒 | 15次 |
| 溶液A | 15mL |
| 溶液B | 1.5mL |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,保存期限一年。
使用方法:
注意:叶绿体对温度高度敏感,所以整个操作必须在冰上或者在冷室进行,所用器皿和溶液均需要在4℃预冷。离心时一定要在4℃进行,离心力以g而不是rpm计算。如果需要研究叶绿体的功能,提取还需要在昏暗的光线条件下进行。
一:叶绿体的纯化
1. 实验前1-2天将植物放在暗室培养以减少叶绿体中淀粉颗粒的形成,否则离心时这些颗粒很容易使叶绿体破裂。叶片在实验前需先用自来水洗净,再用蒸馏水淋洗,去掉多余水分。如果叶片采集后不能立即处理,则保存时需要保持叶片湿润,即使如此,叶片的放置时间也不能超过一天。
2. 新鲜(实验当天)制备匀浆液:将自备的去离子水与匀浆液成分一按4:1的比例混合,然后在混合液中加入匀浆液成分二干粉到终浓度0.1%(每100mL中加入0.1 g干粉),摇晃溶解后所得溶液即为匀浆液,冰上预冷待用。一次实验(从30 g叶片提取叶绿体)所需要的匀浆液体积跟材料不同而不同。
3. 新鲜采集植物叶片,快速去除叶脉并将叶片剪成1-3 cm2大小的碎片并浸泡在适量的预冷的匀浆液中(每克叶片加4mL匀浆液,但对烟草和大豆,每克叶片需要加6mL匀浆液)。
4. 将浸泡了叶片的匀浆液转移到Waring匀浆机(即家用制备果汁的匀浆机)中,低速匀浆10秒,避免起泡沫。用玻璃棒把液面的碎片按入匀浆机底部后,再低速匀浆10秒。注意:除Waring匀浆机外,还可以选择Dounce玻璃匀浆器,Polytron匀浆机和研磨(加玻璃珠)等裂解细胞的方法,但这些方法的单次处理量都比较小,需分成很多小份单独匀浆,然后再汇集。
5. 用带柄尼龙滤膜过滤匀浆液,可先将滤液收集到预冷的200mL量筒中,再等分到4个预冷的50mL的塑料离心管中(每个管中的滤液不要超过35mL)。带柄尼龙滤膜后可反复使用。
6.在水平转子离心机上4℃ 200 g离心3分钟(对菠菜,白菜和莴笋材料)或400 g离心1分钟(对甜菜材料),白色沉淀为未破裂的细胞或细胞核。
7. 将上清液(含叶绿体)转移到一个新的、预冷的50mL塑料离心管中。
8.在水平转子离心机上4℃ 1000 g离心7分钟,小心弃上清,沉淀含叶绿体,呈浅绿色。
9.在沉淀中加入1.5mL预冷的匀浆液,手弹离心管底部使叶绿体重悬。注意:重悬时最好避免溶液起泡,也不要用枪头吹打,否则叶绿体容易破裂。沉淀下有白色淀粉属于正常现象,但重悬叶绿体时避免将白色淀粉重悬。
10. 将4管叶绿体重悬液汇集(共约6mL),得到叶绿体粗提液,可直接用于后续的SDS-PAGE,Western,ELISA和蛋白组分析。
11. 如果需要以之为材料精提叶绿体,就需要用密度梯度离心法将完整的叶绿体和其他污染物进一步分离。具体操作步骤是:在50mL塑料离心管中先加入6mL匀浆液成分一和4mL Percoll,充分混合均匀。在其液面上小心铺上叶绿体粗提液。在水平转子离心机上4℃ 1000 g离心8分钟,管底绿色沉淀为完整的叶绿体。小心将上清倒出后,用于叶绿体蛋白提取。
二:叶绿体蛋白质的提取
12. 将1mL的溶液A和100μL溶液B加入到叶绿体沉淀(约15mg湿重)中,吹打混匀。
13. 冰上放置30分钟至1小时至溶液变清。
14. 4℃ 1,2000 g离心1分钟。
15. 将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液,可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要进行SDS-PAGE电泳,可取部分样品到离心管中,加入5×SDS-PAGE上样缓冲液(终浓度为1×),在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。
BTN130870型硫氧还蛋白打折促销关键词:Thioredoxin,BTN130870,硫氧还蛋白
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北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购BTN130870型硫氧还蛋白打折促销。
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文献和实验卡那霉素选择,因此该菌株建议用于带氨苄抗性标记 bla 的质粒。 B834 为 BL21 的亲本菌株。这些蛋白酶缺陷宿主菌为甲硫氨酸营养缺陷型,可用 35 S- 甲硫氨酸和硒代甲硫氨酸对目标蛋白进行高特异活性标记,从而用于结晶学研究。 BL21 应用最广的宿主菌来源,具有 lon 和 ompT 蛋白酶缺陷的优点。 BL21 TrxB 菌株在蛋白酶缺陷 BL21 背景上具有与 AD494 菌株相同的硫氧还蛋白还原酶突变 ( trxB ) 。由于 trxB
亚硝酸还原酶 nitrite reductase 还原亚硝酸盐的酶,同化硝酸盐的同化型亚硝酸还原酶含 siroheme(参见亚硫酸还原酶),进行 6个电子的还原产生氨。高等植物、绿藻及蓝藻的酶以铁氧还原蛋白为电子供体。高等植物只存在于叶绿体或前质体中。菠菜叶的酶分子量 6万,含 siroheme、非血红素铁及对酸不稳定的硫。粗糙脉孢菌( Neur- ospora crassa)的酶(分子量 29万)及大肠埃希氏菌( Escherichia coli)的酶(分子量 19万, EC1.
的时候可以根据是否要用基因本身的起始密码子进行选择,Novagen公司仅提供三个载体:pET-21(+),pET-24(+)和pET-23(+)。如果你打算利用载体的起始密码子,那么就有许多选择。 根据是否要可溶性表达,选择加有不同标记的载体。一般说来在大肠杆菌中不加标记外源蛋白都会以不溶的包涵体形式表达。为了让外源蛋白融合表达一般说来有三个策略: 与一个高度可溶的多肽联合一起表达,比如:谷胱甘肽S转移酶(glutathione S transferase, GST)、硫氧还蛋白
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