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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
911
- 英文名:
Animal Nuclear Protein Miniprep Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输、4℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应动物细胞核蛋白微量制备试剂盒现货供应,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:动物细胞核蛋白微量制备试剂盒现货供应
编号:BTN90613
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
英文名:Animal Nuclear Protein Miniprep Kit
规格:25次
DNA只存在于细胞核内,因此参与转录调节和DNA复制的蛋白质主要存在于细胞核中,要研究蛋白质与DNA的相互作用,首先需要制备能够与DNA作用的天然细胞核蛋白质。目前、细胞核蛋白质制备方法一般都比较繁琐,一次处理大量样品时尤其不便,为此本公司开发了本产品,用于从哺乳动物组织和培养细胞核蛋白的微量提取。
产品特点:
1. 提取制备过程简便,只需要一小时。
2. 实验重复性好,尤其适合同时处理多个样品。
3.可用于培养的动物细胞,也可以用于新鲜组织细胞。
4. 制备的核蛋白能保持天然活性,可以直接用于转录因子活性分析、凝胶阻滞实验(gel shift assay)、免疫共沉淀、Western Blotting、DNA 足迹图实验和甲基化干扰实验酶活性测定等研究。
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 10ml |
| 溶液B | 2.5ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输、4℃保存,有效期一年。
使用方法:
实验前准备:取适当量的溶液A和溶液B置于冰上,在使用前数分钟内分别向溶液A和溶液B中加入自备的PMSF和DTT,使PMSF的最终浓度为0.2mM,DTT的最终浓度为1mM。实验中所用试剂均需先预冷。
一、对培养细胞和悬浮细胞:
1. 对培养细胞:将覆盖率为55-65%的培养细胞用自备的胰酶溶液(BTN90306)按标准的胰酶法处理,然后刮到1.5mL塑料离心管中,4℃ 800g离心30秒,小心弃上清。
2. 对悬浮细胞:直接将5×105-7个的悬浮细胞转移到1.5mL塑料离心管中,4℃800g离心30秒,小心弃上清。
3. 用1.5mL自备的预冷的PBS缓冲液洗涤细胞沉淀一次,然后4℃离心后弃上清。
4.在细胞沉淀中加入400μL预加了PMSF和DTT的溶液A,用手指弹管壁使沉淀悬浮起来。
5. 冰浴10分钟,涡旋激烈震荡10秒混匀。
6. 4℃ 2500g离心10秒,小心弃上清。
7.在沉淀中加入100μL预加了PMSF和DTT的溶液B,轻轻混匀使沉淀悬浮起来。
8. 冰浴 20分钟。
9. 4℃ 12000-16000g离心10分钟,小心收集上清液(细胞核提取物),可立即用于后续的凝胶滞后实验、BCA法蛋白浓度测定或活性检测等实验,也可以分装后放-70℃长期保存。
说明:本方法可以从1×10⁶的细胞中得到50-70ug的核蛋白质。
二、对新鲜组织:
10. 将100-150mg 新鲜组织置于培养皿中,用手术剪将组织尽可能切成非常细小的碎片,尽量去除脂肪组织和结缔组织等非目的组织,用自备的预冷的PBS洗涤2次,离心后去上清。在组织沉淀中加入400μl预加了PMSF和DTT的溶液A,冰浴或4ºC下在Dounce或Potter 玻璃匀浆器(BTN101103 ,可向本公司订购)内充分匀浆,一般上下手动匀浆30-50次(匀浆后应镜检,细胞破碎率不小于90%,同时没有明显的组织小块)。
11. 匀浆后把匀浆液转移到塑料离心管内,用手指弹管壁使沉淀悬浮起来,冰浴放置10-20分钟,涡旋激烈震荡10秒混匀。
12. 接下来按照步骤6-9操作,即得到新鲜组织细胞核蛋白提取物。
注意事项:
1. 所有接触样品的用具和试剂均需预冷,以免蛋白质的降解及失活。
2. PMSF一定要在抽提试剂加入到样品中前2-3分钟内加入,以免PMSF在水溶液中很快失效。
3. 本试剂盒只适用于新鲜的组织样品,对冻存过的组织抽提效果不是很理想。
除动物细胞核蛋白微量制备试剂盒现货供应外,我公司正在打折促销以下产品:
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动物细胞核蛋白微量制备试剂盒现货供应关键词:BTN90613,Animal Nuclear Protein Miniprep Kit,动物细胞核蛋白微量制备试剂盒
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动物细胞核蛋白微量制备试剂盒现货供应关键词:BTN90613,Animal Nuclear Protein Miniprep Kit,动物细胞核蛋白微量制备试剂盒
·填入法DNA末端标记试剂盒(地高*(代"辛")标记dUTP)
编号:BTN120653C
英文名称:Fill-in DNA End Labeling Kit
规格:5次
本试剂盒是基于Klenow DNA聚合酶填平DNA片段能力的填入法标记试剂盒,该反应的示意图如下:
产品特点:
1.快速,15分钟即可完成标记反应。
2.可用于标记5´突出的双链DNA。
3.可用同位素底物和非同位素底物(生物素和地高*(代"辛")标记的核苷酸等)。
4. 标记的探针可用于电泳迁移率实验(EMSA)、原位杂交(ISH)、Northern Blot(不推荐用于低丰度RNA检测)、小RNA Northern、Southern Blot(不推荐用于单拷贝基因检测)、菌落杂交、斑点印迹杂交分析等。
试剂盒组成:
| 组份 | BTN120653A | BTN120653B | BTN120653C |
| 填入法标记缓冲液,5× | 50μl | 50μl | 50μl |
| Klenow DN聚合酶(1U/μL) | 5μl | 5μl | 5μl |
| dNTP(2mM) | 25μl | - | - |
| 含Biotin-dUTP的dNTP | - | 25μl | - |
| 含DIG-dUTP的dNTP | - | - | 25μl |
| 超纯水 | 1ml | 1ml | 1ml |
| 说明书 | 一份 | 一份 | 一份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
我公司生产供应销*(代"售")的蛋白质研究产品正全系列现货促销,满分期待您的垂询选购动物细胞核蛋白微量制备试剂盒现货供应。
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文献和实验Extraction Kit 产品说明:本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取核蛋白和胞质蛋白,提取制备过程简便。制备的核蛋白和胞浆蛋白能保持天然活性,并且纯度较高。提取的蛋白可用于进一步的转录因子活性分析、凝胶阻滞实验(gel shift assay)、免疫共沉淀、Western Blotting、酶活性测定等后续蛋白质研究,可以每次从1×107个培养细胞或200mg 组织中提取所需要的蛋白质,可以使用50次。储存条件:2-~8℃。 产品特点: 1.最大限度保持蛋白质活性
-132-997)进行进一步纯化以满足测序要求。 FFPE 样本(福尔马林固定石蜡包埋):甲醛固定导致蛋白质和核酸发生交联和片段化,无法用于制备活细胞。此类样本同样可以使用商业化试剂盒(130-134-089)分离细胞核进行 snRNA-seq 或使用解离试剂盒(130-118-052)解离分选后进行基因组分析。 自动化样本解离制备细胞平台 (1)传统细胞制备方法的局限性 传统的样本制备方法,尤其是对复杂实体组织(如肿瘤、脑组织、纤维化组织)的处理,长期以来严重依赖手动操作。手动解离
不需要超速度离心,可以同时处理多个样品。 编号 包装 价格 产地 BSP009 50 Assays 300 生工 细胞核蛋白/浆蛋白抽提试剂盒 Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit 产品说明:本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取核蛋白和胞质蛋白,提取制备过程简便。制备的核蛋白和胞浆蛋白能保持天然活性,并且纯度较高。提取的蛋白可用于进一步的转录因子活性分析、凝胶阻滞实验
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