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- 详细信息
- 文献和实验
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低温运输
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长期
- 英文名:
Biotin-Protein G
- 库存:
302
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")生物素化的蛋白G 蛋白质研究,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:生物素化的蛋白G 蛋白质研究
英文名:Biotin-Protein G
编号:BTN131098
产地:国产|进口
规格:0.5mg
品牌:百奥莱博
本产品为生物素标记的蛋白G,可用于生物素化二抗的替代物。可以检测或定位位于细胞表面或组织中免疫球蛋白。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
更多有关生物素化的蛋白G 蛋白质研究的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
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生物素化的蛋白G 蛋白质研究关键词:BTN131098,Biotin-Protein G,生物素化的蛋白G
·T4聚核苷酸激酶
编号:BTN120506
英文名称:T4 Polynucleotide Kinase
规格:250U
T4聚核苷酸激酶能够催化ATP的γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链(双链或单链DNA或RNA)的5´-羟基末端以及3´-单磷酸核苷上。本产品还具有3´磷酸酶活性,将3´-磷酸基团从寡核苷酸的3´磷酸末端、脱氧3´-单磷酸核苷和脱氧3´-二磷酸核苷上水解掉。其反应示意图如下:

产品用途:
1.DNA或RNA的末端标记,用作寡核苷酸探针和进行DNA测序。
2.寡核苷酸5´末端的磷酸化,以便进行连接反应。
3.除去3´磷酸基团。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| T4聚核苷酸激酶,10U/μL | 25μl |
| 10×反应缓冲液 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1 单位指在37℃条件下,30分钟内催化 1nmol 酸不溶性 [32P] 掺入所需要的酶量。
1×反应缓冲液:[70mM Tris-HCl(pH7.6@25℃),10mM MgCl2,5mM DTT],37℃温育。
热失活:65℃加热20分钟。
来源:重组E.coli菌株,克隆有T4多聚核苷酸激酶或修饰的T4多聚核苷酸激酶基因。
自备试剂:0.5M EDTA(pH8.0)、[γ-³²P或γ-³³P]-ATP或0.1mM ATP、DNA纯化试剂盒。
使用方法:
一、DNA 5´末端标记:
1.参考如下表格设置反应体系:
| 待磷酸化DNA | 1~50 pmol(5´末端) |
| 10×反应缓冲液 | 5μL |
| 自备的[γ-³²P或γ-³³P]-ATP(3000Ci/mmol) | 50pmol |
| 补充无核酸酶的去离子水 | 至48μL |
| T4聚核苷酸激酶,10U/μL | 2μL |
2.按上表设置好反应体系后,轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用Vortex在最低速度轻轻混匀),随后离心沉淀液体。
3.37℃孵育30分钟。
4.加入自备的1μL 0.5M EDTA(pH8.0)混匀,以终止反应。
5.后续可以使用酚*仿抽提、乙醇沉淀等方法纯化标记的DNA,也可以使用适当的DNA 纯化试剂盒进行纯化。DNA纯化试剂盒可以向我公司订购。
二、DNA 5´末端磷酸化:
1.参考如下表格设置反应体系:
| 待磷酸化DNA | 1~50 pmol(5´末端) |
| 10×反应缓冲液 | 5μL |
| 自备的0.1mM ATP | 3μL |
| 补充无核酸酶的去离子水 | 至48μL |
| T4聚核苷酸激酶,10U/μL | 2μL |
2.按上表设置好反应体系后,轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用Vortex在最低速度轻轻混匀),随后离心沉淀液体。
3.37℃孵育30分钟。
4.加入自备的1μl 0.5M EDTA(pH8.0)混匀,以终止反应。
5.后续可以使用酚*仿抽提、乙醇沉淀等方法纯化标记的DNA,也可以使用适当的DNA 纯化试剂盒进行纯化。
生物素化的蛋白G 蛋白质研究关键词:BTN131098,Biotin-Protein G,生物素化的蛋白G
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文献和实验Leupeptin,终浓度为1ug/ml ⑤Pepstatin,终浓度为1uM ⑥15ul BirA酶, 终浓度为0.1uM 2. 室温下孵育过夜。 3. 将上述生物素化反应液置低温离心机中,用最大速度离心以去除沉淀。
本法可使抗体或其它蛋白质的ε-氨基通过手臂与酰化的生物素共价结合。其后,生物素化的分子可应用酶标-亲和素或荧光染料-链霉亲和素复合物来检测。小分子的水溶性生物素对细菌蛋白链霉亲和素具有高度亲和力是本法的设计基础。 NHSB:N-羟基琥珀酰亚胺生物素(有商品供应) 0.1 mol/L 碳酸氢钠缓冲液,pH 8.0 双蒸水(注意去除游离氨基),用以配制碳酸氢钠缓冲液或硼酸缓冲液 DMSO(二甲亚砜,有毒试剂) 1 mol/L NH4Cl 叠氮钠(有毒试剂) PBS
本法可使抗体或其它蛋白质的ε-氨基通过手臂与酰化的生物素共价结合。其后,生物素化的分子可应用酶标-亲和素或荧光染料-链霉亲和素复合物来检测。小分子的水溶性生物素对细菌蛋白链霉亲和素具有高度亲和力是本法的设计基础。 l NHSB:N-羟基琥珀酰亚胺生物素(有商品供应) l 0.1 mol/L碳酸氢钠缓冲液,pH 8.0(见附录) l 双蒸水(注意去除游离氨基),用以配制碳酸氢钠缓冲液或硼酸缓冲液 l DMSO(二甲亚砜,有毒试剂) l 1 mol/L NH
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